Name: primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats
Uploaded: 2008-09-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats at JoVE.com

<p> JLN a été soutenue par MH 68347. </p>

<p class="jove_step"> Avant l&#39;isolement hippocampique </p><p class="jove_content"> Avant le début de l&#39;isolement de l&#39;hippocampe, assurez-vous que tous les outils sont stériles. Vaporiser le bas de la hotte de la culture à l&#39;éthanol 70%, et place les outils à l&#39;intérieur du capot. Vous aurez besoin de 6 - et 10-cm boîtes de Pétri, stérile poly-L lamelles de verre enduit, pipettes et des conseils, des pipettes jetables, et une pipette électrique. A partir de ce moment, pensez à utiliser une technique stérile corre...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Culturing Nerve Cells, 2nd Edition</em>. , (1998).</li></ol>

<p> Ce protocole a été développé comme une modification de l&#39;œuvre séminale de Gary Banquier et Kim Goslin <sup>1.</sup> Ce livre est une ressource essentielle pour quiconque s&#39;intéresse à la culture de cellules - non seulement les cultures de neurones enrichi décrites dans le protocole actuel. </p><p> Les trois facteurs les plus critiques dans la culture cellulaire sont: la stérilité, la vitesse, le choix du support utilisé. </p><p> <strong>Stérilité</strong> - un écoulement laminaire / hotte stérile, des conditions d&#...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Antibiotic antimitotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15240062</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B-27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504044</td>
<td>Serum free</td>
</tr>
<tr>
<td>Boric Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>B6768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dnase I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fura-2, AM cell permeant</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F1221</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7528</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14185052</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15630080</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>51200038</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12348017</td>
<td>Without phenol red</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-L-Lysine Hydrobromide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pyruvic Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Tetraborate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin, 2.5% (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090046</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats

<p class="jove_content">Les propriétés physiologiques des neurones de l&#39;hippocampe sont couramment étudiés, notamment en raison de l&#39;implication de l&#39;hippocampe dans l&#39;apprentissage et la mémoire. Primaire culture cellulaire hippocampique permet neuroscientifiques d&#39;examiner l&#39;activité et les propriétés des neurones à la cellule individuelle et le niveau de la synapse unique. Dans cette vidéo, nous allons démontrer comment isoler et de cultiver des cellules primaires d&#39;hippocampe de rats nouveau-nés. L&#39;hippocampe peut être isolée de chaque animal nouveau-né dans le plus court de 2 à 3 minutes, et les cultures peuvent être maintenus pendant jusqu&#39;à deux semaines. Nous allons aussi brièvement démontrer comment l&#39;utilisation de ces neurones de l&#39;hippocampe pour l&#39;imagerie calcique ratiométrique. Alors que ce protocole décrit le processus de l&#39;hippocampe, avec peu ou aucune modification, il peut être appliqué à d&#39;autres régions du cerveau.</p>

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Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats

<p class="jove_content">La dissection et la croissance de cellules provenant d&#39;une zone du cerveau individuel facilite enquête sur les paramètres cellulaires et physiologiques. Nous décrivons un procédé de culture de cellules primaires qui produit des cultures enrichies en neurones dans un environnement dépourvu de sérum.</p>

Culture primaire de neurones de l&#39;hippocampe de rats nouveau-nés P0

The physiological properties of hippocampal neurons are commonly investigated, especially because of the involvement of the hippocampus in learning and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

Gene-gun transfection de neurones de l&#39;hippocampe

Recherche

Biologie

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

Imagerie en temps réel du noyau dense de vésicules cultures primaires neurones de l&#39;hippocampe

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Culture primaire des adultes myocytes cœur de rat

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissection de l&#39;hippocampe gyrus denté de souris adulte

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

L&#39;isolement et la culture primaire de cellules de foie de rat

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolement et culture de cellules primaires de souris acineuses du pancréas

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

L&#39;isolement et la culture primaire de cellules endothéliales aortiques de souris

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolation et culture des kératinocytes de la souris primaire de la peau de souris néonatale et adulte

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolement et culture des cellules endothéliales aortiques primaires des porcs miniatures

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

Isolement et différenciation des préadipocytes primaires blancs et bruns de souris nouveau-nées

The understanding of the mechanisms underlying adipocyte differentiation and function has greatly benefited from the use of immortalized white ...