Name: neutrophil isolation protocol
Uploaded: 2008-07-23T22:05:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Neutrophil Isolation Protocol at JoVE.com

<p class="jove_title"> Nötrofil İzolasyon Protokolü </p><ol><li> Tüm reaktifler oda sıcaklığına getirin. </li><li> 5.0 ml santrifüj tüpüne nötrofil izolasyon medya toplayın. Ayrılması medya üzerindeki kan dikkatlice katman 5.0 ml. Yavaş ve dikkatli bir şekilde ve medya yüzeyine yakın kan ve medya karışmasını önlemek için pipet ile bu adımı gerçekleştirin. </li><li> 20-25 dakika süreyle 35 500 RCF santrifüjleyin ° C Plazma, monositler, izolasyon medya, nötrofiller, daha fazla izolasyon medya ve kırmızı kan h?...

<ol>
	<li>Boyum, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+leucocytes+from+blood+and+bone+marrow.">Separation of leucocytes from blood and bone marrow.</a> <em style='font-style: italic'>Scand. J. Clin. Invest</em>. <b>21</b>, 77-83 (1968).</li><li>England, J. M., Rowan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+assignment+of+values+to+fresh+blood+used+for+calibrating+automated+blood+cell+counters.">The assignment of values to fresh blood used for calibrating automated blood cell counters.</a> <em style='font-style: italic'>Clin. Lab. Haemat</em>. <b>10</b>, 203-212 (1988).</li><li>Garcia, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+leukocyte+extraction+methods+for+cytomegalovirus+antigenemia+assay.">Comparison of two leukocyte extraction methods for cytomegalovirus antigenemia assay.</a> <em style='font-style: italic'>J. Clin. Microbiol</em>. <b>34</b>, 182-184 (1996).</li><li>Ferrante, A., Thong, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal+conditions+for+simultaneous+purification+of+mononuclear+and+polymorphonuclear+leucocytes+from+human+peripheral+blood+by+the+Ficoll-Hypaque+method.">Optimal conditions for simultaneous purification of mononuclear and polymorphonuclear leucocytes from human peripheral blood by the Ficoll-Hypaque method.</a> <em style='font-style: italic'>J. Immunol. Methods</em>. <b>36</b>, 109-109 (1980).</li></ol>

<p> Yoğunluk gradiyenti ayırma yöntemi tam kan sodyum metrizoate ve Dextran&#39;ın 500 karışımı kullanarak insan nötrofil izole etmek için kullanılır. Bu yöntem, nötrofil ayrılması için Ferrante ve Thong (1980) tarafından güncellenmiştir Boyum (1968) tarafından mononükleer lökosit ayırma yöntemi dayanıyor. </p><p> Bir bağış toplama sonra, tam kan, EDTA, sitrat veya heparin ile antikoagüle olabilir. Kısa ömürlü olduğundan, nötrofil toplama 2-4 saat içinde kullanılmalıdır. Prosedür yoğunluk gradiyenti ort...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Lymphocyte Poly(R)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Cedarlane Labs</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>PolymorphprepTM can be used as an alternative</td>
</tr>
<tr>
<td>Hank's Balanced Salt Solution without Calcium Chloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen Gibco</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Human Serum Albumin</td>
<td>Reagent</td>
<td>ZLB Bioplasma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Red Cell Lysis Buffer</td>
<td>Reagent</td>
<td>Roche Diagnostics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge</td>
<td>Tool</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vortexer</td>
<td>Tool</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pasteur Pipettes and bulb</td>
<td>Tool</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PolymorphprepTM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Axis-Shield PoC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Alternative reagent to Lymphocyte-Poly (R)</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringe Filter</td>
<td>Other</td>
<td>Millipore</td>
<td>SLGV033RS</td>
<td>Millex-GV, 0.22 &#181;m, PVDF, 33 mm, gamma-sterilizable</td>
</tr>
<tr>
<td>Hank's Balance Salt Solution with Calcium Chloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen Gibco</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

