Name: human es cells: starting culture from frozen cells
Uploaded: 2006-11-09T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Human ES cells: Starting Culture from Frozen Cells at JoVE.com

凍結ストックからの雪解け： <ol><li> 色相の細胞を解凍する前に、既に準備したMEFのプレートが良好な状態で適切にメッキしていることを確認してください。望ましい板、または3日前より古い場合よりも少ないを使用しないでください。それはすべてのコニカルチューブや井戸が使用されて事前にラベルを付けることをお勧めします。 <...

<ol>
	<li>Cowan, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+Embryonic+Stem+Cells+from+Human+Blastocysts.">Derivation of Embryonic Stem Cells from Human Blastocysts.</a> , 1650-1656 (2004).</li></ol>

このビデオでは、我々の研究室では日常的に凍結ストックから色相ヒト胚性幹細胞培養を確立する方法を示します。このプロセスは、DMSO溶液中で凍結した場合は任意の哺乳動物細胞で一般的な使用に適している。効率的な融解は凍結ストックから色相細胞の新たな文化を確立するために不可欠であり、実験的な一貫性を保つために重要です。

色合いメディア651.5ミリリットルKO - DMEM 500ミリリットルPenStrep 6.5ミリリットルグルタミン6.5ミリリットルNEAA 6.5ミリリットルのβ-メルカプトエタノール0.5ul KO血清の交換65ミリリットルPlasmanate 65ミリリットルbFGF2（10 ng / mLの最終的な）0.65ミリリットル

human es cells: starting culture from frozen cells

ここでは私たちの研究室は、凍結ストックからの色相ヒト胚性幹細胞株の培養を開始する方法を示します。最初に、約（2〜）百照射したマウス胚性線維芽細胞のフィーダー細胞の1〜2日齢10センチメートル板が残存血清や細胞破片を除去するために色相のメディアでリンスし、色相のメディアが追加され、細胞内で平衡に委ねられている培養インキュベーター。冷凍長期液体窒素貯蔵から細胞のバイアルまたは- 80C冷凍庫がソースと素早く解凍迅速にするための37C水浴に浸漬される。凍結培地中の細胞は、バイアルから削除され、色相のメディアの大ボリュームに配置されます。色相の大ボリュームは、メディアは色相ヒト胚性幹細胞が分化する原因となる過剰な血清及びDMSOの除去を容易にします。細胞を穏やかにしてシードMEFのプレートをするために使用される新鮮な色合いのメディアの小さなボリュームに再懸濁した懸濁液から分離独立、とされています。それを穏やかに均等にプレートを通してそれらを分散させる滴下方法で色相のセルを追加することにより、MEFプレートシードに重要であると考えています。メディアを交換する前に新しく設立された色合いの培養プレートを48時間インキュベーターに戻され、その後、その後24時間ごとに供給されます。

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Human ES cells: Starting Culture from Frozen Cells

ここでは私たちの研究室は、凍結ストックからの色相ヒト胚性幹細胞株の培養を開始する方法を示します。

冷凍細胞から出発培養：ヒトES細胞

Here we demonstrate how our lab begins a HuES human embryonic stem cell line culture from a frozen stock.  First, a one to two day old ten cm plate of  ...

Research

JoVE Journal

Biology

Freezing Human ES Cells

凍結ヒトES細胞

Here we demonstrate how our lab freezes HuES human embryonic stem cell lines.  A healthy, exponentially expanding culture is washed with PBS to remove ...

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

ヒト胚性幹（ES）細胞の増殖

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

ヒト胚性幹細胞からクロマチン免疫沈降

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

ヒト胚性幹細胞の文化とメンテナンス

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

ヒト皮膚から大人上皮幹細胞の単離と培養

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

初代ヒト卵管上皮細胞のex vivoでの文化

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

間葉転換を誘導し、上皮の分析

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

成体マウス切歯から歯科上皮幹細胞の単離および培養

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...

Efficient Generation Human Induced Pluripotent Stem Cells from Human Somatic Cells with Sendai-virus

仙台ウイルスのヒト体細胞からの効率的な次世代ヒューマン誘導多能性幹細胞

A few years ago, the establishment of human induced pluripotent stem cells (iPSCs) ushered in a new era in biomedicine. Potential uses of human iPSCs ...

Generation and Culture of Blood Outgrowth Endothelial Cells from Human Peripheral Blood

ヒト末梢血からの血液伸長内皮細胞の生成と文化

Historically, the limited availability of primary endothelial cells from patients with vascular disorders has hindered the study of the molecular ...