studying-synaptic-vesicle-pools-using-photoconversion-of-styryl-dyes

Studying Synaptic Vesicle Pools using Photoconversion of Styryl Dyes

The fusion of synaptic vesicles with the plasma membrane (exocytosis) is a required step in neurotransmitter release and neuronal communication. The ...

European Neuroscience Institute Göttingen

&#x5929;&#x7136;&#x548C;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9EC4;&#x916E;&#x7C7B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x7ECF;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD; &#xFF08;Cdk1 &#x548C;-2&#xFF09; &#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;Cdk5/p35 &#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FC1;&#x79FB;&#x73B0;&#x8C61;&#x548C;&#x5927;&#x8111;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5176;&#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x4E86;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x8001;&#x5E74;&#x75F4;&#x5446;&#x3002;&#x4E0B;&#x9762;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5929;&#x7136;&#x9EC4;&#x916E;&#x7C7B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x6291;&#x5236; Cdk5/p35 &#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728; micromolar &#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x800C;&#x6709;&#x4E9B;&#x5219;&#x662F;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;B unsubstituted &#x73AF;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6; methoxylated &#x9EC4;&#x916E;&#x662F;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x6216;&#x7ED9;&#x4E86;&#x65B0;&#x5267;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x548C; 6 methoxyapigenin &#x548C; 6 methoxyluteolin &#x662F;&#x6700;&#x6709;&#x529B; Cdk5 &#x590D;&#x6742;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#xFF0C;&#x800C;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x9EC4;&#x916E;&#x5C71;&#x5948;&#x915A;&#x548C;&#x69F2;&#x76AE;&#x7D20;&#x663E;&#x793A;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x5176;&#x6D3B;&#x5316;&#x5242; p25 Cdk5 &#x7684;&#x62A5;&#x9053;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7528;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x63A5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E24;&#x4E2A; 6-methoxyflavones&#x3001; &#x5C71;&#x5948;&#x915A;&#x548C;&#x69F2;&#x76AE;&#x7D20;&#xFF0C;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x672A;&#x7ECF;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; 6-&#x7532;&#x6C27;&#x57FA;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x5C71;&#x5948;&#x915A;&#x548C;&#x69F2;&#x76AE;&#x7D20;&#x548C;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; 6-&#x7F9F;&#x57FA;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5C55;&#x793A;&#x826F;&#x597D;&#x9002;&#x5E94;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

&#x5BF9; Cdk5 &#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x5929;&#x7136;&#x7C7B;&#x9EC4;&#x916E;&#x548C;&#x9EC4;&#x916E;&#x7C7B;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

A number of natural and synthetic flavonoids have been assessed previously with regard to their effects on the activity of cyclin-dependent kinases (Cdk1 and -2) related to the inhibition of cell cycle progression. On the other hand, the Cdk5/p35 system is of major importance in neuronal migration phenomena and brain development, and its deregulation is implicated in neurodegenerative diseases, particularly Alzheimer's. Here we show that some natural flavonoids inhibit the activity of the Cdk5/p35 system in the micromolar range, while others are practically inactive. Ring B-unsubstituted and highly methoxylated flavones were inactive or gave irreproducible results, and 6-methoxyapigenin and 6-methoxyluteolin were the most potent Cdk5 complex inhibitors within this series, while the common flavonols kaempferol and quercetin showed intermediate behavior. The reported crystal structure of the Cdk5 complex with its activator p25 was used for docking studies, which also led to the identification of the two 6-methoxyflavones, kaempferol and quercetin, as well as the untested 6-methoxy derivatives of kaempferol and quercetin and the corresponding 6-hydroxy analogues as compounds exhibiting a good fit to the active site of the enzyme.

Effects of natural flavones and flavonols on the kinase activity of Cdk5.

Un certain nombre de flavono&iuml;des naturels et synth&eacute;tiques ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute; ant&eacute;rieurement en ce qui concerne leurs effets sur l&#39;activit&eacute; des kinases cycline-d&eacute;pendantes (Cdk1 et -2) associ&eacute;s &agrave; l&#39;inhibition de la progression du cycle cellulaire. En revanche, le syst&egrave;me Cdk5/p35 est majeure importance dans les ph&eacute;nom&egrave;nes de migration neuronale et le d&eacute;veloppement du cerveau et sa d&eacute;r&eacute;glementation joue un r&ocirc;le dans les maladies neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives, notamment Alzheimer. Ici, nous montrons que certains flavono&iuml;des naturels inhibent l&#39;activit&eacute; du syst&egrave;me Cdk5/p35 dans la plage micromolaire, tandis que d&#39;autres sont pratiquement inactifs. Bague B non substitu&eacute;s et hautement m&eacute;thoxyl&eacute;s flavones sont inactifs ou ont donn&eacute; des r&eacute;sultats non reproductibles, et methoxyapigenin-6 et 6-methoxyluteolin &eacute;taient les plus puissants inhibiteurs complexes Cdk5 dans cette s&eacute;rie, tandis que la commune flavonols kaempf&eacute;rol et la querc&eacute;tine a montr&eacute; comportement interm&eacute;diaire. La structure cristalline rapport&eacute;s de la Cdk5 complexe avec son activateur p25 a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour l&#39;amarrage des &eacute;tudes, ce qui conduit &agrave; l&#39;identification des 6-deux methoxyflavones, kaempf&eacute;rol et la querc&eacute;tine, ainsi que les d&eacute;riv&eacute;s m&eacute;thoxy-6 non test&eacute;s de kaempf&eacute;rol et de querc&eacute;tine et de 6-hydroxyl&eacute;s analogues correspondants sous forme de compos&eacute;s pr&eacute;sentant une bonne cible pour le site actif de l&#39;enzyme.

Effets naturels flavones et flavonols sur l&#39;activit&eacute; de la kinase de Cdk5.

Effekte der nat&#xFC;rlichen Flavone und Flavonole auf die Kinaseaktivit&#xE4;t von Cdk5.

Un certo numero di flavonoidi naturali e sintetici &egrave; stato valutato in precedenza per quanto riguarda i loro effetti sull&#39;attivit&agrave; delle chinasi ciclina-dipendente (Cdk1 e -2) collegati con l&#39;inibizione della progressione del ciclo cellulare. D&#39;altra parte, il sistema Cdk5/p35 &egrave; di grande importanza nei fenomeni di migrazione neuronale e lo sviluppo del cervello e la deregolamentazione &egrave; implicato nelle malattie neurodegenerative, Alzheimer particolarmente. Qui vi mostriamo che alcuni flavonoidi naturali inibiscono l&#39;attivit&agrave; del sistema Cdk5/p35 nella gamma micromolar, mentre gli altri sono praticamente inattivi. Anello B-unsubstituted e altamente methoxylated flavoni erano inattivi o ha dato JiR, e 6-methoxyapigenin e 6-methoxyluteolin erano i pi&ugrave; potenti inibitori complessi Cdk5 all&#39;interno di questa serie, mentre i comuni flavonoli kaempferol e quercetina ha mostrato comportamento intermedio. Struttura cristallina segnalati della Cdk5 complesso con relativo attivatore p25 &egrave; stata utilizzata per attracco studi, che ha portato anche a identificare i due 6-methoxyflavones e kaempferol, quercetina, come pure i derivati non testati 6-metossi kaempferol, quercetina e il corrispondente 6-idrossi analoghi come composti esibendo una buona misura per il sito attivo dell&#39;enzima.

Effetti del naturale flavoni e flavonoli sull&#39;attivit&agrave; della chinasi della Cdk5.

&#x5929;&#x7136;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066; (cdk1 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;-2) &#x95A2;&#x9023;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;Cdk5/p35 &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5C02;&#x653B;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x73FE;&#x8C61;&#x3068;&#x8133;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x7DE9;&#x548C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x4ED6;&#x306E;&#x4EBA;&#x304C;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x9593;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x5929;&#x7136;&#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9; Cdk5/p35 &#x7CFB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; B &#x975E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3057;&#x9AD8;&#x3044; methoxylated &#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30F3;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7167;&#x3089;&#x3057;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB; &#x30B1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A7; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x30B1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30C1;&#x30F3;&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9; 6 methoxyapigenin &#x3068; 6 methoxyluteolin &#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x5185;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x306E; Cdk5 &#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; p25 &#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Cdk5 &#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x826F;&#x3044;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C8;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E; 6 methoxyflavones, &#x30B1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A7; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x30B1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x8EAB;&#x5206;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A7; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x30B1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; 6-&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E;&#x672A;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; 6-&#x30E1;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3092;&#x307E;&#x305F;&#x5C0E;&#x3044;&#x305F;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Cdk5 &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5929;&#x7136;&#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30F3;&#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30DC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xCC9C;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xD569;&#xC131; &#xD50C; &#xB77C; &#xBCF4;&#xB178; &#xC774;&#xB4DC; &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinases&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; (cdk1&#xC640;-2). &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, Cdk5/p35 &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xC8FC;&#xC694; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD604;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xB450;&#xB1CC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131; &#xC77C;&#xBD80; &#xCC9C;&#xC5F0; &#xD50C; &#xB77C; &#xBCF4;&#xB178; &#xC774;&#xB4DC; micromolar &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; Cdk5/p35 &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. B unsubstituted &#xB9C1;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; methoxylated flavones &#xD65C;&#xC131; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB610;&#xB294; &#xBA85;&#xB8CC;&#xD654; &#xACB0;&#xACFC; &#xC900; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 6-methoxyapigenin&#xACFC; 6 methoxyluteolin &#xD588;&#xB2E4;&#xC774; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; Cdk5 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xB3D9;&#xC548; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; flavonols kaempferol &#xBC0F; &#xC5ED;&#xD560; &#xC911;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; p25 cdk5&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC798; &#xB9DE;&#xB294; &#xC804;&#xC2DC; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; kaempferol&#xC640; &#xC5ED;&#xD560; &#xBC0F; &#xD574;&#xB2F9; 6-hydroxy analogues&#xC758; &#xC548; &#xB41C; 6-methoxy &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xB85C; &#xC11C; &#xB450; 6 methoxyflavones, kaempferol &#xBC0F; &#xC5ED;&#xD560;, &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB610;&#xD55C; led &#xB3C4;&#xD0B9; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xD6A8;&#xACFC; &#xC790;&#xC5F0; flavones &#xBC0F; flavonols Cdk5 &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;.

