Name: whole-cell recordings of light evoked excitatory synaptic currents in the retinal slice
Uploaded: 2008-07-02T15:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice at JoVE.com

<p class="jove_title"> Lösungen </p><ul><li> Intrazelluläre Lösung für Ganglienzellen (in mm): 100 K-Gluconat, 8 KCl, 1 MgCl <sub>2,</sub> 1 EGTA, 10 HEPES, 4 ATP, .5 GTP, 90 uM Sulforhodamine B (für die Färbung), auf pH = 7,4 mit angepassten KOH </li><li> Intrazelluläre Lösung für bipolare Zellen (in mm): 90 K-Gluconat, 8 KCl, 1 MgCl <sub>2,</sub> 10 BAPTA, 10 HEPES, 4 ATP, .5 GTP, 90 uM Sulforhodamine B (für die Färbung), auf pH = 7,4 mit angepassten KOH </li><li> Extrazelluläre Ringer-Lösung (in mM): 112 NaCl, 5 Glucose, 5 HEPES...

<ol>
	<li>Cook, P. B., Lukasiewicz, P. D., McReynnolds, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABA(C)+receptors+control+adaptive+changes+in+a+glycinergic+inhibitory+pathway+in+salamander+retina.">GABA(C) receptors control adaptive changes in a glycinergic inhibitory pathway in salamander retina.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Neuroscience</em>. <b>20</b>, 806-812 (2000).</li><li>Heflin, S. J., Cook, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Narrow+and+wide+field+amacrine+cells+fire+action+potentials+in+response+to+depolarization+and+light+stimulation.">Narrow and wide field amacrine cells fire action potentials in response to depolarization and light stimulation.</a> <em style='font-style: italic'>Visual Neuroscience</em>. <b>24</b>, 197-206 (2007).</li><li>Ichinose, T., Shields, C. R., Lukasiewicz, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+Channels+in+the+Transient+Retinal+Bipolar+Cells+Enhance+Visual+Responses+in+Ganglion+Cells.">Sodium Channels in the Transient Retinal Bipolar Cells Enhance Visual Responses in Ganglion Cells.</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci.</em>. <b>25</b>, 1856-1865 (2005).</li></ol>

<p> Vorteile: </p><ol><li> Alle Zelltypen sind zugänglich <br /></li><li> Leichte Identifikation von Zelltypen, insbesondere wenn ein Fluoreszenzfarbstoff an die Elektrode zugesetzt <br /></li><li> Pharmakologische Wirkstoffe leicht zu erreichen Zielzellen <br /></li><li> Die Patch-Clamp-Technik erlaubt es, die Rolle der verschiedenen Ionenkanäle in der Netzhaut Berechnungen zu untersuchen. Die gleichen Informationen können nicht durch extrazellulären spike-Aufnahmen oder Aufnahmen mit scharfen Elektroden erzielt werden. <br /></li><li> Die...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Multiclamp 700A</td>
<td>Patch Clamp Amplifier</td>
<td>Molecular Devices</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SZX9</td>
<td>Dissection Micropscope</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BX50WI</td>
<td>Upright Microscope</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with 40x, 10x water immersion objective, fluorescent filters and mercury lamp</td>
</tr>
<tr>
<td>P-97</td>
<td>Micropipette Puller</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Lucivid</td>
<td>Microscope image injector</td>
<td>Mbf bioscience</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>8-channel perfusion system</td>
<td>Microperfusion</td>
<td>Parker Hannfin corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bits++</td>
<td>Digital Video Processor</td>
<td>Cambridge Research Systems</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Infrared Oculars</td>
<td>Other</td>
<td>ITT</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adhesive silicone wells</td>
<td>Other</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>20mm diameter, 1.0mm deep</td>
</tr>
<tr>
<td>Membrane Filters</td>
<td>Filter</td>
<td>Milipore</td>
<td>HAWPO1300</td>
<td>.45&#181;m HA</td>
</tr>
<tr>
<td>Borosilicate Glass Capillaries</td>
<td>Electrode glass</td>
<td>World Precision Instruments</td>
<td>1B150-4</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Syringe Filters</td>
<td>Filter</td>
<td>Whatman</td>
<td>6789-0402</td>
<td>4mm filters, .2um Nylon Membrane, Polypropylene housing</td>
</tr>
<tr>
<td>IR camera</td>
<td>Micropscope mounted camera</td>
<td>Sony</td>
<td>SPT-M324</td>
<td>Extrawave HAD, B7W video camera</td>
</tr>
<tr>
<td>Picrotoxin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P1675</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Strychnine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0532</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imidazole-4-acetic acid sodium salt</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>I7013</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Larval tiger salamanders</td>
<td>Animal</td>
<td>Charles E. Sullivan (Nashville, TN)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

whole-cell recordings of light evoked excitatory synaptic currents in the retinal slice

