Name: in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method
Uploaded: 2008-07-23T22:33:00
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<ol><li> Gélatiniser flacon T75 en utilisant une solution à 0,1% de gélatine et de la plaque incuber dans une 37 ° C, le CO <sub>2</sub> de la culture incubateur à 5% du tissu nuit un jour avant. </li><li> Sortez les cellules d&#39;incubation MES, aspirer le milieu, rincer la culture de cellules ES avec PBS, ajouter la solution de trypsine 0,05% à recouvrir le fond du plat (2 plaques ml/100mm). </li><li> Incuber à 37 ° C pendant environ 1 minute, jusqu&#39;à ce que les cellules sont desquamation de la plaque. <br /></li><li> Doucement ...

<ol>
	<li>Wobus, A. M., Wallukat, G., Hescheler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluripotent+mouse+embryonic+stem+cells+are+able+to+differentiate+into+cardiomyocytes+expressing+chronotropic+responses+to+adrenergic+and+cholinergic+agents+and+Ca2++channel+blockers.">Pluripotent mouse embryonic stem cells are able to differentiate into cardiomyocytes expressing chronotropic responses to adrenergic and cholinergic agents and Ca2+ channel blockers.</a> <em style='font-style: italic'>Differentiation</em>. <b>48</b>, 173-182 (1991).</li><li>Metzger, J. M., Lin, W. I., Samuelson, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transition+in+cardiac+contractile+sensitivity+to+calcium+during+the+in+vitro+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Transition in cardiac contractile sensitivity to calcium during the in vitro differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>126</b>, (1994).</li></ol>

<p> Les inconvénients de la méthode de la goutte suspendue sont les suivants: le volume de liquide d&#39;une baisse est limitée à moins de 50ul due au maintien de gouttes suspendues sur le couvercle par la tension de surface, et il est impossible de changer le milieu des gouttes pendantes. Observation de former EBS gouttes directement avec la microscopie est également très difficile pendant la culture. Plus loin plus, la méthode de la goutte suspendue compose de deux étapes, par conséquent, une série d&#39;étapes de la méthode de la...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11965-092</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum(FBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30070.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>25030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Non-Essential Amino Acids</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11140-050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicllin / Streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11360-70</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>&#x03B2;-mercaptoethanol</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>ES-007-E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>leukemia inhibitory factor(LIF)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>LIF2005</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96-well ultralow attachment plate</td>
<td>Tool</td>
<td>Corning</td>
<td>3474</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method

<p class="jove_content">Les cellules souches ont le potentiel remarquable pour développer dans de nombreux types cellulaires différents. Quand une cellule souche se divise, chaque nouvelle cellule a le potentiel de demeurer une cellule souche ou devenir un autre type de cellule avec une fonction plus spécialisée, ce prometteur de la science est à la tête des scientifiques pour étudier la possibilité de thérapies cellulaires pour traiter la maladie. Lorsque la culture en suspension sans facteurs antidifferentiation, les cellules souches embryonnaires spontanément différencier et former en trois dimensions des agrégats multicellulaires. Ces agrégats cellulaires sont appelés corps embryoïdes (EB). Culture en suspension de chute est une méthode largement utilisée EB formation de l&#39;induction. Le fond arrondi de la goutte suspendue permet l&#39;agrégation des cellules ES qui peuvent fournir des cellules MES un bon environnement pour former EBS. Le nombre de cellules ES aggregatied dans une goutte suspendue peut être contrôlée en faisant varier le nombre de cellules dans la suspension cellulaire initiale à être accroché comme une goutte sur le couvercle de la boîte de Pétri. En utilisant cette méthode, nous pouvons reproductible forme homogène EB à partir d&#39;un nombre prédéterminé de cellules ES.</p>

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In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

<p class="jove_content">Cette vidéo montre comment effectuer la différenciation in vitro de cellules souches embryonnaires de souris aux corps embryoïdes utilisant la méthode de la goutte pendante.</p>

Différenciation in vitro de souris embryonnaires souches (MES) Cellules utilisant la méthode de goutte suspendue

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

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In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

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Biologie

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