Name: in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method
Uploaded: 2008-07-23T22:33:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method at JoVE.com

<ol><li> Gelatinizar T75 frasco con una solución de gelatina al 0,1% y la placa se incuba en un 37 ° C, 5% de CO <sub>2</sub> incubadora de cultivo de tejidos durante la noche un día antes. </li><li> Saque las células MES de incubar, se aspira el medio, enjuague el cultivo de células ES con PBS, se añaden 0,05% de solución de tripsina para cubrir el fondo del plato (2 placas ml/100mm). </li><li> Se incuba a 37 ° C durante aproximadamente un minuto, hasta que las células son desprendimiento de la placa. <br /></li><li> Suavemente tritur...

<ol>
	<li>Wobus, A. M., Wallukat, G., Hescheler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluripotent+mouse+embryonic+stem+cells+are+able+to+differentiate+into+cardiomyocytes+expressing+chronotropic+responses+to+adrenergic+and+cholinergic+agents+and+Ca2++channel+blockers.">Pluripotent mouse embryonic stem cells are able to differentiate into cardiomyocytes expressing chronotropic responses to adrenergic and cholinergic agents and Ca2+ channel blockers.</a> <em style='font-style: italic'>Differentiation</em>. <b>48</b>, 173-182 (1991).</li><li>Metzger, J. M., Lin, W. I., Samuelson, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transition+in+cardiac+contractile+sensitivity+to+calcium+during+the+in+vitro+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Transition in cardiac contractile sensitivity to calcium during the in vitro differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> <em style='font-style: italic'>J Cell Biol</em>. <b>126</b>, (1994).</li></ol>

<p> Las desventajas del método de gota son los siguientes: el volumen de líquido de una caída se limita a menos de 50 ul por el mantenimiento de las gotas colgando de la tapa por la tensión superficial, y es imposible cambiar el medio para colgar gotas. La observación de la formación de EBS en gotas directamente con el microscopio es también muy difícil durante el cultivo. Más aún, el método de la gota colgante consta de dos pasos, por lo tanto, una serie de pasos del método de gota puede ser un problema. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11965-092</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum(FBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30070.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>25030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Non-Essential Amino Acids</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11140-050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicllin / Streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco</td>
<td>11360-70</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>&#x03B2;-mercaptoethanol</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>ES-007-E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>leukemia inhibitory factor(LIF)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Chemicon</td>
<td>LIF2005</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96-well ultralow attachment plate</td>
<td>Tool</td>
<td>Corning</td>
<td>3474</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

in vitro differentiation of mouse embryonic stem (mes) cells using the hanging drop method

<p class="jove_content">Las células madre tienen el potencial extraordinario para convertirse en muchos tipos celulares diferentes. Cuando una célula madre se divide, cada nueva célula tiene la capacidad de seguir siendo una célula madre o convertirse en otro tipo de célula con una función más especializada, Esta prometedora de la ciencia está llevando a los científicos a investigar la posibilidad de terapias basadas en células para tratar la enfermedad. Cuando la cultura en suspensión sin factores de antidiferenciación, las células madre embrionarias se diferencian y espontánea forma tridimensional agregados multicelulares. Estos agregados de células se llaman cuerpos embrioides (EB). Colgando cultura gota es una formación muy utilizado EB método de inducción. La parte inferior redondeada de gota colgante permite la agregación de células madre embrionarias que pueden proporcionar las células MES un buen ambiente para la formación de EBS. El número de células madre embrionarias aggregatied en una gota se puede controlar variando el número de células en la suspensión inicial de la célula para ser colgado como una gota de la tapa de la placa de Petri. El uso de este método que puede reproducible forma homogénea EBs de un número determinado de células madre embrionarias.</p>

Watch this Scientific Journal Video about In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method at JoVE.com

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem mES Cells Using the Hanging Drop Method

<p class="jove_content">Este vídeo demuestra cómo llevar a cabo en la diferenciación in vitro de células madre embrionarias de ratón a cuerpos embrioides utilizando el método de gota.</p>

En la diferenciación in vitro de la madre embrionarias de ratón (MES), las células con el método de gota

Stem cells have the remarkable potential to develop into many different cell types. When a stem cell divides, each new cell has the potential to either ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vitro Differentiation of Mouse Embryonic Stem (mES) Cells Using the Hanging Drop Method

Patterning of Embryonic Stem Cells Using the Bio Flip Chip

Los patrones de las células madre embrionarias usando el Flip Chip Bio

Cell-cell interactions consisting of diffusible signaling and cell-cell contact (juxtacrine signaling) are important in numerous biological processes such ...

Investigación

Biología

In vitro and in vivo Bioluminescence Reporter Gene Imaging of Human Embryonic Stem Cells

In vitro e in vivo de imágenes de bioluminiscencia gen reportero de células estaminales embrionarias humanas

The discovery of human embryonic stem cells (hESCs) has dramatically increased the tools available to medical scientists interested in regenerative ...

In vitro Labeling of Human Embryonic Stem Cells for Magnetic Resonance Imaging

En el etiquetado in vitro de células estaminales embrionarias humanas de Resonancia Magnética

Human embryonic stem cells (hESC) have demonstrated the ability to restore the injured myocardium. Magnetic resonance imaging (MRI) has emerged as one of ...

The Preparation of <em>Drosophila</em> Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

La preparación de los<em> Drosophila</em> Los embriones para Live-Imaging utilizando el protocolo de gota

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

El aislamiento y la derivación de células embrionarias de ratón Germinal

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

La diferenciación de células madre embrionarias en los precursores de oligodendrocitos

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Efficient Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells into Motor Neurons

La diferenciación eficiente de las células madre embrionarias de ratón en neuronas motoras

Direct differentiation of embryonic stem (ES) cells into functional  motor neurons represents a promising resource to study disease mechanisms, to  screen ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generación de ratones derivados de células madre pluripotentes inducidas

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells <em>In vitro</em>

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

La diferenciación de ratón recién nacido piel derivados de las células madre en células germinales-como<em&gt; In vitro</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Profiling Individual Human Embryonic Stem Cells by Quantitative RT-PCR

Perfiles de Células Madre Embrionarias Humanas individual por RT-PCR cuantitativa

Heterogeneity of stem cell population hampers detailed understanding of stem cell biology, such as their differentiation propensity toward different ...