<p class="jove_content">Wir nutzen die whole-cell Patch-Clamp-Technik, um die synaptische Schaltungen, die zugrunde liegende visuelle Informationsverarbeitung in der Netzhaut zu untersuchen. In diesem Video werden wir Sie durch den Prozess der Durchführung Ganzzellableitungen des Lichts hervorgerufen Ströme der einzelnen Zellen in der Netzhaut schneiden Vorbereitung leiten. Wir nutzen die aquatische Tiger Salamander als Tiermodell. Wir von der Beschreibung der Dissektion des Auges beginnen und zeigen, wie Scheiben für elektrophysiologische Aufzeichnungen sind montiert. Sobald die Scheibe in der Aufnahme Kammer gegeben ist, zeigen wir, wie man whole-cell voltage clamp Aufnahmen durchzuführen. Wir projizieren visuelle Reize auf die Photorezeptoren in der Scheibe, um Licht hervorgerufene aktuelle Antworten zu entlocken. Während der Aufnahmen haben wir versorgen die Scheibe mit pharmakologischen Mitteln, wobei eine 8-Kanal-Perfusion-System ermöglicht es uns, schnell zwischen verschiedenen Agenten zu wechseln. Die Netzhaut Scheibe Vorbereitung ist weithin bekannt für Patch Clamp Messungen in der Netzhaut, insbesondere auf amakrinen oder bipolare Zellen, die nicht zugänglich sind in einer ganzen-mount Vorbereitung zu studieren.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice at JoVE.com

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

<p class="jove_content">Dieses Video zeigt den Prozess der whole-cell voltage clamp Aufnahmen in der Netzhaut Scheibe der aquatischen Tiger Salamander. Wir zeigen die Herstellung der Scheibe als auch, wie man Patch Clamp Messungen während visueller Stimulation der Netzhaut führen.</p>

Ganzzellableitungen of Light evozierten exzitatorischen synaptischen Ströme in der Netzhaut Scheiben

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

Research

JoVE Journal

Biology

Horizontal Slice Preparation of the Retina

Horizontale Scheiben Vorbereitung der Retina

Traditionally the vertical slice and the whole-mount preparation of the retina have been used to study the function of retinal circuits. However, many of ...

Forschung

Biologie

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

Whole Cell Recordings von Brain of Adult Drosophila

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Major Components of the Light Microscope

Wesentliche Komponenten des Lichtmikroskops

The light microscope is a basic tool for the cell biologist, who should have a thorough understanding of how it works, how it should be aligned for ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Einzel-Zell-Saug-Recordings aus Maus Zapfen-Photorezeptoren

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium CRAC Currents in Human T Lymphocytes

Whole-Cell Aufnahme von Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Ströme in menschlichen T-Lymphozyten

In T lymphocytes, depletion of Ca2+ from the intracellular Ca2+ store leads to activation of plasmalemmal Ca2+ channels, called Calcium Release-Activated ...

Studying Proteolysis of Cyclin B at the Single Cell Level in Whole Cell Populations

Studieren Proteolyse von Cyclin B an der Single Cell Level in Whole Cell Populationen

Equal distribution of chromosomes between the two daughter cells during cell division is a prerequisite for guaranteeing genetic stability 1. Inaccuracies ...

The Slice Culture Method for Following Development of Tooth Germs In Explant Culture

Die Slice-Kultur-Verfahren zur Nach Entwicklung der Zahnkeime In Explantation Kultur

Explant culture allows manipulation of developing organs at specific time points&#160;and is therefore an important method for the developmental ...

<em>In vivo</em> Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

In vivo Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

<em>In vivo</em> Klonale Verfolgung von hämatopoetischen Stamm-und Vorläuferzellen durch Fünf Fluoreszierende Proteine ​​mit Hilfe der konfokalen und Multiphotonen Mikroskopie Markierte

We developed and validated a fluorescent marking methodology for clonal tracking of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) with high spatial and ...

<em>In Vivo</em> 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

<em>In-vivo-4-Dimensional-Tracking</em> von hämatopoetischen Stamm-und Vorläuferzellen im erwachsenen Maus Schädeldachknochenmark

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress <em>In Vitro</em>

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Verfahren zur Beurteilung der Auswirkungen einer Reihe von Wellenlängen und Intensitäten von Rot / Nah-Infrarot-Licht-Therapie auf oxidativen Stress<em&gt; In-vitro-</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...