Una serie de flavonoides naturales y sint&eacute;ticos ha sido evaluada previamente con respecto a sus efectos sobre la actividad de Quinasas Ciclina-Dependientes (Cdk1 y -2) relacionados con la inhibici&oacute;n de la progresi&oacute;n del ciclo celular. Por otro lado, el sistema de la Cdk5/p35 es de mayor importancia en los fen&oacute;menos de la migraci&oacute;n neuronal y desarrollo del cerebro y su desregulaci&oacute;n est&aacute; implicado en enfermedades neurodegenerativas, particularmente de Alzheimer. Aqu&iacute; mostramos que algunos flavonoides naturales inhiben la actividad del sistema Cdk5/p35 en el rango micromolar, mientras que otros son pr&aacute;cticamente inactivos. Anillo B-unsubstituted y altamente methoxylated flavonas fueron inactivos o dieron resultados irreproducible, y methoxyapigenin-6 y 6-methoxyluteolin fueron los inhibidores m&aacute;s potentes de complejos Cdk5 dentro de esta serie, mientras que la com&uacute;n kaempferol flavonoides y quercitina mostraron comportamiento intermedio. La estructura cristalina divulgados de la Cdk5 complejo con su activador p25 fue utilizada para estudios, que tambi&eacute;n condujeron a la identificaci&oacute;n de los dos 6-methoxyflavones y quercetina y kaempferol, as&iacute; como los derivados 6-metoxi de kaempferol, quercetina y los correspondientes an&aacute;logos 6-hidroxis como compuestos que exhibe un buen ajuste para el sitio activo de la enzima de acoplamiento.

Efectos de naturales flavonas y flavonoles en la actividad de la quinasa de Cdk5.

&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1; Bcl-xl &#x662F;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5176;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x706D;&#x4EA1;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E; Bcl-xl &#x8DE8;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x548C;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#x5141;&#x8BB8;&#x5176;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x80BD;&#x3002;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E17;&#x900F;&#x6027; Bcl-xl &#x4FDD;&#x62A4;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BD2;&#x7D20; 1-&#x7532;&#x57FA;-4-phenylpyridinium&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x8001;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x5E94;&#x7528;&#x4FDD;&#x62A4;&#x540E; MPTP &#x7BA1;&#x7406;&#x6240;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x8BA1;&#x6570;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7F9F;&#x5316;&#x9176;&#x9633;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x9ED1;&#x8D28;&#x81F4;&#x5BC6;&#x5E26;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x900F;&#x7A97;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6709;&#x6548;&#x9632;&#x6B62;&#x6162;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x8BC1;&#x660E;&#x3002;

&#x819C;&#x6E17;&#x900F; Bcl-xl &#x9632;&#x6B62;&#x9ED1;&#x8D28; MPTP &#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;

The anti-apoptotic Bcl-xL is a promising agent to prevent neurodegeneration in Parkinson's disease, which is characterized by a demise of dopaminergic neurons. We linked Bcl-xL to a peptide that allows its delivery across biological membranes and the blood-brain barrier. We tested the fusion protein in two models of Parkinson's Disease. Cell-permeable Bcl-xL protected neuroblastoma cells from the selective neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridinium. Furthermore, its systemic application in aged mice protected dopaminergic neurons following administration of MPTP as revealed by counting of tyrosine hydroxylase-immunoreactive neurons in the substantia nigra pars compacta. Hence, we present that a cell-permeable form of an anti-apoptotic protein can be delivered to CNS neurons through its systemic application, and we provide the proof that the delivery of this protein to the CNS neurons effectively prevents neuronal cell death in models of chronic neurodegenerative diseases.

Membrane-permeable Bcl-xL prevents MPTP-induced dopaminergic neuronal loss in the substantia nigra.

L&#39;anti-apoptotique Bcl-xL est un agent prometteur pour pr&eacute;venir la neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;rescence dans la maladie de Parkinson, qui se caract&eacute;rise par une disparition des neurones dopaminergiques. Nous avons reli&eacute; le Bcl-xL &agrave; un peptide qui permet de sa prestation &agrave; travers les membranes biologiques et la barri&egrave;re h&eacute;mato - enc&eacute;phalique. Nous avons test&eacute; la prot&eacute;ine de fusion en deux mod&egrave;les de la maladie de Parkinson. Perm&eacute;able &agrave; la cellule Bcl-xL contre des cellules de neuroblastome la neurotoxine s&eacute;lective 1-m&eacute;thyl-4-ph&eacute;nylpyridinium. De plus, son application syst&eacute;mique chez les souris &acirc;g&eacute;es prot&eacute;g&eacute;s par les neurones dopaminergiques apr&egrave;s administration du MPTP, telle que r&eacute;v&eacute;l&eacute;e par le comptage des neurones immunor&eacute;actives hydroxylase de tyrosine dans la substantia nigra pars compacta. C&#39;est pourquoi nous pr&eacute;sentons qu&#39;une forme perm&eacute;able &agrave; la cellule d&#39;une prot&eacute;ine anti-apoptotique peut &ecirc;tre livr&eacute;e aux neurones de la CNS &agrave; travers son application syst&eacute;mique, et nous apportent la preuve que la livraison de cette prot&eacute;ine aux neurones CNS emp&ecirc;che effectivement la mort neuronale dans les mod&egrave;les des maladies d&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives chroniques.

Membrane perm&eacute;able Bcl-xL emp&ecirc;che la perte neuronale induite par le MPTP dopaminergique dans la substantia nigra.

Die Anti-Apoptotic Bcl-xL ist ein vielversprechender Agent Neurodegeneration bei Parkinson-Krankheit, charakterisiert durch einen Untergang der dopaminergen Neuronen zu verhindern. Wir verbanden Bcl-xL mit ein Peptid, das der Belieferung &uuml;ber biologische Membranen und die Blut - Hirn-Schranke erm&ouml;glicht. Wir testeten das Schmelzverfahren Protein in zwei Modellen der Parkinson-Krankheit. Zelle-durchl&auml;ssigen Bcl-xL Neuroblastoma Zellen vor der selektiven Neurotoxin 1-Methyl-4-MPPP gesch&uuml;tzt. Ausserdem gesch&uuml;tzt die systemische Anwendung in Alter M&auml;use dopaminergen Neuronen nach Verabreichung von MPTP, wie durch das z&auml;hlen von Tyrosin Hydroxylase-immunreaktivem Nervenzellen in der Substantia Nigra Pars Compacta offenbart. Daher stellen wir eine Zelle-durchl&auml;ssige Form eines Anti-apoptotischen Proteins zu CNS-Neuronen durch seine systemische Anwendung geliefert werden kann, und wir liefern den Beweis, dass die Auslieferung dieses Protein an die CNS-Neuronen effektiv neuronalen Zelltod in Modellen der chronischen neurodegenerativen Erkrankungen verhindert.

Membran-durchl&auml;ssigen Bcl-xL verhindert Verlust von MPTP-induzierte dopaminergen Nervenzellen in der Substantia Nigra.

L&#39;anti-apoptotic Bcl-xL &egrave; un promettente agente per prevenire la neurodegenerazione nella malattia di Parkinson, che &egrave; caratterizzato da un crollo dei neuroni dopaminergici. Abbiamo collegato Bcl-xL a un peptide che permette la consegna attraverso membrane biologiche e la barriera emato - encefalica. Abbiamo testato la proteina di fusione in due modelli della malattia di Parkinson. Cella-permeabile Bcl-xL protetto cellule di neuroblastoma da neurotossina selettiva 1-metil-4-phenylpyridinium. Inoltre, l&#39;applicazione sistemica nei topi anziani protetti Neuroni dopaminergici dopo somministrazione di MPTP, come rivelato dal conteggio dei neuroni tirosina idrossilasi-immunoreattive la substantia nigra pars compacta. Quindi, vi presentiamo una cellula permeabile forma una proteina anti-apoptotic pu&ograve; essere consegnata ai neuroni CNS attraverso la sua applicazione sistemica, che ci forniscono la prova che la consegna di questa proteina per i neuroni CNS previene efficacemente la morte delle cellule neuronali in modelli di malattie neurodegenerative croniche.

Membrana permeabile Bcl-xL impedisce la perdita di Neuroni dopaminergici MPTP-indotta nella substantia nigra.

&#x6297;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; Bcl-xl &#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7D42;&#x7109;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Bcl-xl &#x751F;&#x4F53;&#x819C;&#x3068;&#x8840;&#x6DB2;&#x8133;&#x95A2;&#x9580;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E; Bcl-xl &#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2; 1-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-4-phenylpyridinium &#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x5FDC;&#x7528;&#x6295;&#x4E0E; MPTP &#x9ED2;&#x8CEA;&#x7DFB;&#x5BC6;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x514D;&#x75AB;&#x967D;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x5F62;&#x5168;&#x8EAB;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x914D;&#x4FE1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x304C;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x819C;&#x900F;&#x904E; Bcl-xl MPTP &#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x4E2D;&#x8133;&#x3067;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC548;&#xD2F0;-apoptotic Bcl xL dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; neurodegeneration&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC720;&#xB9DD; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bcl Xl&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9C9;&#xACFC; &#xD608;&#xC561;-&#xB1CC; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0;&#xB294; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C;. &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC138;&#xD3EC; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; Bcl Xl&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; neurotoxin 1-&#xBA54; &#xD2F8;-4-phenylpyridinium&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB098;&#xC774; &#xB4E0;&#xB41C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; substantia nigra &#xAC08; &#xAC70; &#xC608;&#xC694; compacta&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; hydroxylase immunoreactive &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1D;&#xD600; MPTP&#xC758; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xD638;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC548;&#xD2F0;-apoptotic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD22C;&#xACFC; &#xD615;&#xD0DC;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC804;&#xB2EC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC;&#xC744; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CC;&#xC131; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC120;&#xBB3C;&#xC774;.

