Name: primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats
Uploaded: 2008-09-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats at JoVE.com

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<p class="jove_step"> Vor Hippocampus Isolation </p><p class="jove_content"> Vor Beginn der Hippocampus Isolation, um sicherzustellen, dass alle Werkzeuge, die steril sind. Spray auf der Kultur Haube mit 70% Ethanol, und legen Sie die Werkzeuge in der Motorhaube. Sie benötigen 6 - und 10-cm-Petrischalen, steril Poly-L beschichteten Deckgläsern, Pipetten und Spitzen, Einweg-Pipetten und einem elektrischen Pipette. Von diesem Punkt an, denken Sie daran, richtige sterile Technik zu verwenden. </p><ol><li> Schalten Sie das Wasserbad und stellen S...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Culturing Nerve Cells, 2nd Edition</em>. , (1998).</li></ol>

<p> Dieses Protokoll wurde als eine Änderung der grundlegenden Arbeit von Gary Banker und Kim Goslin <sup>1</sup> entwickelt. Dieses Buch ist eine wesentliche Ressource für alle, die Kultivierung von Zellen interessiert - nicht nur das Neuron-angereicherten Kulturen in der aktuellen Protokoll beschrieben. </p><p> Die drei wichtigsten Faktoren in der Zellkultur sind: Sterilität, Geschwindigkeit, die Wahl des Mediums verwendet. </p><p> <strong>Sterilität</strong> - eine Laminar-Flow / sterile Haube, aseptischen Bedingungen und einer sterilen ...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Antibiotic antimitotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15240062</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B-27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504044</td>
<td>Serum free</td>
</tr>
<tr>
<td>Boric Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>B6768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dnase I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fura-2, AM cell permeant</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F1221</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7528</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14185052</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15630080</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>51200038</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12348017</td>
<td>Without phenol red</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-L-Lysine Hydrobromide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pyruvic Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Tetraborate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin, 2.5% (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090046</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats

<p class="jove_content">Die physiologischen Eigenschaften von Neuronen im Hippocampus werden häufig untersucht, vor allem wegen der Beteiligung des Hippocampus beim Lernen und Erinnern. Primäre hippocampale Zellkultur ermöglicht Neurowissenschaftler die Aktivität und Eigenschaften von Neuronen in den einzelnen Zellen und einzelne Synapse-Ebene zu untersuchen. In diesem Video zeigen wir, wie zu isolieren und zu wachsen primäre Zellen des Hippocampus von neugeborenen Ratten. Der Hippocampus kann von jedem neugeborenen Tieren in so kurz wie 2-3 Minuten isoliert werden, und die Kulturen kann beibehalten werden bis zu zwei Wochen. Wir werden auch kurz zeigen, wie diese Neuronen im Hippocampus für ratiometrische Calcium-Imaging verwenden. Während dieses Protokoll beschreibt den Prozess für den Hippocampus, mit wenig bis gar keine Änderung, kann es auf andere Regionen des Gehirns eingesetzt werden.</p>

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Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats

<p class="jove_content">Die Dissektion und das Wachstum der Zellen von einem einzelnen Bereich des Gehirns erleichtert Untersuchung zellulärer und physiologischer Parameter. Wir beschreiben ein Verfahren zur Primär-Zellkultur, die Neuron-angereicherten Kulturen produziert in einem Serum-freien Umgebung.</p>

Primäre Kultur des Hippocampus-Neuronen von neugeborenen Ratten P0

The physiological properties of hippocampal neurons are commonly investigated, especially because of the involvement of the hippocampus in learning and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

Gene-gun Transfektion von Neuronen im Hippocampus

Forschung

Biologie

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

Live-Imaging von Dense-Core-Vesikel in Primary hippokampalen Neuronen

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Primäre Kultur der erwachsenen Ratte Herz Myozyten

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissection der hippocampalen von erwachsenen Maus

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolierung und Primärkultur von Ratten Leberzellen

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolierung und Kultivierung von primären Maus Azinuszellen des Pankreas

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolation und Primärkultur von Maus Aortic Endothelial Cells

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolierung und Kultur der primären Maus Keratinozyten aus neonatalen und erwachsenen Maus Haut

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolation und Kultur der primären Aorten-Endothelzellen von Miniaturschweinen

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

Isolierung und Differenzierung primärer weißer und brauner Präadipozyten von neugeborenen Mäusen

The understanding of the mechanisms underlying adipocyte differentiation and function has greatly benefited from the use of immortalized white ...