Name: preparation and maintenance of dorsal root ganglia neurons in compartmented cultures
Uploaded: 2008-10-17T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation and Maintenance of Dorsal Root Ganglia Neurons in Compartmented Cultures at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить Катарина Cosker и Стефани Courchesne за полезные обсуждения.

Подготовка реагентов <ol><li> Коллаген покрытие: коллаген пальто p35 культуре ткани пластин и поместить в духовку при температуре 37 ° С в течение 2 дней до смазки перегородок. Конечная концентрация коллагена должны быть в 0,71 мг / мл разведенного в 0,001 N HCl. Затем добавьте 1 мл смеси на чашк?...

<ol>
	<li>Campenot, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+Control+of+the+Local+Environment+of+Somas+and+Neurites.">Independent Control of the Local Environment of Somas and Neurites.</a> Methods in Enzymology. 58, 302-307 (1979).</li><li>Watson, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophins+use+the+Erk5+pathway+to+mediate+a+retrograde+survival+response.">Neurotrophins use the Erk5 pathway to mediate a retrograde survival response.</a> Nature Neuroscience. 4, 981-988 (2001).</li><li>Heerssen, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynein+motors+transport+activated+Trks+to+promote+survival+of+target-dependent+neurons.">Dynein motors transport activated Trks to promote survival of target-dependent neurons.</a> Nature Neuroscience. 7, 596-603 (2004).</li><li>Taylor, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microfluidic+culture+platform+for+CNS+axonal+injury,+regeneration+and+transport.">A microfluidic culture platform for CNS axonal injury, regeneration and transport.</a> Nature Methods. 2, 599-605 (2006).</li><li>Park, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+culture+platform+for+neuroscience+research.">Microfluidic culture platform for neuroscience research.</a> Nat Protoc. 4, 2128-2136 (2006).</li><li>Ure, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+transport+and+steady-state+distribution+of+125I-nerve+growth+factor+in+rat+sympathetic+neurons+in+compartmented+cultures.">Retrograde transport and steady-state distribution of 125I-nerve growth factor in rat sympathetic neurons in compartmented cultures.</a> J Neuroscience. 4, 1282-1290 (1997).</li></ol>

В этом видео, мы показали, как готовить и поддерживать отсеки камеры для использования в нейронах DRG культивирования. Было сделано правильно, эта система позволяет разделение тела клетки от аксона с целью изучения механизмов, посредством которых нейротрофинов сигнала на большие аксонов. Так как ж...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>collagen</td>
<td>Reagent</td>
<td>BD Biosciences</td>
<td>354249</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N2-methylcellulose 400CPS</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sel-Win Chemicals</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Teflon divider</td>
<td>Other</td>
<td>Tyler Research</td>
<td>CAMP10</td>
<td>many other types of dividers are available</td>
</tr>
<tr>
<td>Pin rake</td>
<td>Tool</td>
<td>Tyler Research</td>
<td>Camp-PR</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Grease loader</td>
<td>Tool</td>
<td>Tyler Research</td>
<td>Camp-GLSS</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>MT10017CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NGF</td>
<td>Reagent</td>
<td>Peprotech</td>
<td>450-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BDNF</td>
<td>Reagent</td>
<td>Peprotech</td>
<td>450-02</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>High vacuum grease</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>14-635-5D</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>AraC</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>C-1768</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>23 gauge luer stub adapter</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher</td>
<td>427565</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>90&deg; angle hemostats</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-7035</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

preparation and maintenance of dorsal root ganglia neurons in compartmented cultures

Нейроны расширить аксонального процессы, которые далеки от тела клетки к иннервируют тканях-мишенях, где целевая полученных факторов роста, необходимых для выживания нейронов и функции. Нейротрофинов специально обязаны поддерживать выживание и дифференциации иннервирующих сенсорных нейронов, но вопрос о том, как эти целевые полученных нейротрофинов сообщает тела клетки нейронов, иннервирующих была областью активных исследований на протяжении более 30 лет. Наиболее общепринятой моделью того, как нейротрофина сигналы достигают тела клетки предлагает сигнализации эндосомы нести этот сигнал ретроградно вдоль аксона. С целью изучения ретроградного транспорта, культуры система первоначально была разработана Робертом Campenot, в которых клетка тела изолированы от своих аксонов. Техника подготовки этих отсеки камеры для культивирования сенсорных нейронов повторяет селективной стимуляции нейронов терминалов, что происходит в естественных условиях после выпуска целевых полученных нейротрофинов. Ретроградная сигнализация событий, требующих дальнего микротрубочек зависящих транспортных ретроградной иметь важные последствия для лечения нейродегенеративных расстройств.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation and Maintenance of Dorsal Root Ganglia Neurons in Compartmented Cultures at JoVE.com

Preparation and Maintenance of Dorsal Root Ganglia Neurons in Compartmented Cultures

Здесь мы опишем технику подготовки и поддержания отсеки камеры для культивирования сенсорных нейронов спинного ганглиев корня.

Подготовка и обслуживание Спинной корневой Ganglia Нейроны в отсеки культур

Neurons extend axonal processes that are far removed from the cell body to innervate target tissues, where target-derived growth factors are required for ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Подготовка нейронных культур от Midgastrula этапе эмбрионы дрозофилы

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures

Подготовка диссоциированных Мышь корковых культур Нейрон

This video will guide you through the process for generating cortical neuronal cultures from late embryo and early postnatal mouse brain. These cultures ...

Preparation of Gene Gun Bullets and Biolistic Transfection of Neurons in Slice Culture

Подготовка генной пушки Маркеры и Biolistic Трансфекция Нейроны фрагмент культуры

Biolistic transfection is a physical means of transfecting cells by bombarding tissue with high velocity DNA coated particles. We provide a detailed ...

Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures

Получение 2-dGuo обработанных Thymus культур Органный

In the thymus, interactions between developing T-cell precursors and stromal cells that include cortical and medullary epithelial cells are known to play ...

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia (SCG)

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG

Протокол для культивирования симпатических нейронов крысы из верхних шейных ганглиев (SCG)

The superior cervical ganglia (SCG) in rats are small, glossy, almond-shaped structures that contain sympathetic neurons.  These neurons provide ...

Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies

Подготовка мозга крысы Совокупный культур для Нейрон и исследований Глия развития

An in vitro system that recapitulates the development and differentiation of progenitors into mature neurons and glia in the central nervous system (CNS) ...

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

Подготовка Aplysia Сенсомоторной нейронов клеточных культур

The nervous system of the marine mollusk Aplysia californica is relatively simple, consisting of approximately 20,000 neurons.  The neurons are large (up ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

Альтернативные Культуры для человека плюрипотентных стволовых клеток производство, техобслуживание, и генетический анализ

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

Lateral Root Inducible System in Arabidopsis and Maize

Lateral Root Inducible System in Arabidopsis and Maize

Боковые Корень Индуцибельная системы в<em&gt; Arabidopsis</em&gt; И кукурузы

Lateral root development contributes significantly to the root system, and hence is crucial for plant growth. The study of lateral root initiation is ...

Divergence of Root Microbiota in Different Habitats based on Weighted Correlation Networks

Дивергенция корневой микробиоты в различных средах обитания на основе взвешенных корреляционных сетей

The root microbiome plays an important role in plant growth and environmental adaptation. Network analysis is an important tool for studying communities, ...