&#xB9C9; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; Bcl xL substantia nigra&#xC5D0;&#xC11C; MPTP &#xC720;&#xB3C4; dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El anti-apopt&oacute;tica Bcl-xL es un agente prometedor para prevenir la neurodegeneraci&oacute;n en la enfermedad de Parkinson, que se caracteriza por una desaparici&oacute;n de las neuronas dopamin&eacute;rgicas. Vinculamos Bcl-xL a un p&eacute;ptido que permite su entrega en las membranas biol&oacute;gicas y la barrera hemato - encef&aacute;lica. Probamos la prote&iacute;na de fusi&oacute;n en dos modelos de la enfermedad de Parkinson. Permeable a la c&eacute;lula Bcl-xL protege las c&eacute;lulas del neuroblastoma de la neurotoxina selectiva 1-metil-4-phenylpyridinium. Adem&aacute;s, su aplicaci&oacute;n sist&eacute;mica en ratones envejecidos hab&iacute;a protegido las neuronas dopamin&eacute;rgicas tras la administraci&oacute;n de MPTP seg&uacute;n lo revelado por conteo de neuronas hidroxilasa-immunoreactive tirosina en la sustancia negra pars compacta. Por lo tanto, presentamos que forma permeable a la c&eacute;lula de una prote&iacute;na anti-apoptotic puede ser entregada a las neuronas de la CNS a trav&eacute;s de su aplicaci&oacute;n sist&eacute;mica, y proporcionar la prueba de que la entrega de esta prote&iacute;na a las neuronas de la CNS previene con eficacia la muerte celular neuronal en modelos de enfermedades neurodegenerativas cr&oacute;nicas.

Membrana permeable Bcl-xL previene p&eacute;rdida neuronal inducida por MPTP dopamin&eacute;rgicas en la sustancia negra.

&Alpha;-synuclein &#x7684;&#x5408;&#x8BA1;&#x6570;&#x662F;&#x6563;&#x53D1;&#x6027;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5; (PD) &#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x7279;&#x70B9;&#x548C; &alpha;-synuclein &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x7840;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6027;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684; &alpha;-synuclein &#x805A;&#x5408;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x65B0;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316; &alpha;-synuclein&#xFF1A; &alpha;-synuclein &#x662F;&#x4EE5;&#x516D;&#x4E2A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; PDZ &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x9898;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; pdz &#x878D;&#x5408;&#x5230;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (EGFP) co-expressed&#x3002;&Alpha;-synuclein &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F20;&#x7EDF;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x800C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6570;&#x500D;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x9AD8; &#xFF1B;&#x8FD9;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x6BD4;&#x8F83; &alpha;-synuclein &#x53D8;&#x79CD;&#x548C;&#x6267;&#x884C;&#x5EF6;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;C-&#x672B;&#x671F;&#x622A;&#x65AD; &alpha;-synuclein &#x53D8;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#x7387;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684;&#x603B;&#x91CF;&#x548C;&#x6BD2;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E0E; &alpha;-synuclein &#x5355;&#x4F53;&#x7531;&#x5176; C &#x603B;&#x7AD9;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x5EF6;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x8868;&#x660E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5982;&#x4F55;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; &alpha;-synuclein &#x5408;&#x8BA1;&#x3002;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD8;&#x51CF;&#x5C11;&#x5176;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x8D1F;&#x8377;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; aggresome&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x672C;&#x8EAB;&#x5728;&#x6E05;&#x9664;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x4E0D;&#x4EC5;&#x9632;&#x6B62;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x6E05;&#x62C6;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x5177;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x4E0E;&#x65E9;&#x4E9B;&#x65F6;&#x5019;&#x5047;&#x8BBE;&#x96C6;&#x7ED3;&#x3001; &#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x95F4;&#x9699;&#x7684; &alpha;-synuclein &#x805A;&#x5408;&#x56E0;&#x6B64;&#x51FA;&#x73B0;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

&#x79EF;&#x7D2F;&#x548C;&#x5EF6;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x8868;&#x660E; &alpha;-synuclein &#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x3002;

Aggregates of alpha-synuclein are the pathological hallmark of sporadic Parkinson's disease (PD), and mutations in the alpha-synuclein gene underlie familial forms of the disease. To characterize the formation of alpha-synuclein aggregates in living cells, we developed a new strategy to visualize alpha-synuclein by fluorescence microscopy: alpha-synuclein was tagged with a six amino acid PDZ binding motif and co-expressed with the corresponding PDZ domain fused to enhanced green fluorescent protein (EGFP). In contrast to the traditional approach of alpha-synuclein-EGFP fusion proteins, this technique provided several-fold higher sensitivity; this allowed us to compare alpha-synuclein variants and perform time-lapse imaging. A C-terminally truncated alpha-synuclein variant showed the highest prevalence of aggregates and toxicity, consistent with stabilization of the alpha-synuclein monomer by its C-terminus. Time-lapse imaging illustrated how cells form and accumulate aggregates of alpha-synuclein. A substantial number of cells also reduced their aggregate load, primarily through formation of an aggresome, which could itself be cleared from the cell. The molecular chaperone Hsp70 not only prevented the formation of aggregates, but also increased their reduction and clearance, underlining the therapeutic potential of similar strategies. In contrast to earlier assumptions build-up, reduction and clearance of alpha-synuclein aggregation thus appear a highly dynamic process.

Accumulation and clearance of alpha-synuclein aggregates demonstrated by time-lapse imaging.

Agr&eacute;gats de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine sont la caract&eacute;ristique pathologique de la maladie de Parkinson sporadique (PD), et des mutations du g&egrave;ne de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine sous-tendent les formes familiales de la maladie. Afin de caract&eacute;riser la formation d&#39;agr&eacute;gats d&#39;alpha-synucl&eacute;ine dans les cellules vivantes, nous avons d&eacute;velopp&eacute; une nouvelle strat&eacute;gie afin de visualiser l&#39;alpha-synucl&eacute;ine par microscopie de fluorescence : alpha-synucl&eacute;ine &eacute;tait un motif de liaison PDZ six acides amin&eacute;s contenant le tag et co-exprim&eacute;e avec le domaine PDZ correspondant, fondu &agrave; la prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e (EGFP). Contrairement &agrave; l&#39;approche traditionnelle des prot&eacute;ines de fusion de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine-EGFP, cette technique a fourni plusieurs une sensibilit&eacute; plus &eacute;lev&eacute;e ; Cela nous a permis de comparer les variantes de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine et effectuer une imagerie time-lapse. Un C-terminale tronqu&eacute; variante d&#39;alpha-synucl&eacute;ine ont montr&eacute; la plus forte pr&eacute;valence d&#39;agr&eacute;gats et de toxicit&eacute;, conforme &agrave; la stabilisation du monom&egrave;re alpha-synucl&eacute;ine par son extr&eacute;mit&eacute; C-terminale. Time-Lapse imagerie illustre comment les cellules forment et s&#39;accumulent des agr&eacute;gats d&#39;alpha-synucl&eacute;ine. Un grand nombre de cellules a &eacute;galement r&eacute;duit leur charge globale, principalement par le biais de la formation d&#39;un aggresome, qui pourrait lui-m&ecirc;me &ecirc;tre effac&eacute;e de la cellule. Le chaperon mol&eacute;culaire Hsp70 non seulement emp&ecirc;ch&eacute; la formation d&#39;agr&eacute;gats, mais a &eacute;galement augment&eacute; leur r&eacute;duction et la clairance, soulignant le potentiel th&eacute;rapeutique des strat&eacute;gies similaires. Contrairement aux hypoth&egrave;ses ant&eacute;rieures accumulation, r&eacute;duction et clairance de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine agr&eacute;gation semblent donc un processus tr&egrave;s dynamique.

L&#39;accumulation et la clairance de l&#39;alpha-synucl&eacute;ine agr&eacute;gats d&eacute;montr&eacute;e par imagerie time-lapse.

Aggregate von Alpha-Synuclein sind die pathologisches der sporadischen Parkinson-Krankheit (PD) und Mutationen im Alpha-Synuclein-gen zugrunde liegen die famili&auml;re Formen der Krankheit. Um die Bildung von Alpha-Synuclein-Aggregaten in lebenden Zellen zu charakterisieren, entwickelten wir eine neue Strategie zum Visualisieren von Alpha-Synuclein durch Fluoreszenzmikroskopie: Alpha-Synuclein war markiert mit einem sechs Aminos&auml;ure PDZ-Bindung-Motiv und co-expressed mit der entsprechenden PDZ-Dom&auml;ne, die zu verbesserten gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (EGFP) verschmolzen. Im Gegensatz zu den traditionellen Ansatz Alpha-Synuclein-EGFP-Schmelzverfahrensproteine sofern diese Technik siebenmal h&ouml;heren Empfindlichkeit; Dies erlaubte uns, vergleichen Sie Alpha-Synuclein-Varianten und Zeitraffer Bildgebung durchf&uuml;hren. Eine C-unheilbar abgeschnitten Alpha-Synuclein-Variante zeigte die h&ouml;chste Pr&auml;valenz von Aggregaten und Toxizit&auml;t, konsistent mit Stabilisierung des Alpha-Synuclein Monomers durch seine C-Terminus. Time-Lapse Bildgebung illustriert wie Zellen bilden und sammeln Sie Aggregate von Alpha-Synuclein. Eine betr&auml;chtliche Anzahl von Zellen reduziert auch deren kumulierte Auslastung, vor allem durch Bildung eines Aggresome, die sich aus der Zelle gel&ouml;scht werden konnte. Das molekulare Chaperone Hsp70 verhindert die Bildung von Aggregaten nicht nur, sondern erh&ouml;ht auch ihre Reduktion und Zollabwicklung, unterstreicht das therapeutische Potenzial der &auml;hnliche Strategien. Im Gegensatz zu fr&uuml;heren Annahmen erscheinen Aufbau, Reduzierung und Abfertigung der Alpha-Synuclein Aggregation somit ein h&ouml;chst dynamischer Prozess.

