Name: making patch-pipettes and sharp electrodes with a programmable puller
Uploaded: 2008-10-08T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller at JoVE.com

<p> Wij bedanken de volgende financierende instanties en stichtingen voor ondersteuning: National Institutes of Health, National Science Foundation, American Heart Association, spierdystrofie Vereniging, de Donald B. en Delia E. Baxter Foundation, het Fonds en de Klingenstein McKnight Endowment for Neuroscience. </p>

<p class="jove_step"> Pulling pipetten </p><p class="jove_content"> Met behulp van een micro-elektrode trekker, zoals de Sutter P-97 Flaming / Brown, trek een set van ongeveer 10-20 pipetten. </p><ol><li> Selecteer uw capillaire glas. We maken gebruik van borosilicaat capillairen (Sutter BF150-110-10, 1,5 mm buitendiameter, binnendiameter 1.1mm, 10cm lang). Zorgvuldig op te slaan, zodat het glas blijft schoon en stofvrij. </li><li> Ontwerp een programma te trekken. We maken gebruik van een 5 stappen programma, met dalende hitte en snelheid bij ...

<p> Het protocol geïllustreerde is hier in het dagelijks gebruik in de elektrofysiologie laboratoria en wordt ook gebruikt om injectienaalden te maken voor cellen en dieren. Met een programmeerbare trekker, is het gemakkelijk om pipetten te maken voor een scala van toepassingen. Met aandacht en zorg, zal de gloeidraad op uw trekker voor een jaar of meer. Veel succes met je experimenten. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Micropipette Puller</td>
<td>Instrument</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>P-97</td>
<td>Or similar instrument (e.g. Sutter P-87 or P-2000)</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass Capillaries</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>BF150-86-10</td>
<td>Or, similar capillary glass.  To make filling the pipette easier, use a capillary with a glass filament.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

making patch-pipettes and sharp electrodes with a programmable puller

<p class="jove_content"> Glazen micro-elektroden (ook wel pipetten) zijn een werkpaard van elektrofysiologie voor decennia. Vandaag de dag worden dergelijke pipetten gemaakt van glas haarvaten met behulp van een programmeerbare trekker. Dergelijke instrumenten warmte van de capillaire met behulp van een metalen filament of een laser en trekken uit het glas met behulp van de zwaartekracht, een motor of beide. Pipetten voor patch-clamp opnamen worden gevormd met alleen warmte en zwaartekracht, terwijl de scherpe elektroden voor intracellulaire opname gebruik maken van een combinatie van warmte, de zwaartekracht, en een motor. De procedure gebruikt om de intracellulaire opname pipetten te maken is vergelijkbaar met die gebruikt voor de injectie naalden voor een verscheidenheid aan toepassingen, waaronder cRNA injectie in Xenopus oöcyten te maken. In het algemeen, capillaire glas &lt;1,2 mm in diameter wordt gebruikt om de pipetten voor patch clamp opname te maken, terwijl de smallere glas wordt gebruikt voor intracellulaire opname (buitendiameter = 1,0 mm). Voor elk gereedschap, is de trekker net iets anders geprogrammeerd. Deze video laat zien hoe je beide soorten van opname pipetten met behulp van vooraf vastgestelde puller programma&#39;s. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller at JoVE.com

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

<p class="jove_content">Deze video laat zien hoe u een programmeerbare trekker te gebruiken om patch pipetten en scherpe elektroden te maken voor elektrofysiologie. Dezelfde procedure kan gebruikt worden om een ​​verscheidenheid van glazen instrumenten, waaronder injectienaalden te maken.</p>

Het maken van Patch-pipetten en Sharp elektroden met een programmeerbare Puller

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Research

JoVE Journal

Biology

Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments

Toepassing van de Light-cured Dental lijm hars voor permanente montage elektroden of Microdialyseprobes bij chronische experimenten

In chronic recording experiments, self-curing dental acrylic resins have been used as a mounting base of electrodes or microdialysis-probes. Since these ...

Patterning Cells on Optically Transparent Indium Tin Oxide Electrodes

Patroonvorming Cellen op optisch transparant Indium Tin Oxide Elektroden

The ability to exercise precise spatial and temporal control over cell-surface interactions is an important prerequisite to the assembly of multi-cellular ...

Fabrication of Amperometric Electrodes

Fabricage van Amperometrisch Elektroden

Carbon fiber electrodes are crucial for the detection of catecholamine release from vesicles in single cells for amperometry measurements.  Here, we ...

Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens

Brain Banking: Het maken van de meeste van uw onderzoek Specimens

Unbiased stereology is a method for accurately and efficiently estimating the total neuron number (or other cell type) in a given area of interest1.  To ...

Making MR Imaging Child's Play - Pediatric Neuroimaging Protocol, Guidelines and Procedure

Het maken van MR Imaging Child&#39;s Play - Pediatric Neuroimaging protocol, richtlijnen en procedure

Within the last decade there has been an increase in the use of structural and functional magnetic resonance imaging (fMRI) to investigate the neural ...

Making Gynogenetic Diploid Zebrafish by Early Pressure

Het maken van Gynogenetic Diploïde zebravis in het begin van Pressure

Heterozygosity in diploid eukaryotes often makes genetic studies cumbersome. Methods that produce viable homozygous diploid offspring directly from ...

Visualizing Single-molecule DNA Replication with Fluorescence Microscopy

Visualiseren van Single-molecule DNA-replicatie met fluorescentiemicroscopie

We describe a simple fluorescence microscopy-based real-time method for observing DNA replication at the single-molecule level. A circular, forked DNA ...

Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

Lineage Labeling van de zebravis Cellen met Laser Uncagable Fluoresceïne Dextran

A central problem in developmental biology is to deduce the origin of the myriad cell types present in vertebrates as they arise from undifferentiated ...

Measurement of Cellular Chemotaxis with ECIS/Taxis

Meting van Cellulaire Chemotaxis met ECIS / Taxis

Cellular movement in response to external stimuli is fundamental to many cellular processes including wound healing, inflammation and the response to ...

Production of <em>Xenopus tropicalis</em> Egg Extracts to Identify Microtubule-associated RNAs

Production of Xenopus tropicalis Egg Extracts to Identify Microtubule-associated RNAs

Productie van<em&gt; Xenopus tropicalis</em&gt; Egg Extracten aan microtubuli-geassocieerde RNA&#39;s identificeren

Many  organisms localize mRNAs to specific subcellular destinations to spatially and  temporally control gene expression. Recent studies have demonstrated ...