Name: primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats
Uploaded: 2008-09-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats at JoVE.com

<p class="jove_step"> Före hippocampus isolering </p><p class="jove_content"> Innan du börjar hippocampus isolering, se till att alla verktyg är sterila. Spraya ner kultur huva med 70% etanol, och placera verktyg inne i huvan. Du behöver 6 - och 10-cm petriskålar, sterila poly-L belagt glas täckglas, pipetter och tips, engångspipetter, och en elektrisk pipett. Från och med nu, kom ihåg att använda rätt steril teknik. </p><ol><li> Sätt på vattenbad och se till att det värms upp till 37 ° C. </li><li> Följande lösningar som lagra...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Culturing Nerve Cells, 2nd Edition</em>. , (1998).</li></ol>

<p> Detta protokoll utvecklades som en modifikation av det nyskapande arbete Gary Banker och Kim Goslin <sup>1.</sup> Denna bok är en viktig resurs för alla som är intresserade odla celler - inte bara neuron-berikade kulturer som beskrivs i det nuvarande protokollet. </p><p> De tre mest kritiska faktorerna i cellodling är: sterilitet, hastighet, valet av medium som används. </p><p> <strong>Sterilitet</strong> - ett laminärt flöde / steril huva, aseptiska förhållanden, och en steril inkubator krävs. Föroreningar vid varje steg är ska...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Antibiotic antimitotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15240062</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B-27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504044</td>
<td>Serum free</td>
</tr>
<tr>
<td>Boric Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>B6768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dnase I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fura-2, AM cell permeant</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F1221</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7528</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14185052</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15630080</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>51200038</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>12348017</td>
<td>Without phenol red</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-L-Lysine Hydrobromide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pyruvic Acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Tetraborate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin, 2.5% (10X)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090046</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

primary culture of hippocampal neurons from p0 newborn rats

<p class="jove_content">De fysiologiska egenskaperna hos hippocampus nervceller är ofta utreds, särskilt på grund av inblandning av hippocampus i inlärning och minne. Primär hippocampus cellodling kan neuroforskare att granska verksamheten och egenskaper av nervceller i den enskilda cellen och enda synaps nivå. I den här videon kommer vi att visa hur man isolera och odla primära hippocampus celler från nyfödda råttor. Hippocampus kan vara isolerade från varandra nyfödda djurets så kort som 2 till 3 minuter och de kulturer kan bibehållas i upp till två veckor. Vi kommer också att kortfattat visa hur du använder dessa hippocampus neuroner för ratiometrisk kalcium avbildning. Även om detta protokoll beskriver processen för hippocampus, med liten eller ingen förändring, kan den tillämpas på andra regioner i hjärnan.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats at JoVE.com

Primary Culture of Hippocampal Neurons from P0 Newborn Rats

<p class="jove_content">Den dissekering och tillväxt av celler från en enskild hjärna område underlättar utredning av cellulära och fysiologiska parametrar. Vi beskriver en metod för primär cellodling som producerar neuron berikade kulturer i ett serum-fri miljö.</p>

Primär Kultur av hippocampus nervceller från P0 nyfödda råttor

The physiological properties of hippocampal neurons are commonly investigated, especially because of the involvement of the hippocampus in learning and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

Gene-gun transfektion av hippocampus nervceller

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

Bildproduktion av tät-core Blåsor i Primär Odlade hippocampus nervceller

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Primär kultur Vuxen myocyter Rat hjärta

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissekering av hippocampus dentate gyrus från vuxen mus

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolering och Primär kultur av celler Rat Hepatiska

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolering och odling av mus Primära bukspottkörtel Acinar

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolering och Primär kultur av mus aortaendotelceller

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolering och kultur av primära muskeratinocyter från neonatal och vuxen mushud

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolering och kultur av primära aortic endotelceller från miniatyr svin

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

Isolering och differentiering av primära vita och bruna preadipocyter från nyfödda möss

The understanding of the mechanisms underlying adipocyte differentiation and function has greatly benefited from the use of immortalized white ...