Akkumulation und Abfertigung von Alpha-Synuclein-Aggregaten von Time-Lapse Bildgebung demonstriert.

Aggregati di alfa-sinucleina sono la caratteristica patologica di sporadica della malattia di Parkinson (PD), e le mutazioni nel gene dell&#39;alfa-sinucleina sottendono forme familiari della malattia. Per caratterizzare la formazione di aggregati di alfa-sinucleina in cellule viventi, abbiamo sviluppato una nuova strategia per visualizzare alfa-sinucleina da microscopia di fluorescenza: alfa-sinucleina &egrave; stato taggato con un motivo obbligatorio di sei aminoacidi PDZ e co-expressed con il corrispondente dominio PDZ fuso ad una maggiore proteina fluorescente verde (EGFP). In contrasto con l&#39;approccio tradizionale delle proteine di fusione alfa-sinucleina-EGFP, questa tecnica ha fornito several-fold sensibilit&agrave; superiore; Questo ci ha permesso di confrontare alfa-sinucleina varianti ed eseguire imaging time-lapse. C-terminale troncato variante alfa-sinucleina ha mostrato la pi&ugrave; alta prevalenza di aggregati e tossicit&agrave;, coerente con la stabilizzazione del monomero alfa-sinucleina da capolinea C. Time-lapse imaging illustrato come cellule formano e si accumulano aggregati di alfa-sinucleina. Un notevole numero di cellule anche ridotto il loro carico complessivo, soprattutto attraverso la formazione di un aggresome, che si potrebbe essere liquidati dalla cella. Il chaperone molecolare Hsp70 non solo ha impedito la formazione di aggregati, ma anche aumentato la loro riduzione e la clearance, sottolineando il potenziale terapeutico di strategie simili. In contrasto con la precedente ipotesi accumulo, la riduzione e la liquidazione dell&#39;alfa-sinucleina aggregazione appaiono cos&igrave; un processo altamente dinamico.

Accumulo e liquidazione degli aggregati di alfa-sinucleina dimostrata da imaging time-lapse.

&Alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x96C6;&#x8A08;&#x6563;&#x767A;&#x6027;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5; (PD) &#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;: &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x3060;&#x3063;&#x305F; 6 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178; PDZ &#x7D50;&#x5408;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30BF;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x306E;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (EGFP) &#x6EB6;&#x3051;&#x308B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; PDZ &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5171;&#x540C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&Alpha; &#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; EGFP &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x6570;&#x500D;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;;&alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C &#x672B;&#x7AEF; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x96C6;&#x8A08;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001;&#x305D;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x304C; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; &#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6709;&#x75C5;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x6570;&#x3082;&#x5F62;&#x6210;&#x81EA;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3001;aggresome &#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5F7C;&#x3089;&#x9AA8;&#x6750;&#x306E;&#x8CA0;&#x8377;&#x304C;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; Hsp70 &#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x4E0B;&#x7DDA;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3082;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x30D3;&#x30EB;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7; &#x30FB;&#x524A;&#x6E1B;&#x30FB; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x96C6;&#x7D04;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x9AA8;&#x6750;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3002;

&#xC54C;&#xD30C; synuclein&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB294; &#xC0B0;&#xBC1C;&#xC801; &#xC778; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; (PD)&#xC758; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xAC00;&#xC871; &#xD615;&#xD0DC; &#xAE30;&#xCD08;. &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xB7B5; &#xAC1C;&#xBC1C;: &#xC54C;&#xD30C;-synuclein 6 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; PDZ &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB85C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (EGFP)&#xB97C; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xD574;&#xB2F9; PDZ &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xACFC; co-expressed. &#xC54C;&#xD30C;-synuclein-EGFP &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xB2EC;&#xB9AC;&#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xBA87; &#xB192;&#xC740; &#xAC10;&#xB3C4;; &#xC774; &#xD1B5;&#xD574; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xBCC0;&#xC885; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC744; &#xC218;&#xD589;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C-&#xB9D0;&#xAE30; &#xC798;&#xB9B0; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xBCC0;&#xC885; &#xC9D1;&#xACC4; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xBAA8;&#xB178; &#xBA38;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xB960;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xC601;&#xC0C1; &#xC124;&#xBA85; &#xC140;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC54C;&#xD30C; synuclein&#xC758; &#xCD95;&#xC801;. &#xC140;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xC218;&#xB3C4; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC790;&#xCCB4; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC6CC;&#xC9C8; &#xC218;&#xB294; aggresome&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4; &#xBD80;&#xD558; &#xAC10;&#xC18C;. &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; Hsp70 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xB9C9;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xBC11;&#xC904; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774;&#xC804; &#xAC00;&#xC815;&#xC744; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xD615;&#xC131;, &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xACFC;&#xC815; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD95;&#xC801;&#xACFC; &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xC9D1;&#xACC4; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xBA85;&#xC758;.

Agregados de alfa-sinucle&iacute;na son el sello patol&oacute;gico de la enfermedad de Parkinson espor&aacute;dica (PD), y mutaciones en el gen de la alfa-sinucle&iacute;na subyacen formas familiares de la enfermedad. Para caracterizar la formaci&oacute;n de agregados de alfa-sinucle&iacute;na en c&eacute;lulas vivas, hemos desarrollado una nueva estrategia para visualizar la alfa-sinucle&iacute;na por microscop&iacute;a de fluorescencia: alfa-sinucle&iacute;na fue etiquetada con un motivo de uni&oacute;n de PDZ seis amino&aacute;cidos y co-expressed con el correspondiente dominio PDZ fusionado a la prote&iacute;na fluorescente verde mejorada (EGFP). En contraste con el enfoque tradicional de prote&iacute;nas de fusi&oacute;n de la alfa-sinucle&iacute;na-EGFP, esta t&eacute;cnica proporciona un mayor sensibilidad; Esto nos permiti&oacute; comparar variantes de alfa-sinucle&iacute;na y realizar la proyecci&oacute;n de imagen de time-lapse. Un C-terminal truncado variante de alfa-sinucle&iacute;na demostrada la mayor prevalencia de agregados y toxicidad, consistente con la estabilizaci&oacute;n de la alfa-sinucle&iacute;na mon&oacute;mero por su c-terminal. Proyecci&oacute;n de imagen de time-lapse ilustra c&oacute;mo las c&eacute;lulas forman y acumulan agregados de alfa-sinucle&iacute;na. Un n&uacute;mero considerable de c&eacute;lulas tambi&eacute;n redujo su carga total, principalmente a trav&eacute;s de la formaci&oacute;n de un aggresome, que s&iacute; podr&iacute;a borrarse de la c&eacute;lula. Las chaperonas moleculares Hsp70 no s&oacute;lo prevenir la formaci&oacute;n de agregados, pero tambi&eacute;n aumentaron su reducci&oacute;n y separaci&oacute;n, subrayando el potencial terap&eacute;utico de estrategias similares. En contraste con la anteriores hip&oacute;tesis acumulaci&oacute;n, reducci&oacute;n y separaci&oacute;n de la agregaci&oacute;n de alfa-sinucle&iacute;na as&iacute; aparecen un proceso altamente din&aacute;mico.

Acumulaci&oacute;n y separaci&oacute;n de agregados de alfa-sinucle&iacute;na demostrado por proyecci&oacute;n de imagen de time-lapse.

&#x80BA;&#x708E;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x662F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x539F;&#x56E0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6C38;&#x4E45;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x4E2D; 30%&#x548C; 25%&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x5728;&#x81F4;&#x547D;&#x6027;&#x6210;&#x679C;&#x3002;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x7684;&#x6EB6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7D20;&#x6EB6;&#x8840;&#x662F; S.&#x80BA;&#x708E;&#x4E3B;&#x8981;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x5B83;&#x5C06;&#x4EA7;&#x751F;&#x5FEB;&#x901F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x5728;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6216;&#x5728;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4F53;&#x819C;&#x6570;&#x989D;&#x7684;&#x6EB6;&#x8840;&#x4EA7;&#x751F;&#x5FEB;&#x901F;&#x6346;&#x7ED1;&#x548C;&#x5404;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; &mdash; &mdash; &#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x661F;&#x5F62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x7BA1; (&#x8FC7;&#x5EA6;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x8FF9;&#x8C61;&#xFF09; &#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x3002;&#x6346;&#x7ED1;&#x9500;&#x552E;&#x542F;&#x52A8; perinuclearly &#x548C;&#x9759;&#x8109;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x819C;&#x3002;&#x5F71;&#x54CD;&#x672A;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5230;&#x8C03;&#x89E3;&#x9499;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x3001; &#x5927;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3001; &#x6216; RhoA&#x3001; Rac1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6EB6;&#x8840;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x6D88;&#x8017;&#x548C;&#x74E6;&#x89E3;&#x7684;&#x96CF;&#x5F62;&#x4E0E;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x6BD2;&#x7D20;&#x5B8C;&#x5168;&#x6291;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x8868;&#x578B;&#x3002;Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x51CF;&#x5C11;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6346;&#x7ED1;&#x3001; &#x6697;&#x793A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x540E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6311;&#x6218;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4EE3;&#x7406;&#x7D2B;&#x6749;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x63D0;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x673A;&#x7406;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x52A8;&#x529B;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;

&#x5FEB;&#x901F;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6346;&#x7ED1;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x80BA;&#x708E;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6EB6;&#x8840;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#xFF0C;&#x975E;&#x6EB6;&#x548C; Src &#x6FC0;&#x9176;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x8D29;&#x5356;&#x3002;

Streptococcus pneumoniae is the most frequent cause of bacterial meningitis, leading to permanent neurological damage in 30% and lethal outcome in 25% of patients. The cholesterol-dependent cytolysin pneumolysin is a major virulence factor of S. pneumoniae. It produces rapid cell lysis at higher concentrations or apoptosis at lower concentrations. Here, we show that sublytic amounts of pneumolysin produce rapid bundling and increased acetylation of microtubules (signs of excessive microtubule stabilization) in various types of cells--neuroblastoma cells, fibroblasts and primary astrocytes. The bundling started perinuclearly and extended peripherally towards the membrane. The effect was not connected to pneumolysin's capacity to mediate calcium influx, macropore formation, apoptosis, or RhoA and Rac1 activation. Cellular cholesterol depletion and neutralization of the toxin by pre-incubation with cholesterol completely inhibited the microtubule phenotype. Pharmacological inhibition of Src-family kinases diminished microtubule bundling, suggesting their involvement in the process. The relevance of microtubule stabilization to meningitis was confirmed in an experimental pneumococcal meningitis animal model, where increased acetylation was observed. Live imaging experiments demonstrated a decrease in organelle motility after toxin challenge in a manner comparable to the microtubule-stabilizing agent taxol, thus proposing a possible pathogenic mechanism that might contribute to the CNS damage in pneumococcal meningitis.

