Name: a behavioral assay to measure responsiveness of zebrafish to changes in light intensities
Uploaded: 2008-10-03T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities at JoVE.com

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Hibeler EY0081 ve 5T32UY07145 Enstitüsü tarafından ve Tapınak Şövalyeleri Göz Vakfı tarafından desteklenmiştir. Jason Rihel Yaşam Bilimleri Araştırma Vakfı Bristol-Squibb üyesidir.

Bu protokol, kendi laboratuvarı hafif artışlarla ve azaltır Zebra balığı larvalarının Görsel-Motor Yanıt gerçekleştirmek için gereken adımları özetliyor. Zebra balığı davranışsal çalışmalar için harika bir model sistem. Bakımı kolay, onlar büyük bir kavrama boyutları var ve bunlar hızla gelişir. Örneğin, gözleri Zebra balığı larvalarının gelişim 3 gün ve bir irkilme tepkisi gösterir ve bu süre ışığa duyarlı. ...

<ol>
	<li>Allwardt, A. B., Lall, B. A., Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synapse+formation+is+arrested+in+retinal+photoreceptors+of+the+zebrafish+nrc+mutant.">Synapse formation is arrested in retinal photoreceptors of the zebrafish nrc mutant.</a> J Neurosci. 21, 2330-2330 (2001).</li><li>Emran, F., Rihel, J., Adolph, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OFF+ganglion+cells+cannot+drive+the+optokinetic+reflex+in+zebrafish.">OFF ganglion cells cannot drive the optokinetic reflex in zebrafish.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104, 19126-19126 (2007).</li><li>Prober, D. A., Rihel, J., Onah, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypocretin/orexin+overexpression+induces+an+insomnia-like+phenotype+in+zebrafish.">Hypocretin/orexin overexpression induces an insomnia-like phenotype in zebrafish.</a> J Neurosci. 26, 13400-13400 (2006).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The zebrafish book: a guide for the laboratory use of zebrafish. , (2000).</li></ol>

Film gösteren deneysel prosedürleri WT balık bütün temsilcisi. Ancak, bu deneyler de mutant balık (temsili bir sonuç bölümüne bakınız) analog olarak yapılabilir. Biz optimal kontrol amaçlı bir denetimi kurulu anahat aynı plaka plaka WT balık ve mutant balık öneririz. WT balık aynı plaka üzerinde mutant balık, balık türü, her bir kuyunun kaplama ne yazmak emin olun. Burada her iyi kaplama balık (veri levha ile not defteri göster) takip etmek için nasıl bir öneri. Ayrıca, bu günün aynı zamand...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Microplate devices</td>
<td>Tool</td>
<td>Whatman</td>
<td>7701-1651</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Transfer pipetes</td>
<td>Tool</td>
<td>VWR</td>
<td>202205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fish water</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>refer to reference #4</td>
</tr>
<tr>
<td>Recording chambers (Zebrabox)</td>
<td>Tool</td>
<td>Viewpoint Lifesciences</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Videotrack Software</td>
<td>Tool</td>
<td>Viewpoint Lifesciences</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

a behavioral assay to measure responsiveness of zebrafish to changes in light intensities 

Optokinetik refleks (okr) temel bir görme refleksi en omurgalılar tarafından sergilenen ve görsel sahne göreceli göz istikrara önemli bir rol oynar. Ancak okr, bir hayvan hareketli çizgiler tespit gerektirir ve bir okr sergi için başarısız balık tamamen kör olmayabilir mümkündür. Bir zebrafish mutant, hiçbir optokinetik yanıt c (NRC), herhangi bir ışık koşulları altında test edilmiş ve tamamen kör olduğu bildirildi hiçbir okr vardır. Daha önce, bu mutant OFF-ganglion hücre aktivitesi kaydedilebilir olduğunu göstermiştir. NRC mutant olarak hiçbir okr mutant balık, basit ışık artışlarla ve görsel motor davranış assay (VMR) geliştirdi azaltır tespit olup olmadığını belirlemek için. Bu testte, tek Zebra balığı larvaları otomatik bir video izleme sistemi kullanılarak larvaların eş zamanlı izleme sağlayan bir 96 plaka her kuyuda yerleştirilir. 30 dakika ve 30 dakika hafif OFF ışığı her larva lokomotor yanıtları kaydedildi ve ölçüldü. WT balık, irkilme tepkisi olarak bilinen, alt daha bazal aktivite dönüşü takip ON ışıklar, motor aktivite kısa bir başak üzerine bir dondurma olarak adlandırılan. WT balık (birkaç dakika içinde) başlangıç ​​lokomotor aktivite dönmek de keskin ışıklar kapalı aşağıdaki hemen lokomotor aktivite artışı ve ancak yavaş yavaş. NRC mutantlar WT balık gibi KAPALI ışığa benzer bir tepki, ama WT balık ile karşılaştırıldığında ortalama aktivite hafif bir azalma gösterebilir. NRC mutantlar ON ışığa tepki olarak motor aktivitede gecikmiş ve halsiz. NRC mutant yanıt yanıt ON WT ışık lambası yavaş bir yükselme zamanı vardır. NRC balık tamamen kör olduğunu işaret etmektedir. Teleosts olmayan retina dokuları ışık tespit Çünkü, biz ışık yoğunluğu değişiklikleri hemen davranışsal tepkilerin tamamen gelişiminin erken evrelerinde gözleri eksikliği chokh (chk) mutantlar kullanarak sağlam göz gerektirir doğruladı. Bizim VMR tayininde, chk mutantlar lateral gözler, bu davranışı aracılık gösteren ya ON ışık ya da KAPALI hiçbir irkilme tepkisi gösterir. VMR testi burada ışık şiddetlerinde değişikliklere yanıt Zebra balığı larvalarının yeteneğini test değildir köklü okr tahlil tamamlar nitelendirdi. Ayrıca, VMR testinin otomasyon ışık şiddeti tahrik görsel tepkiler kusurları için yüksek verimlilik tarama kendisini katıyor.

