Name: protocol for culturing sympathetic neurons from rat superior cervical ganglia (scg)
Uploaded: 2009-01-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG at JoVE.com

NZ उसे सहानुभूति न्यूरॉन्स विदारक और कटाई में प्रशिक्षण के लिए प्रयोगशाला के सदस्यों सुभाष बिस्वास, एंड्रयू Sproul, और रयान Willet धन्यवाद देना चाहूंगा. NIH-NINDS से अनुदान द्वारा समर्थित है.

1. विच्छेदन के लिए तैयार: <ol><li> उपयुक्त संस्कृति पकवान (10 सेमी या छह अच्छी तरह से या 24 अच्छी तरह प्लेटें, आदि) अपने प्रयोगों की प्रकृति पर निर्भर करता है, और उन्हें चूहे की पूंछ कोलेजन विच्छेदन से पहले 24 घंटे क...

<ol>
	<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Culturing Nerve Cells. , (1998).</li><li>Biswas, S. C., Shi, Y., Sproul, A., Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-apoptotic+Bim+Induction+in+Response+to+Nerve+Growth+Factor+Deprivation+Requires+Simultaneous+Activation+of+Three+Different+Death+Signaling+Pathways.">Pro-apoptotic Bim Induction in Response to Nerve Growth Factor Deprivation Requires Simultaneous Activation of Three Different Death Signaling Pathways.</a> The Journal of Biological Chemistry. 282 (40), 29368-29374 (2007).</li><li>Bocchini, V., Angeletti, P. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Nerve+Growth+Factor:+purification+as+a+30,000-molecular-weight+protein.">The Nerve Growth Factor: purification as a 30,000-molecular-weight protein.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. (64), 787-794 (1969).</li><li>Dechant, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chat+in+the+Trophic+Web:+NGF+Activates+Ret+by+Inter-RTK+Signaling.">Chat in the Trophic Web: NGF Activates Ret by Inter-RTK Signaling.</a> Neuron. 33 (2), 156-158 (2002).</li><li>Deckwerth, T., Elliott, J. L., Knudson, C. M., Johnson, E. M., Snider, W. D., Korsmeyer, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bax+is+required+for+neuronal+death+after+trophic+factor+deprivation+and+during+development.">Bax is required for neuronal death after trophic factor deprivation and during development.</a> Neuron. (17), 401-411 (1996).</li><li>Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+Vitro+Studies+on+the+Nerve+Growth+Factor+(NGF)+Requirement+of+Neurons+-+I.+Sympathetic+Neurons.">Quantitative in Vitro Studies on the Nerve Growth Factor (NGF) Requirement of Neurons - I. Sympathetic Neurons.</a> Developmental Biology. (58), 96-105 (1977).</li><li>Park, D. S., Morris, E. J., Padmanabhan, J., Shelanski, M. L., Geller, H. M., Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclin-dependent+kinases+participate+in+death+of+neurons+evoked+by+DNA-damaging+agents.">Cyclin-dependent kinases participate in death of neurons evoked by DNA-damaging agents.</a> The Journal of Cell Biology. 143, 457-467 (1998).</li><li>Pierchala, B. A., Ahrens, R. C., Paden, A. J., Johnson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+Growth+Factor+Promotes+the+Survival+of+Sympathetic+Neurons+through+the+Cooperative+Function+of+the+Protein+Kinase+C+and+Phosphatidylinositol+3-Kinase+Pathways.">Nerve Growth Factor Promotes the Survival of Sympathetic Neurons through the Cooperative Function of the Protein Kinase C and Phosphatidylinositol 3-Kinase Pathways.</a> The Journal of Cell Biology. 279, 27986-27993 (2004).</li></ol>

हम हमारे संस्कृतियों के लिए Sprague Dawley चूहों का उपयोग करें. समय और ध्यान रखना जब ganglia सफाई. सभी मलबे, रक्त वाहिकाओं और वसा निकालें. यह कदम एक संस्कृति है कि अधिक या कम सजातीय और बाहरी सेल प्रकार के मुक्त है सुनिश्चित ...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Forceps, Stainless steel #5</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS4976</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors, DEAVER straight sharp-blunt- 43mm blades - 5.5</td>
<td>Tool</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS6760</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640 w/ L-Glutamin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Cellgro, Mediatech, Inc.</td>
<td>10-040-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum</td>
<td>Reagent</td>
<td>SAFC Biosciences</td>
<td>12103c</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Donor Horse Serum</td>
<td>Reagent</td>
<td>JRH Biosciences</td>
<td>12449</td>
<td>Heat-inactivate by incubating in 56&deg;C waterbath for 30 minutes.</td>
</tr>
<tr>
<td>Penicillin/streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco, Invitrogen</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin without EDTA</td>
<td>Reagent</td>
<td>Difco</td>
<td>MT 25-050-CI</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Uridine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>U3003</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>5-Fluoro-5' deoxyuridine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>F-8791</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NGF</td>
<td>Reagent</td>
<td>Harlan Bioproduct</td>
<td>BT-5025</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection Microscope and light source</td>
<td>Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>15 ml polypropylene tubes</td>
<td>Tool</td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352096</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell culture dishes</td>
<td>Tool</td>
<td>Corning, Nunclone</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

protocol for culturing sympathetic neurons from rat superior cervical ganglia (scg)

