Name: a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse
Uploaded: 2008-11-10T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse at JoVE.com

Vårt arbete stöds av NIH bidrag NS048447 och AG017216to KD. Li Liu vill tacka Dr Heikki Tanila (universitetet i Kuopio, Kuopio, Finland) för hans handledning och stöd under utvecklingen av det ursprungliga protokollet.

Dra glaset kapillärröret <ol><li> Glaset kapillärröret köps från Sutter Instrument Inc (borosilikatglas, B100-75-10). </li><li> Dra kapillärrör på en Sutter P-87 Flaming mikropipett avdragare med värmeindex satt till 300 och trycket index satt till 330. </li><li> Klipp spetsen på glaset kapillärröret med sax, så att den avsmalnande spets har en inre diameter på ca 0,5 mm. </li></ol> Cisterna Magna punktera teknik för CSF CSF-prover tas från Cisterna magna (figur 1) med en met...

<ol>
	<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+observation+on+CSF+Abeta42+levels+in+young+to+middle-aged+amyloid+precursor+protein/presenilin-1+doubly+transgenic+mice.">Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice.</a> Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).</li><li>Holcomb, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+Alzheimer-type+phenotype+in+transgenic+mice+carrying+both+mutant+amyloid+precursor+protein+and+presenilin+1+transgenes.">Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes.</a> Nat Med. 4, 97 (1998).</li><li>Lewis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibrillary+tangles,+amyotrophy+and+progressive+motor+disturbance+in+mice+expressing+mutant+(P301L)+tau+protein.">Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein.</a> Nat Genet. 25, 402 (2000).</li><li>DeMattos, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque-associated+disruption+of+CSF+and+plasma+amyloid-beta+(Abeta)+equilibrium+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Neurochem. 81, 229 (2002).</li><li>Planel, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+leads+to+tau+hyperphosphorylation+through+inhibition+of+phosphatase+activity+by+hypothermia.">Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia.</a> J Neurosci. 27, 3090 (2007).</li><li>Refolo, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cholesterol-lowering+drug+reduces+beta-amyloid+pathology+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).</li></ol>

Vi beskrev en mycket tillförlitlig protokoll för seriell provtagning av cerebrospinalvätskan från möss utan detekterbar plasma kontaminering. 1. Hela proceduren brukar ta 10 min per mus (inklusive anestesi). Volymen av likvor erhålls är beroende av musstammar. I PS / APP dubbla Tg möss vi Begagnat2 är den genomsnittliga volymen ca 5 l (3-7 l), medan P301L (JNPL3) möss 3 ger en avkastning på cirka 10 l-15 l. För seriell provtagning kan maximalt 7-8 l säkert tas varje gång med ett intervall på 2-3 månader. 2. U...

a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse 

Alzheimers sjukdom (AD) är en progressiv neurodegenerativ sjukdom som patologiskt kännetecknas av extracellulära deposition av β-amyloid peptid (A-beta) och intraneuronala ansamling av hyperphosphorylated tau protein. Eftersom cerebrospinalvätska (CSF) är i direkt kontakt med det extracellulära rummet i hjärnan, det ger en återspegling av den biokemiska förändringar i hjärnan som svar på patologiska processer. CSF från AD patienter visar en minskning av 42 aminosyror i form av A-beta (Aβ42) och ökar totalt tau och hyperphosphorylated tau, även om mekanismer som ansvarar för dessa förändringar är ännu inte helt klarlagda. Transgena (Tg) musmodeller av AD ger ett utmärkt tillfälle att undersöka hur och varför A-beta-eller tau nivåer i CSF förändras allteftersom sjukdomen fortskrider. Här visar vi ett raffinerat Cisterna Magna punktera teknik för CSF provtagning från musen. Denna extremt skonsam provtagningsteknik kan seriella CSF prover som fås från samma mus med 2-3 månaders intervall som kraftigt minimerar påverkande effekt på mellan-mus variation i A-beta-eller tau nivåer, vilket gör det möjligt att upptäcka subtila förändringar över tid. I kombination med A-beta och tau ELISA, kommer denna teknik vara användbar för studier som syftar till att undersöka förhållandet mellan nivåerna av CSF Aβ42 och tau, och deras ämnesomsättning i hjärnan i modeller AD mus. Studier i Tg möss kan ge viktiga validering som till den potentiella av CSF A-beta-eller nivåer tau att användas som biologiska markörer för att övervaka sjukdomsförloppet, och för att kontrollera effekten av terapeutiska ingrepp. Som mössen kan offras och hjärnan kan undersökas biokemiska eller histologiska förändringar kan mekanismerna bakom CSF förändringar bättre bedömas. Dessa data kommer sannolikt att vara informativ för tolkning av mänskliga förändringar AD CSF.

Watch this Scientific Journal Video about A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse at JoVE.com

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse

Transgena (Tg) musmodeller av AD ger ett utmärkt tillfälle att undersöka hur och varför A-beta-eller tau nivåer i CSF förändras allteftersom sjukdomen fortskrider hos människor. Här visar vi ett raffinerat Cisterna Magna punktera teknik för seriell CSF provtagning från musen.

En teknik för seriell Samling av cerebrospinalvätska från Cisterna Magna i Mus

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

En 3D-system för odling mänskliga Artikulära chondrocyter i ledvätskan

Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampyriska Isolering av extracellulär vätska från<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

The genetically tractable model organism C. elegans has provided insights into a myriad of biological questions, enabled by its short generation time, ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generering av möss härledda från inducerade pluripotenta stamceller

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells SSCs in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Seriell Anrikning av spermatogoniala stam-och stamfaderceller (SSC) i Kultur för Härledning av långfristiga SSC vuxen mus Lines

Spermatogonial stem and progenitor cells (SSCs) of the testis represent a classic example of adult mammalian stem cells and preserve fertility for nearly ...

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

RNA Isolering från mus Pankreas: En Ribonuclease rika Tissue

Isolation of high-quality RNA from ribonuclease-rich tissue such as mouse pancreas presents a challenge.  As a primary function of the pancreas is to aid ...

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

Den Infiltration-centrifuge Teknik för Utvinning av apoplastisk Vätska från växtblad Använda<em&gt; Phaseolus vulgaris</em&gt; Som ett exempel

The apoplast is a distinct extracellular compartment in plant tissues that lies outside the plasma membrane and includes the cell wall. The apoplastic ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

Församlingen och tillämpning av &quot;Shear ringen&quot;: A Novel Endothelial modell för Orbital, enkelriktad och periodisk vätskeflöde och Shear stress

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

Musen Isolerad perfusion njure Technique

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Single Cell Collection of Trophoblast Cells in Peri-implantation Stage Human Embryos

Single Cell Insamling av Trophoblast celler i Peri-implantation Stage mänskliga embryon

Human implantation, the apposition and adhesion to the uterine surface epithelia and subsequent invasion of the blastocyst into the maternal decidua, is a ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Vävnadsuppsamling och RNA-extraktion från den mänskliga osteoarthritiska knäleden

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...