Name: blood collection from the american horseshoe crab, limulus polyphemus
Uploaded: 2008-10-13T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection from the American Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus at JoVE.com

Оригинальные исследования, описанные выше была поддержана NSF гранта 0344630.

Анатомические особенности подковы краба, имеющие отношение к кровотечение (рис. 1) <img src="files/ftp_upload/old/958_2008_10_3_0/958_Figure-01.png" alt="Рисунок 1" width="389" height="259" /> Рисунок 1 <ol><li> Три основных отдела тела, спереди назад, являются головогруди (P), opisthosoma (O), и тельсона ...

<ol>
	<li>Lochhead, J. H., Brown, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selected+Invertebrate+Types.">Selected Invertebrate Types.</a> , 360-381 (1950).</li><li>Shuster, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circulatory+system+and+blood+of+the+horseshoe+crab+Limulus+polyphemus+L.:+a+review.">The circulatory system and blood of the horseshoe crab Limulus polyphemus L.: a review.</a> US Dept Energy, Fed Regul. Comm. , (1978).</li><li>Conrad, M. L., Pardy, R. L., Wainwright, N., Child, A., Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+blood+clotting+system+of+the+American+horseshoe+crab,+Limulus+polyphemus,+to+a+novel+form+of+lipopolysaccharide+from+a+green+alga.">Response of the blood clotting system of the American horseshoe crab, Limulus polyphemus, to a novel form of lipopolysaccharide from a green alga.</a> Comp Biochem. Physiol A Mol. Integr. Physiol. , 144-423 (2006).</li><li>Nakamura, T., Morita, T., Iwanaga, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+proclotting+enzyme+in+limulus+(Tachypleus+tridentatus)+hemocytes:+its+purification+and+properties.">Intracellular proclotting enzyme in limulus (Tachypleus tridentatus) hemocytes: its purification and properties.</a> J. Biochem. (Tokyo. 97, 1561-1574 (1985).</li><li>Levin, J., Ornberg, R. L., Cohen, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+Cells+of+Marine+Invertebrates:+Experimental+Systems+in+Cell+Biology+and+Comparative+Physiology.">Blood Cells of Marine Invertebrates: Experimental Systems in Cell Biology and Comparative Physiology.</a> , 259-260 (1985).</li><li>Liang, S. M., Liu, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+Limulus+coagulation+system:+inhibition+of+activation+of+the+proclotting+enzyme,+by+dimethyl+sulfoxide.">Studies on the Limulus coagulation system: inhibition of activation of the proclotting enzyme, by dimethyl sulfoxide.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 105, 553-559 (1982).</li><li>Soderhall, K., Smith, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+the+haemocyte+populations+of+Carcinus+maenas+and+other+marine+decapods,+and+prophenoloxidase+distribution.">Separation of the haemocyte populations of Carcinus maenas and other marine decapods, and prophenoloxidase distribution.</a> Dev. Comp Immunol. 7, 229-239 (1983).</li><li>Solon, E., Gupta, A. P., Gaugler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signal+transduction+during+exocytosis+in+Limulus+polyphemus+granulocytes.">Signal transduction during exocytosis in Limulus polyphemus granulocytes.</a> Dev. Comp. Immunol. 20, 307-321 (1996).</li><li>Armstrong, P. B., Rickles, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endotoxin-induced+degranulation+of+the+Limulus+amebocyte.">Endotoxin-induced degranulation of the Limulus amebocyte.</a> Exp. Cell Res. 140, 15-24 (1982).</li><li>Iwanaga, S., Kawabata, S., Shuster, C. N., Barlow, R. B., Berkman, L., Brockmann, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+phylogeny+of+defense+molecules+associated+with+innate+immunity+in+horseshoe+crab.">Evolution and phylogeny of defense molecules associated with innate immunity in horseshoe crab.</a> Front Biosci. 3, (1998).</li><li>Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+American+Horseshoe+Crab.">The American Horseshoe Crab.</a> , 288-309 (2003).</li><li>Iwanaga, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+limulus+clotting+reaction.">The limulus clotting reaction.</a> Curr. Opin. Immunol. 5, 74-82 (1993).</li><li>Levin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Limulus+amebocyte+lysate+test:+perspectives+and+problems.">The Limulus amebocyte lysate test: perspectives and problems.</a> Prog. Clin. Biol. Res. 231, 1-23 (1987).</li><li>Koshiba, T., Hashii, T., Kawabata, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+structural+perspective+on+the+interaction+between+lipopolysaccharide+and+factor+C,+a+receptor+involved+in+recognition+of+Gram-negative+bacteria.">A structural perspective on the interaction between lipopolysaccharide and factor C, a receptor involved in recognition of Gram-negative bacteria.