Rapid microtubule bundling and stabilization by the Streptococcus pneumoniae neurotoxin pneumolysin in a cholesterol-dependent, non-lytic and Src-kinase dependent manner inhibits intracellular trafficking.

Streptococcus pneumoniae est la cause la plus fr&eacute;quente de la m&eacute;ningite bact&eacute;rienne, entra&icirc;nant des dommages neurologiques permanents dans 30 % et une issue fatale dans 25 % des patients. Le pneumolysin cytolysine d&eacute;pendante de cholest&eacute;rol est un facteur de virulence important de S. pneumoniae. Il produit la lyse cellulaire rapide des concentrations plus &eacute;lev&eacute;es ou l&#39;apoptose &agrave; des concentrations plus faibles. Ici, nous montrons que des quantit&eacute;s sublytiques de pneumolysin produisent un regroupement rapide et ac&eacute;tylation accrue des microtubules (signes de stabilisation des microtubules excessive) dans divers types de cellules - cellules de neuroblastome, les fibroblastes et les astrocytes primaires. Le groupement a commenc&eacute; perinuclearly et &eacute;tendu en p&eacute;riph&eacute;rie vers la membrane. L&#39;effet n&#39;&eacute;tait pas li&eacute; &agrave; la capacit&eacute; de pneumolysin d&#39;arbitrer l&#39;influx calcique, formation des macropores, apoptose ou activation de RhoA et Rac1. Appauvrissement de la couche cellulaire de cholest&eacute;rol et de neutralisation de la toxine de pr&eacute;-incubation avec cholest&eacute;rol inhibent compl&egrave;tement le ph&eacute;notype de microtubules. Inhibition pharmacologique des kinases de la famille Src diminu&eacute;e microtubule groupement, ce qui sugg&egrave;re de leur implication dans le processus. La pertinence de la stabilisation des microtubules de m&eacute;ningite a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e chez un mod&egrave;le animal de la m&eacute;ningite &agrave; pneumocoques exp&eacute;rimentale, o&ugrave; l&#39;ac&eacute;tylation accrue a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Des exp&eacute;riences d&#39;imagerie direct ont d&eacute;montr&eacute; une diminution de la motilit&eacute; de l&#39;organite apr&egrave;s toxine d&eacute;fi d&#39;une mani&egrave;re comparable &agrave; la stabilisation des microtubules agent taxol, proposant ainsi un &eacute;ventuel m&eacute;canisme pathog&egrave;ne qui peut-&ecirc;tre contribuer aux dommages CNS dans la m&eacute;ningite &agrave; pneumocoques.

Groupement des microtubules rapide et la stabilisation par le Streptococcus pneumoniae neurotoxine pneumolysin Src-kinase de fa&ccedil;on d&eacute;pendante et d&eacute;pendante du taux de cholest&eacute;rol, non-lytique inhibe le trafic intracellulaire.

Streptococcus Pneumoniae ist die h&auml;ufigste Ursache einer bakteriellen Meningitis, was zu bleibenden neurologischen Sch&auml;den bei 30 % und t&ouml;dliche Ergebnis bei 25 % der Patienten. Die Cholesterin-abh&auml;ngige Cytolysin Pneumolysin ist eine gro&szlig;e Virulenzfaktoren von S. Pneumoniae. Schnelle Zellenzerst&ouml;rung bei h&ouml;heren Konzentrationen oder Apoptosis in niedrigeren Konzentrationen produziert. Hier zeigen wir, dass sublytic Mengen Pneumolysin rapid b&uuml;ndeln und erh&ouml;hte Acetylierung der Mikrotubuli (Anzeichen f&uuml;r eine &uuml;berm&auml;&szlig;ige Microtubule Stabilisierung) in verschiedenen Arten von Zellen--Neuroblastoma Zellen, Fibroblasten und prim&auml;re Astrozyten zu produzieren. Die B&uuml;ndelung Perinuclearly gestartet und am Rande in Richtung der Membran verl&auml;ngert. Die Wirkung war nicht Pneumolysin die F&auml;higkeit, Kalzium-Zustrom, Macropore Bildung, Apoptosis oder RhoA und Rac1 Aktivierung vermitteln verbunden. Abnahme der zellul&auml;ren Cholesterin und Neutralisierung des Toxins durch Vorinkubation mit Cholesterin gehemmt vollst&auml;ndig der Microtubule-Ph&auml;notyp. Pharmakologische Hemmung der Src-Familie Kinasen vermindert Microtubule b&uuml;ndeln, was ihre Einbindung in den Prozess. Die Relevanz des Microtubule Stabilisierung Meningitis best&auml;tigte sich im Tiermodell experimentell Pneumokokken-Meningitis, wo erh&ouml;hte Acetylierung beobachtet wurde. Live bildgebende Experimenten zeigten einen R&uuml;ckgang der organell Motilit&auml;t nach Toxin Challenge in gewissem Sinne vergleichbar mit der Stabilisierung des Microtubule Agent Taxol, so schl&auml;gt einen m&ouml;glichen pathogenen Mechanismus, der zur der CNS-Sch&auml;den an Pneumokokken Meningitis beitragen k&ouml;nnten.

Schnelle Microtubule b&uuml;ndeln und Stabilisierung durch den Streptococcus Pneumoniae Neurotoxin Pneumolysin Cholesterin-abh&auml;ngige, nicht-lytische und Src-Kinase abh&auml;ngige hemmt intrazellul&auml;re Menschenhandel.

Lo Streptococcus pneumoniae &egrave; la causa pi&ugrave; frequente di meningite batterica, che portano a danni neurologici permanenti nel 30% e l&#39;esito letale nel 25% dei pazienti. Il colesterolo-dipendente Citolisina pneumolysin &egrave; un fattore di virulenza maggiore di S. pneumoniae. Esso produce lisi cellulare rapida a concentrazioni pi&ugrave; elevate o apoptosi a concentrazioni inferiori. Qui, ci mostra che sublytic quantit&agrave; di pneumolysin produrre rapido impacchettare e aumentato acetilazione dei microtubuli (segni di stabilizzazione dei microtubuli eccessiva) in vari tipi di cellule - cellule di neuroblastoma, fibroblasti e astrociti primari. Impacchettare perinuclearly ed esteso perifericamente verso la membrana. L&#39;effetto non &egrave; stato collegato alla capacit&agrave; di pneumolysin a mediare l&#39;afflusso di calcio, formazione di macropore, apoptosis o attivazione RhoA e Rac1. Deplezione cellulare di colesterolo e neutralizzazione della tossina di preincubazione con colesterolo completamente inibito il fenotipo dei microtubuli. Inibizione farmacologica della chinasi Src-famiglia diminuita microtubule impacchettare, suggerendo loro coinvolgimento nel processo. La rilevanza della stabilizzazione dei microtubuli per meningite &egrave; stata confermata in un modello animale sperimentale di meningite da pneumococco, dove &egrave; stato osservato aumento acetilazione. Esperimenti dal vivo imaging hanno dimostrato una diminuzione della motilit&agrave; dell&#39;organello dopo la sfida di tossina in modo paragonabile per la stabilizzazione dei microtubuli agente taxol, proponendo cos&igrave; un possibile meccanismo patogeno che potrebbe contribuire al danno CNS nella meningite da pneumococco.

Microtubulo rapido impacchettare e stabilizzazione dal Streptococcus pneumoniae neurotossina pneumolysin un Src-chinasi dipendente dal modo e colesterolo-dipendente, non litico inibisce il traffico intracellulare.

&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;30 &#xFF05; &#x306E;&#x6C38;&#x4E45;&#x7684;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5B66;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x3068; 25% &#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x6027;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; cytolysin &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x30BB;&#x30EB;&#x63DB;&#x6563;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;sublytic &#x91CF;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; &#xFF08;&#x904E;&#x5EA6;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x5146;&#x3057;&#xFF09; &#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5404;&#x7A2E;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF0D; &#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB; perinuclearly &#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x819C;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52B9;&#x679C; RhoA &#x3068; Rac1 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;, &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3084;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D41;&#x5165;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x67AF;&#x6E07;&#x3068;&#x7C21;&#x4FBF;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306B;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x5B9F;&#x9A13;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; CNS &#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5F8C;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9023;&#x9396;&#x7403;&#x83CC;&#x80BA;&#x708E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;, &#x975E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Src &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x52D5;&#x614B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; &#xADE0; &#xC601;&#xAD6C;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; 30% &#xBC0F; 25%&#xC758; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD754;&#xD55C; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; cytolysin pneumolysin &#xBBF8; &#xADE0;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB610;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; apoptosis&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; pneumolysin sublytic &#xC591;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xBC88;&#xB4E4; &#xACE0; &#xC99D;&#xAC00; acetylation microtubules (&#xACFC;&#xB3C4; &#xD55C; microtubule &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xC9D5;&#xD6C4;) &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC774;&#xB2E4;-&#xC140;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC88;&#xB4E4;&#xB85C; perinuclearly&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB9C9; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xACFC; &#xCE7C;&#xC298; &#xC720;&#xC785;, macropore &#xD615;&#xC131;, apoptosis, &#xB610;&#xB294; RhoA &#xBC0F; Rac1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC911;&#xC7AC; pneumolysin&#xC758; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xACE0;&#xAC08; &#xBC0F; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC744; pre-incubation &#xD558; &#xC5EC; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC911;&#xD654; &#xC644;&#xC804;&#xD788; microtubule phenotype &#xC800;&#xD574;. Src-&#xAC00;&#xC871; kinases &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xC18C; microtubule &#xBC88;&#xB4E4;, &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;. &#xB1CC; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC744; &#xC548;&#xC815;&#xD654; microtubule &#xAD00;&#xB828;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; acetylation &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD3D0; &#xB834; &#xADE0; &#xC131; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD3D0; &#xB834; &#xADE0; &#xC131; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; CNS &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; microtubule &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; taxol&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB3C5; &#xB3C4;&#xC804; &#xD6C4; &#xD2B8;&#xB294; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; microtubule &#xBC88;&#xB4E4; &#xBC0F; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; &#xADE0; neurotoxin pneumolysin &#xBE44; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; Src &#xD0A4; &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC00;&#xB9E4; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