चूहों में बेहतर ग्रीवा ganglia (एससीजी) छोटे, चमकदार, बादाम के आकार का संरचनाओं कि सहानुभूति न्यूरॉन्स होते हैं. इन न्यूरॉन्स सिर और गर्दन के क्षेत्रों के लिए सहानुभूति innervations प्रदान करते हैं और वे एक अच्छी तरह से विशेषता और अपेक्षाकृत सजातीय जनसंख्या (4) का गठन. सहानुभूति न्यूरॉन्स के अस्तित्व भेदभाव, और axonal विकास और प्रसार व्यापक NGF की उपलब्धता को अपनी संस्कृति और प्रयोगात्मक हेरफेर (2, 3, 6) की सुविधा के लिए तंत्रिका वृद्धि कारक (NGF) पर निर्भर हैं. इन कारणों के लिए, सुसंस्कृत सहानुभूति न्यूरॉन्स अध्ययन की एक विस्तृत विविधता में neuronal विकास और भेदभाव, और क्रमादेशित रोग कोशिका मृत्यु के तंत्र, और संकेत पारगमन (1, 2, 5, और 6) सहित इस्तेमाल किया गया है. नवजात चूहों और संवर्धन सहानुभूति न्यूरॉन्स से बाहर विदारक एससीजी बहुत जटिल नहीं है और काफी जल्दी में महारत हासिल किया जा सकता है है. इस अनुच्छेद में, हम विस्तार से वर्णन कैसे बाहर काटना नवजात चूहे पिल्ले से एससीजी और उन्हें उपयोग करने के लिए सहानुभूति न्यूरॉन्स की संस्कृतियों की स्थापना करेंगे. लेख भी तैयारी कदम और विभिन्न अभिकर्मकों और उपकरण है कि इस लक्ष्य को हासिल करने के लिए की जरूरत है वर्णन करेंगे.

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Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG

यह प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे अलग करने के लिए और संस्कृति नवजात चूहे पिल्ले की बेहतर ग्रीवा ganglia (एससीजी) से प्राथमिक सहानुभूति न्यूरॉन्स है.

चूहा सुपीरियर सरवाइकल ganglia (एससीजी) से सहानुभूति न्यूरॉन्स संवर्धन के लिए प्रोटोकॉल

The superior cervical ganglia (SCG) in rats are small, glossy, almond-shaped structures that contain sympathetic neurons.  These neurons provide ...

Research

JoVE Journal

Biology

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia (SCG)

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

एक microfluidic डिवाइस में E18 Compartmentalization के लिए cortical चूहा न्यूरॉन्स की तैयारी

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

Preparation and Maintenance of Dorsal Root Ganglia Neurons in Compartmented Cultures

और compartmented संस्कृतियों में पृष्ठीय रूट ganglia न्यूरॉन्स की तैयारी रखरखाव

Neurons extend axonal processes that are far removed from the cell body to innervate target tissues, where target-derived growth factors are required for ...

An Introduction to Worm Lab: from Culturing Worms to Mutagenesis

इल्ली लैब के लिए एक परिचय: संवर्धन कीड़े से mutagenesis

This protocol describes procedures to maintain nematodes in the laboratory and how to mutagenize them using two alternative methods: ethyl methane ...

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

के लिए एक प्रणाली<em&gt; पूर्व vivo</emभ्रूण अग्न्याशय&gt; संवर्धन

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

वन्य कैटरपिलर से Hemocytes निकालने के लिए एक साधारण प्रोटोकॉल

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

Rapid and Efficient Generation of Neurons from Human Pluripotent Stem Cells in a Multititre Plate Format

मानव pluripotent स्टेम सेल से एक Multititre प्लेट प्रारूप में न्यूरॉन्स की तेजी से और कुशल जनरेशन

Existing protocols for the generation of neurons from human pluripotent stem cells (hPSCs) are often tedious in that they are  multistep procedures ...

Culturing Primary Rat Inner Medullary Collecting Duct Cells

वाहिनी कोशिकाओं का संग्रह संवर्धन प्राथमिक चूहा इनर दिमाग़ी

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP ...

A Method for Culturing Embryonic C. elegans Cells

A Method for Culturing Embryonic C. elegans Cells

संवर्धन भ्रूण के लिए एक विधि<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; कक्ष

C. elegans is a powerful model system, in which genetic and molecular techniques are easily applicable. Until recently though, techniques that require ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

चूहा के पार्श्व पूंछ नस से रक्त नमूने

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

CD146 के अलगाव<sup&gt; +</sup&gt; चूहा फेफड़ों से निवासी फेफड़े mesenchymal stromal कोशिकाओं

Mesenchymal stromal cells (MSCs) are increasingly recognized for their therapeutic potential in a wide range of diseases, including lung diseases. Besides ...