neutrophil isolation protocol

<p class="jove_content">Polimorfonükleer nötrofil granülositler (PMN), insanlarda ve inflamatuar immün yanıt sitesinde ulaşmak için ilk hücreleri arasındaki en bol lökosit vardır. Inflamasyon kilit rol nedeniyle, hareketlilik, sitokin üretimi, fagositoz ve tümör hücre mücadele gibi nötrofil işlevlerini yoğun olarak çalışılmaktadır. Nötrofil kısa ömürlü ve toplama 2-4 saat içinde kullanılması gereken bu yana özellikle nötrofil özel fonksiyonlar karakterize için diğer kan hücreleri ayırarak, temiz, hızlı ve güvenilir bir yöntem, in vitro çalışmalar için arzu edilir. Burada, piyasada bulunan sodyum metrizoate ve Dextran&#39;ın 500 karışımı ayırma medya kullanılarak, tam kan, insan nötrofil izole etmek için standart bir yoğunluk gradiyenti ayırma yöntemi göstermektedir. Prosedür yoğunluk gradiyenti orta, santrifüj, nötrofil tabakasının ayrılması ve kalıntı eritrositlerin parçalanması üzerine katman tam kan oluşur. Hücreler daha sonra, yıkanmış, sayılır ve istenilen konsantrasyon için tampon yeniden süspanse. Doğru yapıldığında, bu yöntem&gt;&gt;% 95 canlılığı% 95 nötrofil örnekleri verim görülmüştür.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Neutrophil Isolation Protocol at JoVE.com

Neutrophil Isolation Protocol

<p class="jove_content">Nötrofiller inflamatuar immün yanıt sitesinde ulaşmak için ilk hücreleri arasında olup, görevlerini ve mekanizmalar in vitro yoğun çalışmalar yapılmıştır. Biz piyasada bulunan ayırma medya kullanılarak, tam kan, insan nötrofil izole etmek için standart bir yoğunluk gradiyenti ayırma yöntemi göstermektedir.</p>

Nötrofil İzolasyon Protokolü

Neutrophil polymorphonuclear granulocytes (PMN) are the most abundant leukocytes in humans and among the first cells to arrive on the site of inflammatory ...

Research

JoVE Journal

Biology

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

Sivrisinek Yetiştirme Protokolü (A. gambiae)

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

A Protocol for the Production of KLRG1 Tetramer

KLRG1 tetramer Üretim için Protokol

Killer cell lectin-like receptor G1 (KLRG1) is a type II transmembrane glycoprotein inhibitory receptor belonging to the C type lectin-like superfamily. ...

DNA-based Fish Species Identification Protocol

DNA tabanlı Balık Türleri Tanımlama Protokolü

We have developed a fast, simple, and accurate DNA-based screening method to identify the fish species present in fresh and processed seafood samples. ...

Protocol for Isolation of Primary Human Hepatocytes and Corresponding Major Populations of Non-parenchymal Liver Cells

İlköğretim İnsan Hepatositlerin İzolasyonu ve Non-parankimal karaciğer hücrelerinin Binbaşı popülasyonları İlgili Protokolü

Beside parenchymal hepatocytes, the liver consists of non-parenchymal cells (NPC) namely Kupffer cells (KC), liver endothelial cells (LEC) and hepatic ...

Clock Scan Protocol for Image Analysis: ImageJ Plugins

Görüntü Analizi için Saat Tarama Protokolü: ImageJ Eklentileri

The clock scan protocol for image analysis is an efficient tool to quantify the average pixel intensity within, at the border, and outside (background) a ...

A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice

Farelerden Pankreas Adacık İzolasyon için Basit Bir Yüksek Verimlilik Protokolü

Pancreatic islets, also called the Islets of Langerhans, are a cluster of endocrine cells which produces hormones for glucose regulation and other ...

The MUB<sub>40</sub> Peptide for Use in Detecting Neutrophil-Mediated Inflammation Events

The MUB40 Peptide for Use in Detecting Neutrophil-Mediated Inflammation Events

MUB<sub>40</sub> peptid nötrofil aracılıklı iltihaplanma olayları algılama kullanmak için

Here, we provide a protocol involving the use of MUB40, a synthesized peptide with the ability to bind glycosylated lactoferrin stored at high ...

Rapid Lipid Droplet Isolation Protocol Using a Well-established Organelle Isolation Kit

Bir Well-established organel izolasyon Kit kullanarak hızlı Lipid damlacık yalıtım Protokolü

Lipid droplets (LDs) are bioactive organelles found within the cytosol of the most eukaryotic and some prokaryotic cells. LDs are composed of neutral ...

An Improved Time- and Labor- Efficient Protocol for Mouse Primary Hepatocyte Isolation

Fare Primer Hepatosit İzolasyonu için Geliştirilmiş Zaman ve İş Gücü Verimli Protokolü

Primary hepatocytes are used extensively in liver in vitro research, especially in glucose metabolism studies. A base technique has been adapted based on ...

Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an <em>In Vitro</em> Spontaneous Death Assay

Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an In Vitro Spontaneous Death Assay

CLON-G ile Nötrofil Yaşam Süresinin Uzatılması ve <em>In Vitro</em> Spontan Ölüm Testi

The average lifespan of a neutrophil is less than 24 h, which limits basic research on neutrophils and the application of neutrophil studies. Our previous ...