Streptococcus pneumoniae es la causa m&aacute;s frecuente de meningitis bacteriana, llevando a da&ntilde;o neurol&oacute;gico permanente en 30% y el resultado mortal en el 25% de los pacientes. El colesterol-dependiente Citolisina inmunoprotectores es un factor importante de la virulencia de S. pneumoniae. Produce lisis celular r&aacute;pida en concentraciones m&aacute;s altas o apoptosis en concentraciones m&aacute;s bajas. A continuaci&oacute;n, os mostramos que sublytic cantidades de inmunoprotectores producen liar r&aacute;pido y acetilaci&oacute;n creciente de microt&uacute;bulos (signos de estabilizaci&oacute;n de los microt&uacute;bulos excesivo) en diversos tipos de c&eacute;lulas, las c&eacute;lulas del neuroblastoma, fibroblastos y astrocitos primarios. La agrupaci&oacute;n comenz&oacute; perinuclearly y extiende perif&eacute;ricamente hacia la membrana. El efecto no fue conectado a la capacidad de inmunoprotectores para mediar la afluencia de calcio, formaci&oacute;n de macropore, apoptosis o activaci&oacute;n de RhoA y Rac1. Agotamiento de colesterol celular y la neutralizaci&oacute;n de la toxina por preincubaci&oacute;n con colesterol inhibici&oacute;n completamente el fenotipo de microt&uacute;bulos. Inhibici&oacute;n farmacol&oacute;gica de quinasas Src-familia disminuido microt&uacute;bulos liarse, sugiriendo su participaci&oacute;n en el proceso. La importancia de la estabilizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos meningitis fue confirmada en un modelo animal experimental meningitis neumoc&oacute;cica, donde se observ&oacute; aumentada de acetilaci&oacute;n. En experimentos de proyecci&oacute;n de imagen demostraron una disminuci&oacute;n motilidad organelo despu&eacute;s del desaf&iacute;o de la toxina de una manera comparable al taxol agente estabilizador de microt&uacute;bulos, proponiendo as&iacute; un posible mecanismo pat&oacute;geno que podr&iacute;a contribuir a los da&ntilde;os de la CNS en meningitis neumoc&oacute;cica.

Microt&uacute;bulos r&aacute;pida liarse y estabilizaci&oacute;n por el Streptococcus pneumoniae neurotoxina inmunoprotectores de una manera dependiente de Src-quinasa y dependiente de colesterol, no-l&iacute;tica inhibe el tr&aacute;fico intracelular.

&Alpha;-synuclein &#xFF08;&#x5B57;&#x6BCD;&#xFF09; &#x805A;&#x5408;&#x5230;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5; (PD) &#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x65E9;&#x5DF2;&#x5F97;&#x5230;&#x627F;&#x8BA4;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001; &#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7269;&#x79CD;&#x548C;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x6027;&#x8D28;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5C1A;&#x6709;&#x5F85;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x83B7;&#x53D6;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x5B57;&#x6BCD;&#x7269;&#x79CD;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5408;&#x7406;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7531;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x5B57;&#x6BCD;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5B57;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6709;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; fibrillization &#x7684;&#x503E;&#x5411;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7A97;&#x4F53;&#x589E;&#x52A0;&#x6570;&#x989D;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C; PD &#x6A21;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x5982;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x548C;&#x679C;&#x8747;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E4B;&#x540E;&#x7814;&#x7A76; biophysically &#x5B9A;&#x4E49; pre-fibrillar &#x5B57;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x5B57;&#x6BCD;&#x805A;&#x5408;&#x4E0E;&#x53D7;&#x635F; &beta;-&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x663E;&#x8457;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7D27;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8054;&#x7CFB; multimeric &#x5B57;&#x6BCD;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x5176;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Pre-fibrillar &alpha;-synuclein &#x53D8;&#x5F02;&#x4F53;&#x53D7;&#x635F; beta &#x7ED3;&#x6784;&#x589E;&#x52A0;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BD2;&#x6027;&#x3002;

The relation of alpha-synuclein (alphaS) aggregation to Parkinson's disease (PD) has long been recognized, but the mechanism of toxicity, the pathogenic species and its molecular properties are yet to be identified. To obtain insight into the function different aggregated alphaS species have in neurotoxicity in vivo, we generated alphaS variants by a structure-based rational design. Biophysical analysis revealed that the alphaS mutants have a reduced fibrillization propensity, but form increased amounts of soluble oligomers. To assess their biological response in vivo, we studied the effects of the biophysically defined pre-fibrillar alphaS mutants after expression in tissue culture cells, in mammalian neurons and in PD model organisms, such as Caenorhabditis elegans and Drosophila melanogaster. The results show a striking correlation between alphaS aggregates with impaired beta-structure, neuronal toxicity and behavioural defects, and they establish a tight link between the biophysical properties of multimeric alphaS species and their in vivo function.

Pre-fibrillar alpha-synuclein variants with impaired beta-structure increase neurotoxicity in Parkinson's disease models.

La relation d&#39;agr&eacute;gation d&#39;alpha-synucl&eacute;ine (alphaS) pour la maladie de Parkinson (MP) est reconnue depuis longtemps, mais le m&eacute;canisme de toxicit&eacute;, les esp&egrave;ces pathog&egrave;nes et ses propri&eacute;t&eacute;s mol&eacute;culaires doivent encore &ecirc;tre identifi&eacute;es. Pour obtenir un aper&ccedil;u de la fonction des alphaS agr&eacute;g&eacute;es diff&eacute;rentes esp&egrave;ces ont en neurotoxicit&eacute; in vivo, nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des variantes de l&#39;alphabet par une conception rationnelle bas&eacute;e sur la structure. Analyse biophysique a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les mutants alphaS ont une propension fibrillization r&eacute;duite, mais forme a augment&eacute; les montants d&#39;oligom&egrave;res solubles. Afin d&#39;&eacute;valuer leur r&eacute;ponse biologique in vivo, nous avons &eacute;tudi&eacute; les effets des mutants alphaS pre-fibrillar biophysiques d&eacute;finie apr&egrave;s une expression dans les cellules de culture de tissus, dans les neurones chez les mammif&egrave;res et chez les organismes mod&egrave;le PD, comme Caenorhabditis elegans et la drosophile. Les r&eacute;sultats montrent une corr&eacute;lation frappante entre les agr&eacute;gats alphaS avec structure en b&ecirc;ta avec facult&eacute;s affaiblies, toxicit&eacute; neuronale et d&eacute;fauts comportements et ils &eacute;tablissent un lien &eacute;troit entre les propri&eacute;t&eacute;s biophysiques des esp&egrave;ces alphaS multim&eacute;riques et leur fonction in vivo.

Pre-Fibrillar alpha-synucl&eacute;ine variantes avec b&ecirc;ta-structure alt&eacute;r&eacute;e augmentent la neurotoxicit&eacute; chez les mod&egrave;les de la maladie de Parkinson.

Das Verh&auml;ltnis von Alpha-Synuclein (AlphaS) Aggregation an der Parkinson-Krankheit (PD) hat l&auml;ngst erkannt worden, aber der Mechanismus der Toxizit&auml;t sowie den pathogenen Arten und molekularen Eigenschaften sind noch nicht identifiziert werden. Erhalten Sie Einblick in die Funktion, dass aggregierte AlphaS, die verschiedenen Arten im Neurotoxizit&auml;t in-vivo haben, haben wir durch eine Struktur basierende rationales Design AlphaS, die Varianten generiert. Biophysikalische Analyse ergab, dass die AlphaS, die Mutanten eine reduzierte wichtige Neigung haben, aber Form Mengen an l&ouml;slichen Oligomere erh&ouml;hte. Um ihre biologische Reaktion, die in-vivo zu beurteilen, haben wir die Auswirkungen des AlphaS, die biophysikalisch definierten pre-fibrillar Mutanten nach Ausdruck in Gewebekultur Zellen, S&auml;ugetier-Neuronen und PD Modellorganismen wie Caenorhabditis Elegans und Drosophila Melanogaster studierte. Die Ergebnisse zeigen einer auff&auml;lligen Korrelation zwischen AlphaS, die Aggregate mit gest&ouml;rter Beta-Struktur, neuronale Toxizit&auml;t und Verhaltensst&ouml;rungen M&auml;ngel, und sie schaffen eine enge Verbindung zwischen den biophysikalischen Eigenschaften werden AlphaS, die Arten und ihre in-vivo-Funktion.

Pre-fibrillar Alpha-Synuclein-Varianten mit gest&ouml;rter Beta-Struktur erh&ouml;hen Neurotoxizit&auml;t bei Morbus Parkinson-Modellen.

