Name: primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats
Uploaded: 2008-09-29T00:00:00
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<p class="jove_step"> Antes de isolamento do hipocampo </p><p class="jove_content"> Antes de iniciar o isolamento do hipocampo, certifique-se que todas as ferramentas são estéreis. Spray para baixo do capô cultura com etanol 70%, e colocar as ferramentas dentro do capô. Você vai precisar 6 - e os pratos de Petri de 10 cm, estéril poli-L lamínulas de vidro revestido, pipetadores e dicas, pipetas descartáveis, e um pipetador elétrica. Deste ponto em diante, lembre-se de usar a técnica estéril correta. </p><ol><li> Ligue o banho de águ...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Culturing Nerve Cells, 2nd Edition</em>. , (1998).</li></ol>

<p> Este protocolo foi desenvolvido como uma modificação do trabalho seminal de Gary Banker e Goslin Kim <sup>1.</sup> Este livro é um recurso essencial para qualquer pessoa interessada em células de cultura - não apenas as culturas de neurônios enriquecido descritos no protocolo atual. </p><p> Os três fatores mais críticos em cultura de células são: velocidade de esterilidade, a escolha do meio utilizado. </p><p> <strong>Esterilidade</strong> - fluxo laminar um / capa estéril, condições assépticas, e uma incubadora de estéreis s...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Antibiotic antimitotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15240062</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B-27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504044</td>
<td>Serum free</td>
</tr>
<tr>
<td>Boric Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>B6768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dnase I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fura-2, AM cell permeant</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F1221</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7528</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14185052</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15630080</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>51200038</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12348017</td>
<td>Without phenol red</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-L-Lysine Hydrobromide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pyruvic Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Tetraborate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin, 2.5% (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090046</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats

<p class="jove_content">As propriedades fisiológicas de neurônios do hipocampo são comumente investigado, especialmente por causa do envolvimento do hipocampo na aprendizagem e memória. Cultura de células primárias do hipocampo permite que os neurocientistas para examinar a atividade e as propriedades dos neurônios na célula individual e nível de sinapse único. Neste vídeo, vamos demonstrar como isolar e cultivar células primárias de hipocampo de ratos recém-nascidos. O hipocampo pode ser isolado de cada animal recém-nascido em tão curto quanto 2 a 3 minutos, e as culturas podem ser mantidas por até duas semanas. Também vamos brevemente demonstrar como usar esses neurônios do hipocampo para a imagem latente de cálcio raciométrica. Embora este protocolo descreve o processo para o hipocampo, com pouca ou nenhuma modificação, ele pode ser aplicado a outras regiões do cérebro.</p>

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Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats

<p class="jove_content">A dissecção e crescimento de células de uma área do cérebro individuais facilita investigação de parâmetros celulares e fisiológicos. Nós descrevemos um método para cultivo de células primárias, que produz neurônios enriquecido culturas em um ambiente sem soro.</p>

Cultura primária de neurônios do hipocampo de ratos recém-nascidos P0

The physiological properties of hippocampal neurons are commonly investigated, especially because of the involvement of the hippocampus in learning and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

Gene-gun Transfection de neurônios do hipocampo

Biologia

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

Imagens ao vivo de vesículas com núcleo denso na Primária Cultivadas neurônios do hipocampo

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultura primária de Miócitos Coração Adulto Rat

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissecção do giro denteado do hipocampo de rato adulto

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolamento e cultura primária de células hepáticas de ratos

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolamento e Cultura do mouse primárias células pancreáticas acinares

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolamento e cultura primária de células de camundongo aórtica endoteliais

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolamento e Cultura de Queratinócitos de Rato Primário de Pele de Rato Neonatal e Adulto

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolamento e cultura de células endoteliais aórticas primárias de suínos em miniatura

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

Isolamento e diferenciação de preadipócitos brancos e marrons primários de camundongos recém-nascidos

The understanding of the mechanisms underlying adipocyte differentiation and function has greatly benefited from the use of immortalized white ...