Name: a rapid technique for the visualization of live immobilized yeast cells
Uploaded: 2006-11-09T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Technique for the Visualization of Live Immobilized Yeast Cells at JoVE.com

Vorremmo ringraziare Pete Houston e Eugenia Xu per tutto il loro aiuto.

<ol><li> Cellule immobilizzate per l&#39;epifluorescenza corso del tempo. Si prega di notare che questo protocollo è utile solo se le lenti dell&#39;obiettivo del microscopio sono al di sotto del portaoggetti. </li><li> Cellule posto a concentrazione desiderata in mezzo liquido su un vetrino lungo (circa 24x50mm) </li><li> Tagliare un blocco di agar della dimensione desiderata da un piatto di sintesi dei media (questi sono inferiori autofluorescenza) e posto sulle celle. Posizionare il lato del blocco di agar non gestit...

<ol>
	<li>Xu, E. Y., Zawadzki, K. A., Broach, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+observations+reveal+intermediate+transcriptional+silencing+states.">Single-cell observations reveal intermediate transcriptional silencing states.</a> Mol. Cell. 23, 219-229 (2006).</li></ol>

Si tratta di una tecnica rapida che immobilizza le cellule di lievito, pur consentendo la crescita. Abbiamo seguito la crescita del lievito per un massimo di dieci ore, con il lievito selvatico visualizzazione tassi di divisione tipo tutto l&#39;esperimento. Si noti che questa configurazione richiede la lente dell&#39;obiettivo da sotto il palco microscopio.

a rapid technique for the visualization of live immobilized yeast cells

Vi presentiamo qui una tecnica semplice, rapido ed estremamente flessibile per l&#39;immobilizzazione e la visualizzazione di cellule di lievito in crescita mediante microscopia in epifluorescenza. La tecnica è ideale per la visualizzazione delle popolazioni di lieviti statica, o corsi di tempo esperimenti fino a dieci ore di lunghezza. Il mio microscopia indaga l&#39;eredità epigenetica al loci di accoppiamento in silenzio di S. cerevisiae. Ci sono due loci di accoppiamento silenzioso, HML e HMR, che normalmente non sono espressi come sono confezionati in eterocromatina. Nel silenzio sir1 sfondo mutante è indebolito in modo tale che ciascun locus può essere nello stato espresso o tacere epigenetico, così nella popolazione nel suo complesso vi è un mix di cellule di diversi stati epigenetici sia per HML e HMR. Il mio microscopio ha dimostrato che non esiste una relazione tra lo stato epigenetico di HML e HMR in una singola cella. sir1 cellule stocasticamente interruttore stati epigenetici, che stabilisce il silenziamento di un locus precedentemente espresso o esprimono un locus precedentemente messo a tacere. Il mio corso di microscopia volta rintracciato sir1 singole cellule e la loro progenie di segnare la frequenza di ognuna delle quattro interruttori possibile epigenetica, e quindi la stabilità di ciascuno degli stati epigenetici in sir1 cellule. Vedi anche Xu et al. Mol. Cell 2006.

Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Technique for the Visualization of Live Immobilized Yeast Cells at JoVE.com

A Rapid Technique for the Visualization of Live Immobilized Yeast Cells

Una tecnica rapida per la visualizzazione di crescere cellule di lievito immobilizzate, qui applicata ai giornalisti fluorescenti al silenzioso accoppiamento loci HML e HMR

Una tecnica rapida per la visualizzazione di Live cellule di lievito immobilizzato

We present here a simple, rapid, and extremely flexible technique for the immobilization and visualization of growing yeast cells by epifluorescence ...

Research

JoVE Journal

Biology

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Quantitativa vivo cellulare-microscopio a fluorescenza Analisi di lievito Fission

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

Ricerca

Biologia

Visualization of Endoplasmic Reticulum Localized mRNAs in Mammalian Cells

Visualizzazione di mRNA reticolo endoplasmatico localizzate in cellule di mammifero

In eukaryotes, most of the messenger RNAs (mRNAs) that encode secreted and membrane proteins are localized to the surface of the endoplasmic reticulum ...

The Tomato/GFP-FLP/FRT Method for Live Imaging of Mosaic Adult Drosophila Photoreceptor Cells

The Tomato/GFP-FLP/FRT Method for Live Imaging of Mosaic Adult Drosophila Photoreceptor Cells

Il pomodoro / GFP-FLP / FRT Metodo per Live Imaging del Mosaico adulti<em&gt; Drosophila</em&gt; cellule fotorecettrici

The Drosophila eye is widely used as a model  for studies of development and neuronal degeneration. With the powerful mitotic  recombination technique, ...

Detection of Live Escherichia coli O157:H7 Cells by PMA-qPCR

Detection of Live Escherichia coli O157:H7 Cells by PMA-qPCR

Rilevamento dal vivo<em&gt; Escherichia coli</em&gt; O157: H7 Celle di PMA-qPCR

A unique open reading frame (ORF) Z3276 was identified as a specific genetic marker for E. coli O157:H7. A qPCR assay was developed for detection of E. ...

Visualization of G3BP Stress Granules Dynamics in Live Primary Cells

Visualizzazione dei G3BP stress Granuli Dynamics in cellule primarie in diretta

SGs can be visualized in cells by immunostaining of specific protein components or polyA+ mRNAs. SGs are highly dynamic and the study of their assembly ...

Investigating Protein-protein Interactions in Live Cells Using Bioluminescence Resonance Energy Transfer

Indagare interazioni proteina-proteina in cellule vive utilizzando il trasferimento bioluminescenza Resonance Energy

Assays based on Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) provide a sensitive and reliable means to monitor protein-protein interactions in live ...

Protein Purification Technique that Allows Detection of Sumoylation and Ubiquitination of Budding Yeast Kinetochore Proteins Ndc10 and Ndc80

Purificazione delle proteine ​​tecnica che permette la rilevazione di sumoilazione e Ubiquitinazione di lievito in erba cinetocore proteine ​​Ndc10 e Ndc80

Post-translational Modifications (PTMs), such as phosphorylation, methylation, acetylation, ubiquitination, and sumoylation, regulate the cellular ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Nefrotossina microiniezione in Zebrafish per creare un modello danno renale acuto

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...

Using Microfluidic Devices to Measure Lifespan and Cellular Phenotypes in Single Budding Yeast Cells

Uso di dispositivi microfluidici misurare la durata della vita e cellulare fenotipi in singole cellule di lievito in erba

Budding yeast Saccharomyces cerevisiae is an important model organism in aging research. Genetic studies have revealed many genes with conserved effects ...

In Situ Monitoring of Transiently Formed Molecular Chaperone Assemblies in Bacteria, Yeast, and Human Cells

Monitoraggio in Situ di gruppi di chaperone molecolari formati in farmaci, lieviti e cellule umane

J-domain proteins (JDPs) form the largest and the most diverse co-chaperone family in eukaryotic cells. Recent findings show that specific members of the ...