La relazione di aggregazione di alfa-sinucleina (alfa) di malattia di Parkinson (MdP) lungamente &egrave; stata riconosciuta, ma il meccanismo di tossicit&agrave;, la specie patogene e le sue propriet&agrave; molecolari sono ancora da identificare. Per ottenere la visione la funzione alfa aggregati differenti specie hanno in neurotossicit&agrave; in vivo, abbiamo generato varianti alfa da un design razionale basata sulla struttura. Analisi biofisica ha rivelato che i mutanti alfa hanno una propensione fibrillization ridotta, ma forma aumentata quantit&agrave; di oligomeri solubili. Per valutare la loro risposta biologica in vivo, abbiamo studiato gli effetti dei mutanti alfa pre-fibrillar biophysically definito dopo un&#39;espressione in cellule di coltura del tessuto, nei neuroni dei mammiferi e degli organismi modello PD, come Caenorhabditis elegans e Drosophila melanogaster. I risultati mostrano una sorprendente correlazione tra aggregati alfa beta-struttura alterata, tossicit&agrave; neuronale e difetti comportamentali e stabilire un legame stretto tra le propriet&agrave; biofisiche della specie alphaS multimerica e la loro funzione in vivo.

Pre-Fibrillar alfa-sinucleina varianti con beta-struttura alterata aumentano neurotossicit&agrave; nei modelli di malattia di Parkinson.

&Alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; (&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;) &#x306E;&#x96C6;&#x8A08;&#x306B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5; (PD) &#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001;&#x83CC;&#x7A2E;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x96C6;&#x8A08;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7A2E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5E74;&#x4F1A;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x50BE;&#x5411;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x91CF;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092; in vivo &#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x5F0F;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x6587;&#x5316;&#x30BB;&#x30EB;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068; PD &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306A;&#x3069;&#x5F8C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; pre-fibrillar &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x969C;&#x5BB3;&#x8005; &beta; &#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3068;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5E74;&#x4F1A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x4F1A;&#x5408;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7A2E;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7DCA;&#x5BC6;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Pre-fibrillar &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x969C;&#x5BB3; &beta; &#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; (PD)&#xB97C; &#xC54C;&#xD30C;-synuclein (&#xC54C;&#xD30C;) &#xC9D1;&#xACC4; &#xAD00;&#xACC4; &#xC624;&#xB798; &#xC778;&#xC815;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3C5;&#xC131;, &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC885; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9D1;&#xACC4; &#xB41C; &#xC54C;&#xD30C; &#xC885; neurotoxicity vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC788;&#xB294; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC54C;&#xD30C; &#xBCC0;&#xD615; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xBC18; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xC124;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC54C;&#xD30C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; fibrillization &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xC788;&#xB294;&#xB370; &#xC591;&#xC2DD;&#xC744; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC591;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;. In vivo &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC18;&#xC751; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xC6B0;&#xB9AC; Caenorhabditis elegans Drosophila melanogaster &#xB4F1; PD &#xBAA8;&#xD615; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC30;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DD; &#xD6C4; biophysically &#xC815;&#xC758; &#xB41C; pre-fibrillar &#xC54C;&#xD30C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xD589;&#xB3D9; &#xACB0;&#xD568;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; multimeric &#xC54C;&#xD30C; &#xC885;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xC18D;&#xC131;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD568;&#xC218; &#xC0AC;&#xC774; &#xAF49; &#xC5F0;&#xACB0; &#xAD6C;&#xCD95; &#xC7A5;&#xC560; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xAD6C;&#xC870;, &#xC54C;&#xD30C; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

&#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xB41C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; pre-fibrillar &#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xBCC0;&#xC885; neurotoxicity &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00;.

La relaci&oacute;n de agregaci&oacute;n de alfa-sinucle&iacute;na (alphaS) para la enfermedad de Parkinson (EP) ha sido reconocida desde hace mucho, pero el mecanismo de toxicidad, las especies pat&oacute;genas y sus propiedades moleculares est&aacute;n a&uacute;n por identificar. Para obtener informaci&oacute;n sobre la funci&oacute;n alphaS agregados diferentes especies tienen en neurotoxicidad en vivo, generamos variantes Alfas por un dise&ntilde;o racional basado en la estructura. An&aacute;lisis biof&iacute;sico revelaron que los mutantes de alfas tienen una propensi&oacute;n de fibrillization reducido, pero forma aumento en las cantidades de olig&oacute;meros solubles. Para evaluar su respuesta biol&oacute;gica en vivo, se estudiaron los efectos de los mutantes basada definida alphaS pre-fibrillar despu&eacute;s de la expresi&oacute;n en c&eacute;lulas de cultivo de tejidos, en mam&iacute;feras neuronas y en organismos modelo PD como Caenorhabditis elegans y Drosophila melanogaster. Los resultados muestran una correlaci&oacute;n llamativa entre agregados alphaS con beta-estructura deteriorada, toxicidad neuronal y defectos de comportamiento y establecer un v&iacute;nculo estrecho entre las propiedades biof&iacute;sicas de las especies de alphaS multim&eacute;rica y su funci&oacute;n in vivo.

Variantes de la alfa-sinucle&iacute;na pre-Fibrillar con beta-estructura deteriorada aumentan la neurotoxicidad en modelos de la enfermedad de Parkinson.

&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x53CD;&#x590D;&#x5FAA;&#x73AF;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x63D0;&#x51FA;&#x540E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x96C6;&#x7FA4;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5C06; endocytosed &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x5B83;&#x8FD8;&#x63D0;&#x8BAE;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5F25;&#x6F2B;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x968F;&#x673A;&#x805A;&#x96C6;&#x6210;&#x65B0;&#x7684;&#x6C34;&#x6CE1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x627E;&#x5230; &#xFF08;&#x91CA;&#x653E;&#x6574;&#x4E2A;&#x56DE;&#x6536;&#x6C60;&#xFF09; &#x7684;&#x5F3A;&#x523A;&#x6FC0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x6807;&#x8BB0;&#x7A81;&#x89E6;&#x7A81;&#x89E6; boutons &#x4E0D;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x9002;&#x5EA6;&#x523A;&#x6FC0; &#xFF08;&#x91CA;&#x653E;&#x5927;&#x7EA6; 19%&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x6C34;&#x6CE1;) &#x540E;&#x8DDF;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EF;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x540C;&#x610F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x770B;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x6297;&#x4F53;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5206;&#x5B50;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x51FA;&#x73B0;&#x6DF7;&#x5408;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x5F53;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; subdiffraction &#x53F7;&#x51B3;&#x8BAE;&#x540E;&#x523A;&#x6FC0;&#x6392;&#x653E;&#x6D88;&#x8017; (&#x5F97;&#x94A2;) &#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x6269;&#x6563;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x6307;&#x51FA;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E0E; pH &#x654F;&#x611F;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (pHluorin)&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A;&#x672C;&#x673A;&#x548C; pHluorin &#x6807;&#x8BB0;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x819C;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x672C;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x805A;&#x96C6;&#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#xFF0C;&#x662F;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x88AB;&#x5206;&#x6563;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6DF7;&#x5408;&#x5F88;&#x5C11;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E0B;&#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x7684;&#x96C6;&#x7FA4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x51E0;&#x4E2A; pHluorin &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x90A3;&#x4E48;&#x96C6;&#x6210;&#x5728;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3002;

&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x56DE;&#x6536;&#x540E;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x6DF7;&#x7528;&#x3002;

Synaptic vesicles recycle repeatedly in order to maintain synaptic transmission. We have previously proposed that upon exocytosis the vesicle components persist as clusters, which would be endocytosed as whole units. It has also been proposed that the vesicle components diffuse into the plasma membrane and are then randomly gathered into new vesicles. We found here that while strong stimulation (releasing the entire recycling pool) causes the diffusion of the vesicle marker synaptotagmin out of synaptic boutons, moderate stimulation (releasing approximately 19% of all vesicles) is followed by no measurable diffusion. In agreement with this observation, synaptotagmin molecules labeled with different fluorescently tagged antibodies did not appear to mix upon vesicle recycling, when investigated by subdiffraction resolution stimulated emission depletion (STED) microscopy. Finally, as protein diffusion from vesicles has been mainly observed using molecules tagged with pH-sensitive green fluorescent protein (pHluorin), we have also investigated the membrane patterning of several native and pHluorin-tagged proteins. While the native proteins had a clustered distribution, the GFP-tagged ones were diffused in the plasma membrane. We conclude that synaptic vesicle components intermix little, at least under moderate stimulation, possibly because of the formation of clusters in the plasma membrane. We suggest that several pHluorin-tagged vesicle proteins are less well integrated in clusters.

Limited intermixing of synaptic vesicle components upon vesicle recycling.

Les v&#xE9;sicules synaptiques recycler &#xE0; plusieurs reprises afin de maintenir la transmission synaptique. Nous avons d&#xE9;j&#xE0; propos&#xE9; que, lors de l&#x26;#39;exocytose des composants des v&#xE9;sicules persistent comme des grappes, ce qui serait endocytose comme des unit&#xE9;s enti&#xE8;res. Il a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; que les composants des v&#xE9;sicules se diffuser dans la membrane plasmique et sont ensuite rassembl&#xE9;s au hasard dans des v&#xE9;sicules de nouvelles. Nous avons trouv&#xE9; ici que tandis que la stimulation forte (la lib&#xE9;ration de la piscine de recyclage complet) provoque la diffusion du marqueur v&#xE9;sicule synaptotagmine de boutons synaptiques, la stimulation mod&#xE9;r&#xE9;e (lib&#xE9;rant environ 19% de l&#x26;#39;ensemble des v&#xE9;sicules) est suivie d&#x26;#39;aucune diffusion mesurable. En accord avec cette observation, les mol&#xE9;cules marqu&#xE9;es avec diff&#xE9;rents synaptotagmine anticorps marqu&#xE9;es par fluorescence ne semble pas se m&#xE9;langer sur le recyclage des v&#xE9;sicules, quand une enqu&#xEA;te par la r&#xE9;solution subdiffraction &#xE9;mission stimul&#xE9;e appauvrissement de la couche (STED) microscopie. Enfin, comme la diffusion de la prot&#xE9;ine &#xE0; partir de v&#xE9;sicules a &#xE9;t&#xE9; principalement observ&#xE9;e en utilisant des mol&#xE9;cules marqu&#xE9;es avec un pH-sensibles prot&#xE9;ine fluorescente verte (pHluorin), nous avons &#xE9;galement &#xE9;tudi&#xE9; la structuration de la membrane native de plusieurs prot&#xE9;ines et pHluorin-&#xE9;tiquet&#xE9;s. Alors que les prot&#xE9;ines natives avait une distribution en cluster, les GFP-marqu&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; diffus&#xE9;es dans la membrane plasmique. Nous concluons que la v&#xE9;sicule synaptique composants se m&#xE9;langent peu, du moins dans la stimulation mod&#xE9;r&#xE9;e, probablement en raison de la formation de grappes dans la membrane plasmique. Nous sugg&#xE9;rons que plusieurs pHluorin-&#xE9;tiquet&#xE9; prot&#xE9;ines des v&#xE9;sicules sont moins bien int&#xE9;gr&#xE9;s dans les clusters.

