Name: labeling hescs and hmscs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with mr imaging
Uploaded: 2008-03-31T21:32:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging at JoVE.com

<p> Projektet fick stöd av en Leon J. Thal SEED anslag från California Institute för regenerativ medicin. Tobias Henning har finansierats av ett Research stipendium från den tyska Research Association (DFG, HE 4578/1-2). Vi vill tacksamt erkänna Juanito Meneses för hans råd om odling av mänskliga embryonala stamceller. </p>

<p> <strong>Märkning av hMSC med Ferucarbotran</strong> </p><p class="jove_content"> Detta är den teknik för märkning mänskliga mesenkymala stamceller med Ferucarbotran, en järnoxid baserat kontrastmedel för MR-avbildningar: </p><ol><li> Till att börja med platta celler 18-24 timmar innan märkningen förfarandet i T75 kolvar vid en sammanflödet av 80%. Om du använder en annan kultur maträtt, är detta lika med ca 10000 celler per cm <sup>2.</sup> </li><li> Nästa dag, börja med förbereda märkning medierna genom att tillsätta 30 ...

<ol>
	<li>Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+Hematopoietic+Progenitor+Cells+with+MR+Contrast+Agents.">Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents.</a> <b>228</b>, 760-767 (2003).</li><li>Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migration+of+iron+oxide+labeled+human+hematopoietic+progenitor+cells+in+a+xenotransplant+model:+in+vivo+monitoring+using+clinical+magnetic+resonance+imaging+equipment.">Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment.</a> <em style='font-style: italic'>Radiology</em>. <b>234</b>, 197-205 (2005).</li><li>Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+labeling+with+the+positive+MR+contrast+agent.">Cell labeling with the positive MR contrast agent.</a> <em style='font-style: italic'>Gadofluorine M. Eur Radiol</em>. <b>17</b>, 1226-1234 (2007).</li></ol>

<p> En icke-invasiv skildring av stamceller är avgörande för att övervaka praktiskt taget alla stamcellsbaserade terapi. En bättre förståelse av in vivo kinetiken av märkta stamceller, som visualiseras på MR-bilder kan leda vägen till en rationell och en effektivare användning av stamceller-baserade behandlingar. Eftersom vi använder kliniskt tillämpliga kontrastmedel och avbildningstekniker, bör våra presenteras protokoll vara lätt att överföra till program i patienter. Potentiella kliniska tillämpningar av våra metoder omf...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>D-MEM High Glucose</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>D5648</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gelatin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1890</td>
<td>dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 %</td>
</tr>
<tr>
<td>PBS (Ca++ Mg++ freed)</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td> 14190-144</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA 0.05%</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25300-120</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA 0.25%</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25200-114	</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS characterized</td>
<td>Reagent</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30071.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell Strainer (40 &#x03BC;m Nylon)</td>
<td>Tool</td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352340</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>10829018</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout Serum Replacer</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>10828028</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>b-Mercaptoethanol</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>7522</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>non-essential amino acids</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>11140050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FGF-2</td>
<td>Reagent</td>
<td>R&D Systems</td>
<td>233-FB-025</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>25030081</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin/Streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ferumoxides (Endorem)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Guerbet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ferucarbotran (Resovist&#174;)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Bayer Schering AG</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

labeling hescs and hmscs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with mr imaging

<p class="jove_content">De senaste åren har stamcellsforskningen lett till en bättre förståelse av utvecklingsbiologi, olika sjukdomar och dess potentiella inverkan på regenerativ medicin. En icke-invasiv metod för att övervaka de transplanterade stamcellerna upprepade gånger in vivo skulle avsevärt förbättra vår förmåga att förstå de mekanismer som styr stamceller död och identifiera trofiska faktorer och signalvägar som förbättrar engraftment stamceller. MR har visat sig vara ett effektivt verktyg för in vivo skildring av stamceller med nästan mikroskopiska anatomisk upplösning. För att upptäcka stamceller med MR, cellerna måste märkas med cellspecifik MR kontrastmedel. För detta ändamål är nanopartiklar av järnoxid, som oxid superparamagnetiska järnpartiklar (SPIO), tillämpas, på grund av deras höga känslighet för cell-detektion och deras utmärkta biokompatibilitet. SPIO partiklar består av en järnoxid kärna och ett dextran, carboxydextran eller stärkelse päls, och fungerar genom att skapa lokala fältet inhomogeniteter, som orsakar en minskad signal på T2-viktad MR-bilder. Denna presentation kommer att demonstrera tekniker för märkning av stamceller med kliniskt gäller MR kontrastmedel för efterföljande icke-invasiva in vivo-spårning av den märkta celler med MR.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging at JoVE.com

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

<p class="jove_content">För utvärdering av nya terapier stamceller är det viktigt att icke-invasivt spåra injicerade cellerna in vivo. Denna video visar hur du märka mänskliga mesenkymala och embryonala stamceller med järnoxid baserat kontrastmedel in vivo för senare MR in vivo.</p>

Märkning hESCs och hMSCs med nanopartiklar av järnoxid för icke-invasiv in vivo-spårning med MR

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Research

JoVE Journal

Biology

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Märkning stamceller med fluorescerande färger för icke-invasiv Detection med optisk avbildning

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Non-invasive 3D-Visualization with Sub-micron Resolution Using Synchrotron-X-ray-tomography

Icke-invasiv 3D-visualisering med submikrona upplösning Använda Synchrotron-röntgen-tomografi

Little is known about the internal organization of many micro-arthropods with body sizes below 1 mm. The reasons for that are the small size and the hard ...

Tracking Dynamics of Muscle Engraftment in Small Animals by <em>In Vivo</em> Fluorescent Imaging

Tracking Dynamics of Muscle Engraftment in Small Animals by In Vivo Fluorescent Imaging

Spårning Dynamics of Muscle engraftment i Small Animals av<em> In Vivo</em> Lysrör Imaging

Muscular dystrophies are a group of degenerative muscle diseases characterized by progressive loss of contractile muscle cells. Currently, there is no ...

Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

Lineage Märkning av Zebrafish Celler med laser Uncagable Fluorescein Dextran

A central problem in developmental biology is to deduce the origin of the myriad cell types present in vertebrates as they arise from undifferentiated ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean <em>Artemia franciscana</em>

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Långsiktig Dödligt toxicitetstest med Crustacean<em> Artemia franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Measuring Cell Cycle Progression Kinetics with Metabolic Labeling and Flow Cytometry

Mätning Cell Kinetics cellcykelreglering med metabolisk märkning och flödescytometri

Precise control of the initiation and subsequent progression through the various phases of the cell cycle are of paramount importance in proliferating ...

Metabolic Labeling of Leucine Rich Repeat Kinases 1 and 2 with Radioactive Phosphate

Metabolisk Märkning av Leucin Rich Upprepa Kinaser 1 och 2 med radioaktivt fosfat

Leucine rich repeat kinases 1 and 2 (LRRK1 and LRRK2) are paralogs which share a similar domain organization, including a serine-threonine kinase domain, ...

<em>In Vivo</em> 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

<em>In Vivo</em> 4-Dimensional Spårning av Hematopoietic Stem och stamceller i vuxen mus calvarial Benmärg

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Fluorescence Imaging with One-nanometer Accuracy (FIONA)

Fluorescence Imaging with One-nanometer Accuracy FIONA

Fluorescens Imaging med One-nanometer Noggrannhet (FIONA)

Fluorescence imaging with one-nanometer accuracy (FIONA) is a simple but useful technique for localizing single fluorophores with nanometer precision in ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Fekal Glukokortikoid Analys: Icke-invasiv Adrenal Övervakning av equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...