</a> J. Biol. Chem. 282, 3962-3967 (2007).</li><li>James, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+the+protease+inhibitor+phenylmethylsulfonyl+fluoride+in+buffers.">Inactivation of the protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride in buffers.</a> Anal. Biochem. 86, 574-579 (1978).</li><li>Murer, E. H., Levin, J., Holme, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+studies+of+the+granules+of+the+amebocytes+of+Limulus+polyphemus,+the+horseshoe+crab.">Isolation and studies of the granules of the amebocytes of Limulus polyphemus, the horseshoe crab.</a> J. Cell Physiol. 86, 533-542 (1975).</li><li>Decker, H., Ryan, M., Jaenicke, E., Terwilliger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDS+induced+phenoloxidase+activity+of+hemocyanins+from+Limulus+polyphemus,+Eurypelma+californicum+and+cancer.">SDS induced phenoloxidase activity of hemocyanins from Limulus polyphemus, Eurypelma californicum and cancer.</a> , 276-17796 (2001).</li><li>Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cytolytic+function+for+a+sialic+acid-binding+lectin+that+is+a+member+of+the+pentraxin+family+of+proteins.">A cytolytic function for a sialic acid-binding lectin that is a member of the pentraxin family of proteins.</a> J. Biol. Chem. 271, 14717-14721 (1996).</li><li>Armstrong, P. B., Melchior, R., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+immunity+in+long-lived+arthropods.">Humoral immunity in long-lived arthropods.</a> J. Insect Physiol. 42, 53-64 (1996).</li><li>Armstrong, P. B., Armstrong, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+decorated+clot:+Binding+of+agents+of+the+innate+immune+system+to+the+fibrils+of+the+limulus+blood+clot.">The decorated clot: Binding of agents of the innate immune system to the fibrils of the limulus blood clot.</a> Biol. Bull. 205, 201-203 (2003).</li><li>Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+the+motile+blood+cells+of+the+horseshoe+crab,+Limulus.+Studies+on+contact+paralysis+of+pseudopodial+activity+and+cellular+overlapping+in+vitro.">Interaction of the motile blood cells of the horseshoe crab, Limulus. Studies on contact paralysis of pseudopodial activity and cellular overlapping in vitro.</a> Exp. Cell Res. 107, 127-138 (1977).</li><li>Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motility+of+the+Limulus+blood+cell.">Motility of the Limulus blood cell.</a> J. Cell Sci. 37, 169-180 (1979).</li><li>Armstrong, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesion+and+spreading+of+Limulus+blood+cells+on+artificial+surfaces.">Adhesion and spreading of Limulus blood cells on artificial surfaces.</a> J. Cell Sci. 44, 243-262 (1980).</li><li>Armstrong, P. B., Cohen, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+Cells+of+Marine+Invertebrates.">Blood Cells of Marine Invertebrates.</a> Lab. Animal. , 253-258 (1985).</li><li>Smith, S. A., Berkson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+culture+and+maintenance+of+the+horseshoe+crab+(Limulus+polyphemus).">Laboratory culture and maintenance of the horseshoe crab (Limulus polyphemus).</a> Lab. Animal. 34, 27-34 (1980).</li><li>Leibovitz, L., Lewbart, G. A., Shuster, C. N., Barlow, R. B., Brockmann, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+American+Horseshoe+Crab.">The American Horseshoe Crab.</a> , 245-275 (2003).</li><li>Rudkin, D. M., Young, G. A., Nowlan, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oldest+horseshoe+crab:+a+new+xiphosurid+from+Late+Ordovician+Konservat-Lagerstatten+deposits.">The oldest horseshoe crab: a new xiphosurid from Late Ordovician Konservat-Lagerstatten deposits.</a> Palaeontology. 51, 1-9 (2008).</li><li>Shuster, C. N., Sekiguchi, K., Shuster, C. N., Barlow, R. B., Brockmann, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The American Horseshoe Crab. , 103-132 (2003).</li><li>Walls, E. A., Berkam, J., Smith, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+horseshoe+crab,+Limulus+polyphemus,+200+million+years+of+existence,+100+years+of+study.">The horseshoe crab, Limulus polyphemus, 200 million years of existence, 100 years of study.</a> Rev. Fisheries Sci. 10, 39-73 .</li><li>Patten, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Evolution+of+the+Vertebrates+and+Their+Kin.">The Evolution of the Vertebrates and Their Kin.</a> P. Blakiston's Son and Co. , 195-209 (1912).</li></ol>

Есть четыре вида подковы краба, Limulus Полифема с восточного побережья Северной Америки и три вида, которые варьируются от Японии до Бенгальского залива. Животных определяется как &quot;живое ископаемое&quot;, потому что анатомически подобные формы были найдены в ископаемом состоянии от 445 миллионо...

