Name: single cell electroporation in vivo within the intact developing brain
Uploaded: 2008-07-11T18:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain at JoVE.com

Yazarlar Sharmin Hossain SCE micromicropipette ipuçları elektron mikroskobu görüntüleri olgunlaşmamış bir nöron ve Derek Dunfield time-lapse yakalama büyüme için teşekkür ederiz.

Ekipman set-up: <ol><li> Bu teknik için gerekli elektrik ekipmanları, bir uyarıcıdır bir osiloskop ve gümüş tel mikropipet eklenecek ile donatılmış bir mikropipet sahibi. Biz genellikle bir Axon aletleri Axoporator 800A cihazın kullanımı, ancak bu Çim aletleri gibi diğer yaygın uyarıcıları SD9 uyarıcıları tek hücreli elektroporasyon için de uygundur. Cihazda dahili bir iletken solüsyon içeren cam mikropipet içine yerleştirilen gümüş tel elektrot ile arayüzleri headstage, bağlanır. Sti...

<ol>
	<li>Bestman, J. E., Ewald, R. C., Chiu, S. L., Cline, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+single-cell+electroporation+for+transfer+of+DNA+and+macromolecules.">In vivo single-cell electroporation for transfer of DNA and macromolecules.</a> Nature Protocols. 1, 1267-1272 (2006).</li><li>Dunfield, D., Haas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+cell+electroporation.">Single cell electroporation.</a> Encyclopedia of Neuroscience (4th Ed.). , .</li><li>Haas, K., Jensen, K., Sin, W. C., Foa, L., Cline, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+electroporation+in+Xenopus+tadpoles+in+vivo--from+single+cells+to+the+entire+brain.">Targeted electroporation in Xenopus tadpoles in vivo--from single cells to the entire brain.</a> Differentiation. 70, 148-154 (2002).</li><li>Haas, K., Sin, W. C., Javaherian, A., Cline, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+electroporation+for+gene+transfer+in+vivo.">Single-cell electroporation for gene transfer in vivo.</a> Neuron. 29, 583-591 (2001).</li></ol>

Tek hücreli elektroporasyon (SCE), gen fonksiyonu belirleyen ve hedeflenen genetik manipülasyon yapmak için güçlü bir araçtır. Albino larva şeffaflık ve beyin erişilebilirlik Bu model sistem canlı bir organizma içinde nöronal büyüme ve hücre içi olayları görselleştirmek için ideal olun. SCE, tek bir nöronun büyüme görselleştirme izin verir, ve aksi halde değiştirilmemiş beynin içinde hücre özerk manipülasyonlar gerçekleştirebilirsiniz. Bu video makale Xenopus laevis tetarlar tek hücreli elektroporasyon i...

single cell electroporation in vivo within the intact developing brain

Tek hücreli elektroporasyon (SCE), in vivo hazırlıkları da dahil olmak üzere sağlam doku içindeki tek tek hücrelerin içine DNA veya diğer makromoleküller teslim sağlayan özel bir tekniktir. Bu tekniğin en belirgin avantajı, çevresindeki doku değişmeden bırakarak bu deneysel manipülasyonlar ve böylece küresel tedaviler sonucunda hücre özerk etkileri ayırt bireysel hücreleri üzerinde olabilir. Ileri in vivo görüntüleme teknikleri ile kombine edildiğinde, floresan belirteçlerin SCE hücresel morfoloji, hücre büyümesi ve hücre içi olayları saniye gün değişen zaman çizelgesi üzerinde doğrudan görselleştirme izin verir. Bu tekniği, in vivo ve ex vivo hazırlıkları içinde çeşitli olsa da, biz Xenopus laevis tetarlar kullanmak için bu tekniği optimize var. Bu video makalede, detaylı albino Xenopus larva bozulmamış beyin içinde nöronlar bir floresan boya veya plazmid DNA SCE prosedürü. Ayrıca verim optimize yöntemleri tartışmak ve canlı SCE tarafından floresan etiketli nöronlar iki foton floresan görüntüleme örnekler göstereceğiz.

Watch this Scientific Journal Video about Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain at JoVE.com

Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain

Tek hücreli elektroporasyon (SCE), in vivo hazırlıkları da dahil olmak üzere sağlam doku içindeki tek tek hücrelerin içine DNA veya diğer makromoleküller teslim sağlayan özel bir tekniktir. Xenopus laevis larva bozulmamış beyin içinde nöronların bir floresan boya veya plazmid DNA SCE için burada ayrıntılarıyla prosedür.

Tek Hücre Elektroporasyon bozulmamış Gelişmekte olan beyin içindeki in vivo

Single-cell electroporation (SCE) is a specialized technique allowing the delivery of DNA or other macromolecules into individual cells within intact ...

Research

JoVE Journal

Biology

Electroporation of Mycobacteria

Mikobakteriler, Elektroporasyon

High efficiency transformation is a major limitation in the study of mycobacteria. The genus Mycobacterium can be difficult to transform; this is mainly ...

In utero and ex vivo Electroporation for Gene Expression in Mouse Retinal Ganglion Cells

In utero and ex vivo Electroporation for Gene Expression in Mouse Retinal Ganglion Cells

Fare Retina Ganglion Hücreleri Gen İfadesi utero ve ex vivo Elektroporasyon

The retina and its sole output neuron, the retinal ganglion cell (RGC), comprise an excellent model in which to examine biological questions such as cell ...

Mesoscopic Fluorescence Tomography for In-vivo Imaging of Developing Drosophila

Mesoscopic Fluorescence Tomography for In-vivo Imaging of Developing Drosophila

Mezoskopik Floresans Tomografi için In-vivo Görüntüleme Geliştirme Drosophila</em

Visualizing  developing organ formation as well as progession and treatment of disease often  heavily relies on the ability to optically interrogate ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Tek hücreli fare Koni fotoreseptörlerin Emiş Kayıtlar

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

In vivo Imaging of Intact Drosophila Larvae at Sub-cellular Resolution

In vivo Imaging of Intact Drosophila Larvae at Sub-cellular Resolution

Alt hücresel Çözünürlük bozulmamış Drosophila Larva in vivo Görüntüleme

Recent improvements in optical imaging, genetically encoded fluorophores and genetic tools allowing efficient establishment of desired transgenic animal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos in vivo Elektroporasyon Yetişkin Zebra balığı Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Yenileyici Yetişkin Zebra balığı Tail Fin içine Morpholinos in vivo olarak Elektroporasyon

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Confocal Imaging of Single Mitochondrial Superoxide Flashes in Intact Heart or In Vivo

Tek Mitokondriyal süperoksit Bozulmamış Kalp Flaşlar veya konfokal Görüntüleme<em&gt; In Vivo</em

Mitochondrion is a critical intracellular organelle responsible for energy production and intracellular signaling in eukaryotic systems. Mitochondrial ...

Assessment of Calcium Sparks in Intact Skeletal Muscle Fibers

Kalsiyum değerlendirilmesi Bozulmamış İskelet kas liflerinin içinde Sparks

Maintaining homeostatic Ca2+ signaling is a fundamental physiological process in living cells. Ca2+ sparks are the elementary units of Ca2+ signaling in ...

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

Fare Testis İn Vivo Mikroenjeksiyon ve Elektroporasyon

This video and article contribution gives a comprehensive description of microinjection and electroporation of mouse testis in vivo. This particular ...