Name: in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method
Uploaded: 2008-07-23T22:33:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method at JoVE.com

<ol><li> 전에 37 ° C, 5 % CO <sub>2</sub> 조직 문화의 인큐베이터 하룻밤 하루에 0.1 % 젤라틴 용액과 부화 플레이트를 사용하여 T75 휴대용 술병을 아교 질로 만들다. </li><li> , 품어에서 MES의 세포를 꺼내서 매체를 대기음, PBS와 ES 세포 문화를 린스, 요리의 코트 바닥 (2 ml/100mm 판)에 0.05 %의 트립신 솔루션을 추가합니다. </li><li> 세포가 접시를 sloughing 때까지, 37 ° C 약 1 분 동안 품어. <br /></li><li> 부드럽게 (pipet 위, 아래) 4-6 ?...

<ol>
	<li>Wobus, A. M., Wallukat, G., Hescheler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluripotent+mouse+embryonic+stem+cells+are+able+to+differentiate+into+cardiomyocytes+expressing+chronotropic+responses+to+adrenergic+and+cholinergic+agents+and+Ca2++channel+blockers.">Pluripotent mouse embryonic stem cells are able to differentiate into cardiomyocytes expressing chronotropic responses to adrenergic and cholinergic agents and Ca2+ channel blockers.</a> <em style='font-style: italic'>Differentiation</em>. <b>48</b>, 173-182 (1991).</li><li>Metzger, J. M., Lin, W. I., Samuelson, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transition+in+cardiac+contractile+sensitivity+to+calcium+during+the+in+vitro+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Transition in cardiac contractile sensitivity to calcium during the in vitro differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>126</b>, (1994).</li></ol>

<p> 한 방울의 액체 볼륨으로 인해 표면 장력에 의해 뚜껑에 매달려 방울을 유지하기 위해보다 50ul에 국한되며, 그것은 방울을 매달리기 매체를 변경 불가능 : 매달려 드롭 방식의 단점은 다음과 같다. 직접 현미경과 방울에 EBS를 형성의 관찰 재배 기간도 매우 어렵습니다. 또한 더 매달려 드롭 방법은 두 단계로 구성되어 있으므로, 매달려 드롭 방식의 단계는 일련의은 골칫거리 수 있습니다. </p>

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11965-092</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum(FBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30070.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>25030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Non-Essential Amino Acids</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11140-050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicllin / Streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11360-70</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>&#x03B2;-mercaptoethanol</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>ES-007-E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>leukemia inhibitory factor(LIF)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>LIF2005</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96-well ultralow attachment plate</td>
<td>Tool</td>
<td>Corning</td>
<td>3474</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method

<p class="jove_content">줄기 세포는 다양한 세포 유형으로 개발하는 놀라운 잠재력을했습니다. 줄기 세포가 분할되면, 각각의 새로운 세포 중 줄기 세포 유지하거나보다 전문적인 기능을 세포의 다른 종류가 될 수있는 잠재력을 가지고, 과학의이 약속은 질병을 치료하는 세포 기반 치료법​​의 가능성을 조사하기 위해 과학자을 선도하고 있습니다. 언제 antidif​​ferentiation 요소없이 서스펜션의 문화, 배아 줄기 세포는 저절로 차별과 입체 다세포 합산를 형성하고 있습니다. 이러한 세포 집계는 embryoid 단체 (EB)라고합니다. 드롭 문화를 교수형에 처하는 것은 널리 사용 EB 형성 유도 방식입니다. 매달려 드롭의 둥근 바닥 MES 세포에게 성형 EBS를위한 좋은 환경을 제공할 수있는 ES 세포의 집합 수 있습니다. 교수형 드롭 aggregatied ES 세포의 숫자는 페트리 접시의 뚜껑에서 드롭으로 멈춘 것으로 초기 세포 현탁액에있는 세포의 수를 변화에 의해 제어할 수 있습니다. 이 방법을 사용하여 우리는 reproducibly ES 세포의 미리 정해진 숫자의 균질 EBS를 형성할 수 있습니다.</p>

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In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

<p class="jove_content">이 동영상은 매달려 드롭 방법을 사용하여 embryoid 기관에 마우스 배아 줄기 세포의 체외 차별에 수행하는 방법을 보여줍니다.</p>

공중 드롭 방법을 사용하여 마우스 배아 줄기 (MES) 세포의 체외 차별에

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

바이오 플립 칩을 사용하여 배아 줄기 세포의 Patterning

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

연구

생물학

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The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

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Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

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Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Profiling Individual Human Embryonic Stem Cells by Quantitative RT-PCR

정량적 RT-PCR에 의해 개별 인간 배아 줄기 세포를 프로파일 링

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