Watch this Scientific Journal Video about A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities at JoVE.com

A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities

Görsel-Motor Yanıt hafif artışlarla ve azaltır yanıt larva zebrafish motor çıkışını ölçmek için geliştirdi. Biz de dahil olmak üzere başka bir görme testi optokinetik refleks tarafından test edildiğinde tamamen kör olduğu düşünülüyordu optokinetik yanıt (NRC) mutantlar, hiçbir zebrafish vizyon mutant inceledi.

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

The optokinetic reflex (OKR) is a basic visual reflex exhibited by most vertebrates and plays an important role in stabilizing the eye relative to the ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities 

Intravenous Microinjections of Zebrafish Larvae to Study Acute Kidney Injury

Akut Böbrek Sakatlık Eğitim Zebra balığı Larva İntravenöz Microinjections

In this video article we describe a zebrafish model of AKI using gentamicin as the nephrotoxicant.  The technique consists of intravenous microinjections ...

Laser Ablation of the Zebrafish Pronephros to Study Renal Epithelial Regeneration

Zebra balığı Pronephros Lazer Ablasyon Böbrek Epitel Rejenerasyon Eğitim

Acute kidney injury (AKI) is characterized by high mortality rates from deterioration of renal function over a period of hours or days that culminates in ...

Combined Immunofluorescence and DNA FISH on 3D-preserved Interphase Nuclei to Study Changes in 3D Nuclear Organization

3D Nükleer teşkilatında değişiklikler Eğitim için 3D-korunmuş Tane Çekirdekle ilgili Kombine İmmünofloresan ve DNA FISH

Fluorescent in situ hybridization using DNA probes  on 3-dimensionally preserved nuclei followed by 3D confocal microscopy (3D DNA  FISH) represents the ...

Analysis of Apoptosis in Zebrafish Embryos by Whole-mount Immunofluorescence to Detect Activated Caspase 3

Aktif Kaspaz 3 Algılama Tüm montaj immünofloresans tarafından Zebra balığı Embriyolar Apaptozun Analizi

Whole-mount immunofluorescence to detect activated Caspase 3 (Casp3 assay) is useful to identify cells undergoing either intrinsic or extrinsic apoptosis ...

In vitro Methylation Assay to Study Protein Arginine Methylation

In vitro Methylation Assay to Study Protein Arginine Methylation

In vitro Metilasyona Tahlil Protein Arginin metilasyon Okuyacak

Protein arginine methylation is one of the most abundant post-translational modifications in the nucleus. Protein arginine methylation can be identified ...

Quantitative Immunofluorescence Assay to Measure the Variation in Protein Levels at Centrosomes

Kantitatif İmmünofloresan Deneyi sentrozomlar Protein Düzeyleri Varyasyon Tedbir

Centrosomes are small but important organelles that serve as the poles of mitotic spindle to maintain genomic integrity or assemble primary cilia to ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Dalga boyundaki ve Oksidatif Stres Kırmızı / yakın-kızılötesi ışık Terapisi şiddetler bir Range Etkilerinin Değerlendirilmesi için Yöntemi<em&gt; İn Vitro</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Use of the Ramsay Assay to Measure Fluid Secretion and Ion Flux Rates in the Drosophila melanogaster Malpighian Tubule

Use of the Ramsay Assay to Measure Fluid Secretion and Ion Flux Rates in the Drosophila melanogaster Malpighian Tubule

Ramsay Testi Kullanımı sıvı salgılanması ve İyon Flux fiyatlar Tedbir<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Malpighi Tübül

Modulation of renal epithelial ion transport allows organisms to maintain ionic and osmotic homeostasis in the face of varying external conditions. The ...

In Vitro Assay to Measure Phosphatidylethanolamine Methyltransferase Activity

In Vitro Assay to Measure Phosphatidylethanolamine Methyltransferase Activity

Vitro Tahlil Fosfatidiletanolamin Metiltransferaz Aktivite Tedbir

Phosphatidylethanolamine methyltransferases are biosynthetic enzymes that catalyze the transfer of one or more methyl group(s) from ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Zebra balığı Nephrotoxin Mikroenjeksiyon Akut Böbrek Yaralanması Model

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...