blood collection from the american horseshoe crab, limulus polyphemus

Подковы краба имеет лучшие характеризуется иммунная система любого долгоживущих беспозвоночных. Изучение иммунитета у мечехвостов способствовало легкости в сборе больших объемов крови и от простоты крови. Мечехвостов показать только один тип ячейки в общую циркуляцию, гранулированных амебоцит. Плазме содержания соли в морской воде, и только три обильных белков, гемоцианин, дыхательной белок, С-реактивного белка, которые функционируют в цитолитического уничтожение чужеродных клеток, в том числе бактериальной клетки и α2-макроглобулина, который ингибирует протеазы вторжение болезнетворных микроорганизмов. Кровь собирается прямой пункции сердца в условиях, которые сводят к минимуму загрязнение липополисахарида (ака, эндотоксин, ЛПС), продукт грам-отрицательных бактерий. Большое животное может принести 200 - 400 мл крови. Для изучения плазмы, клеток крови, немедленно удаляются из плазмы путем центрифугирования и плазмы может быть фракционированного на составляющие ее белки. Клетки крови удобно изучать микроскопически, собирая небольшие объемы крови в LPS-свободный изотонический солевой раствор (0,5 М NaCl) в условиях, допускающих прямое микроскопическое исследование, поставив один из более ЛПС без coverglasses на поверхности блюда культуры, то установка этих coverglasses в простых камер наблюдения следующие ячейки привязанности. Второй подготовки к непосредственному наблюдению является сбор 3 - 5 мл крови в LPS-свободный эмбрион блюдо, а затем культивирующий в искусственной среде фрагменты агрегированных amebocytes к камере, что бутерброды ткани между предметным и покровного стекла. В этой подготовке, подвижных amebocytes мигрировать на поверхность покровного стекла, где они могут легко быть соблюдены. Систему свертывания крови включает в себя совокупность amebocytes и формирование внеклеточного сгусток белка, coagulin, который выделяется из секреторных гранул из клеток крови. Биохимический анализ отмытых клеток крови, что требует агрегации и дегрануляции не происходит, что может быть осуществлено путем сбора крови в 0,1 объемах 2% Твин-20, 0,5 М ЛПС без NaCl, с последующим центрифугированием клеток и мытье 0,5 М NaCl.

Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection from the American Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus at JoVE.com

Blood Collection from the American Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus

Американская подковы краба, Limulus Полифема, вероятно, является наиболее удобным источником для большого количества крови любого беспозвоночных. Кровь простой по составу, только с одним камерного типа в общую циркуляцию, гранулированных амебоцит, и только три обильных белков в плазме, гемоцианин, С-реактивного белка, и α2-макроглобулина. Кровь собирается из сердца и клеток крови и плазмы центрифугированием.

Забор крови из американского Подкова Краб, Limulus Полифема

The horseshoe crab has the best-characterized immune system of any long-lived invertebrate.  The study of immunity in horseshoe crabs has been facilitated ...

Research

JoVE Journal

Biology

Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies

Обогащение NK клетки из человеческой крови Kit RosetteSep от StemCell Технологии

Natural killer (NK) cells are large granular cytotoxic lymphocytes that belong to the innate immune system and play major roles in fighting against cancer ...

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

Техника для последовательного Коллекция спинномозговой жидкости из Cisterna Magna в мышь

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Using the Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus, in Vision Research

Using the Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus, in Vision Research

Использование Подкова Краб, Limulus Полифема, В Vision Research

The American horseshoe crab, Limulus Polyphemus is one of the oldest creatures on earth, and the animal continues to play an indispensable role in ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Выделение и культуре эндотелиальных клеток легочной от новорожденных мышей

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Забор крови для биохимического анализа у взрослых данио рерио

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

A Practical and Novel Method to Extract Genomic DNA from Blood Collection Kits for Plasma Protein Preservation

Практические и новый метод для извлечения геномной ДНК из крови Комплекты Коллекция по сохранению белков плазмы

Laboratory tests can be done on the cellular or  fluid portions of the blood. The use of different blood collection tubes  determines the portion of the ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

Сбор, выделение и обогащение природного происхождения магнитотактических бактерий из окружающей среды

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Efficient iPS Cell Generation from Blood Using Episomes and HDAC Inhibitors

Эффективное плюрипотентных клеток поколения от крови Использование эписом и HDAC ингибиторов

This manuscript illustrates a protocol for efficiently creating integration-free human induced pluripotent stem cells (iPSCs) from peripheral blood using ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Забор крови из боковой хвостовой вены крыс

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Повторное забор крови для анализов крови у взрослых данио рерио

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...