Name: primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats
Uploaded: 2008-09-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats at JoVE.com

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<p class="jove_step"> Prima dell&#39;isolamento dell&#39;ippocampo </p><p class="jove_content"> Prima di iniziare l&#39;isolamento dell&#39;ippocampo, assicurarsi che tutti gli strumenti sono sterili. Spray giù il cappuccio della cultura con il 70% di etanolo, e atto gli strumenti all&#39;interno della cappa. Avrete bisogno di 6 - e 10 cm di piastre di Petri, sterile poli-L coprioggetto vetro rivestito, pipette e le punte, pipette monouso, e un pipettatore elettrica. Da questo punto in poi, ricordatevi di usare correttamente la tecnica sterile...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Culturing Nerve Cells, 2nd Edition</em>. , (1998).</li></ol>

<p> Questo protocollo è stato sviluppato come una modifica del lavoro seminale di Gary Banker e Kim Goslin <sup>1.</sup> Questo libro è una risorsa essenziale per chiunque sia interessato a cellule di coltura - non solo il neurone arricchito di culture descritte nel protocollo corrente. </p><p> I tre fattori più critici nella coltura delle cellule sono: la sterilità, la velocità, la scelta del mezzo utilizzato. </p><p> <strong>Sterilità</strong> - un flusso laminare / cappa sterile, condizioni asettiche, e una sterile incubatore sono obbl...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Antibiotic antimitotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15240062</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B-27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504044</td>
<td>Serum free</td>
</tr>
<tr>
<td>Boric Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>B6768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dnase I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fura-2, AM cell permeant</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F1221</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7528</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14185052</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15630080</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>51200038</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12348017</td>
<td>Without phenol red</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-L-Lysine Hydrobromide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pyruvic Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Tetraborate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin, 2.5% (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090046</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats

<p class="jove_content">Le proprietà fisiologiche dei neuroni dell&#39;ippocampo sono comunemente indagati, soprattutto per il coinvolgimento dell&#39;ippocampo nell&#39;apprendimento e nella memoria. Primaria coltura delle cellule dell&#39;ippocampo neuroscienziati permette di esaminare le attività e le proprietà dei neuroni in singole cellule e del livello singola sinapsi. In questo video ci dimostra come isolare e coltivare cellule primarie di ippocampo di ratti neonati. L&#39;ippocampo possono essere isolati gli uni dagli animali appena nati nel più breve 2-3 minuti, e le culture può essere mantenuta per un massimo di due settimane. Ci sarà anche brevemente illustrare come utilizzare questi neuroni dell&#39;ippocampo per l&#39;imaging di calcio raziometrico. Anche se questo protocollo descrive il processo per l&#39;ippocampo, con poca o nessuna modifica, può essere applicato ad altre regioni del cervello.</p>

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Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats

<p class="jove_content">La dissezione e la crescita delle cellule da una zona del cervello individuale facilita l&#39;investigazione dei parametri cellulari e fisiologici. Descriviamo un metodo per la coltura di cellule primarie che produce neurone arricchito di culture in un ambiente privo di siero.</p>

Cultura primaria di neuroni dell&#39;ippocampo da P0 ratti neonati

The physiological properties of hippocampal neurons are commonly investigated, especially because of the involvement of the hippocampus in learning and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

Gene-gun trasfezione di neuroni dell&#39;ippocampo

Ricerca

Biologia

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

Immagini dal vivo di Dense-core Vescicole nella Primaria neuroni coltivati ​​ippocampale

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultura primario di miociti adulti Cuore Rat

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissezione di giro dentato ippocampale di topo adulto

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolamento e la coltura primaria di cellule epatiche di ratto

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolamento e Cultura del mouse principale acinose pancreatiche Cellule

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolamento e colture primarie di cellule di topo aortica endoteliali

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolamento e cultura dei cheratinociti primari del mouse dalla pelle dei neonati e adulti

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolamento e cultura delle cellule endoteliali aortiche primarie dai suini in miniatura

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

Isolamento e differenziazione dei preadipociti bianchi e marroni primari dai topi appena nati

The understanding of the mechanisms underlying adipocyte differentiation and function has greatly benefited from the use of immortalized white ...