Brassage limit&#xE9; de composants des v&#xE9;sicules synaptiques Sur le recyclage des v&#xE9;sicules

Synaptische Vesikel, recyceln wiederholt um synaptische &Uuml;bertragung zu erhalten. Zuvor haben wir vorgeschlagen, dass bei der Exozytose die Vesikel-Komponenten als Cluster beibehalten, die Endocytosed als ganze Einheiten sein w&uuml;rde. Es wurde auch vorgeschlagen, dass die Komponenten Vesikel in die Plasmamembran diffundieren und dann nach dem Zufallsprinzip zu neuen Bl&auml;schen werden. Wir fanden hier, dass zwar starke Stimulierung (Freigabe das gesamte recycling Pool) f&uuml;hrt dazu, die Verbreitung der Vesikel Markierung Synaptotagmin aus synaptischen Bottoni dass, moderate Stimulierung (Freigabe von etwa 19 % der alle Bl&auml;schen) keine messbare Verbreitung folgt. Im Einvernehmen mit dieser Feststellung erscheint Synaptotagmin Molek&uuml;le mit verschiedenen Leuchtstoff markierte Antik&ouml;rper beschriftet nicht auf des Vesicle recycling, wenn von Subdiffraction Aufl&ouml;sung untersucht mischen Emission Depletion (STED) Mikroskopie stimuliert. Wie Protein Verbreitung von Bl&auml;schen vor allem festgestellt wurde mit Molek&uuml;len, die mit pH-Sensitive gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (pHluorin), haben wir schlie&szlig;lich auch die Membran-Musterung mehrere native und pHluorin-getaggten Proteine untersucht. W&auml;hrend der native Proteine eine gruppierte Verteilung hatte, wurden die GFP markiert, die in der Plasmamembran verbreitet. Wir schlie&szlig;en, dass synaptische Vesikel Komponenten wenig, zumindest unter moderaten Stimulierung, m&ouml;glicherweise wegen der Bildung von Clustern in der Plasmamembran vermischen. Wir schlagen vor, dass mehrere pHluorin-Tags Vesikel Proteine weniger gut in Clustern integriert sind.

Begrenzte Durchmischung synaptische Vesikel-Komponenten auf die Vesikel Wiederverwertung.

Le vescicole sinaptiche riciclano ripetutamente al fine di mantenere la trasmissione sinaptica. In precedenza abbiamo proposto che su esocitosi che i componenti della vescicola persistono come cluster, che sarebbe endocytosed come unit&agrave; intere. Inoltre &egrave; stato proposto che i componenti della vescicola diffondono nella membrana plasmatica e quindi sono casualmente riuniti nelle nuove vescicole. Abbiamo trovato qui che mentre forte stimolazione (rilasciando l&#39;intero pool riciclaggio) provoca la diffusione della vescicola marcatore SHP2 fuori sinaptico boutons, stimolazione moderata (rilasciando circa il 19% di tutte le vescicole) &egrave; seguita da alcuna diffusione misurabili. D&#39;accordo con questa osservazione, SHP2 molecole etichettati con differenti anticorpi fluorescente contrassegnati non compare a mescolare su vescicola riciclaggio, quando indagato dalla risoluzione subdiffraction stimolato microscopia di deplezione (STED) di emissione. Infine, come diffusione di proteina da vescicole &egrave; stata osservata principalmente utilizzando molecole contrassegnati pH-sensibile green fluorescent protein (pHluorin), abbiamo studiato anche il patterning di membrana di diverse proteine native e contrassegnata con pHluorin. Mentre le proteine natali ha avuto una distribuzione in cluster, GFP-etichettato quelli erano diffusi nella membrana del plasma. Concludiamo che componenti della vescicola sinaptica intermix poco, almeno sotto stimolazione moderata, forse a causa della formazione di cluster nella membrana del plasma. Suggeriamo che diverse proteine della vescicola pHluorin-contrassegnati sono meno ben integrate nel cluster.

Limitata mescolanza di componenti della vescicola sinaptica al riciclaggio della vescicola.

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x5358;&#x4F4D;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E2D;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306B;&#x96C6;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5F37;&#x3044;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#xFF08;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#xFF09;synaptic bouton&#x306E;&#x3001;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF08;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x7D04;19&#xFF05;&#x3092;&#x653E;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#xFF09;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x62E1;&#x6563;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x6297;&#x4F53;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;subdiffraction&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x8A98;&#x5C0E;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#xFF08;STED&#xFF09;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x6642;&#x306B;&#x6DF7;&#x305C;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E3B;&#x306B;pH&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;pHluorin&#xFF09;&#x3067;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;pHluorin&#x30BF;&#x30B0;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;GFP&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x5185;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x4E2D;&#x7B49;&#x5EA6;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6DF7;&#x5728;&#x5C11;&#x3057;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;pHluorin&#x30BF;&#x30B0;&#x306E;&#x4ED8;&#x3044;&#x305F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306B;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x969B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6DF7;&#x6676;

&#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xADF8; exocytosis &#xAE30; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0;, &#xB530;&#xB77C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; endocytosed &#xC804;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;&#xB85C; &#xC218;&#xC9D1;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC15;&#xD55C; &#xC790;&#xADF9; (&#xC804;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xD480; &#xD574;&#xC81C;) &#xD558;&#xBA74; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; boutons &#xC911; &#xAE30; &#xB9C8;&#xCEE4; synaptotagmin&#xC758; &#xBCF4;&#xAE09;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xC790;&#xADF9; (&#xD574;&#xC81C; &#xBAA8;&#xB4E0; vesicles&#xC758; &#xC57D; 19%)&#xC744; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCF4;&#xAE09; &#xD558; &#xC5EC; &#xB4A4; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774; &#xAD00;&#xCC30;&#xACFC; &#xACC4;&#xC57D; &#xB2E4;&#xB978; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; synaptotagmin &#xBD84;&#xC790; &#xAE30; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;, subdiffraction &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD63C;&#xD569; &#xC790;&#xADF9; &#xBC29;&#xCD9C; &#xACE0;&#xAC08; (STED) &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC18C;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xAE09; &#xBD84;&#xC790; Ph&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (pHluorin)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xB294;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBC0F; pHluorin &#xD0DC;&#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB9C9; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD588;&#xB2E4;, GFP &#xD0DC;&#xADF8; &#xB4E4; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xD63C;&#xD569;&#xD560; &#xAF2C;&#xB9C8;, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xACB0;&#xB860;. &#xC5EC;&#xB7EC; pHluorin &#xD0DC;&#xADF8; &#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB35C; &#xC798; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xAE30; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xC2DC;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xACFC; &#xC81C;&#xD55C;.

Las ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas reciclar repetidamente a fin de mantener la transmisi&#xF3;n sin&#xE1;ptica. Hemos propuesto previamente que al exocitosis los componentes ves&#xED;cula persisten como racimos, que se eucariota como unidades completas. Tambi&#xE9;n se ha propuesto que los componentes de ves&#xED;culas se difunden en la membrana plasm&#xE1;tica y luego se reunieron al azar en ves&#xED;culas nuevas. Encontramos aqu&#xED; que mientras que la estimulaci&#xF3;n fuerte (la liberaci&#xF3;n de la piscina de reciclaje de todo) hace que la difusi&#xF3;n de la marca de ves&#xED;culas sinaptotagmina de botones sin&#xE1;pticos, la estimulaci&#xF3;n moderada (la liberaci&#xF3;n de aproximadamente el 19% de todas las ves&#xED;culas) es seguida por ninguna difusi&#xF3;n mensurable. De acuerdo con esta observaci&#xF3;n, las mol&#xE9;culas de sinaptotagmina marcados con diferentes anticuerpos marcado con fluorescencia no apareci&#xF3; para mezclar al reciclaje de ves&#xED;culas, cuando se investigan por el agotamiento de subdiffraction resoluci&#xF3;n de la emisi&#xF3;n estimulada (STED) microscop&#xED;a. Por &#xFA;ltimo, como la difusi&#xF3;n de la prote&#xED;na de las ves&#xED;culas se ha observado principalmente el uso de mol&#xE9;culas marcadas con un pH sensible a la prote&#xED;na verde fluorescente (pHluorin), tambi&#xE9;n hemos investigado el patr&#xF3;n de la membrana de las prote&#xED;nas nativas y varias pHluorin-etiquetados. Mientras que las prote&#xED;nas nativas ten&#xED;an una distribuci&#xF3;n agrupada, las buenas pr&#xE1;cticas agrarias de etiquetado se difundieron en la membrana plasm&#xE1;tica. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que la ves&#xED;cula sin&#xE1;ptica se entremezclan los componentes de poco, al menos en la estimulaci&#xF3;n moderada, posiblemente debido a la formaci&#xF3;n de clusters en la membrana plasm&#xE1;tica. Se sugiere que varios pHluorin-etiquetados prote&#xED;nas de ves&#xED;culas no est&#xE1;n tan bien integrados en grupos.

Entremezcla limitado de componentes de las ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas Al reciclaje de ves&#xED;culas

&#x5728;&#x8111;&#x5185;&#x9ED1;&#x8D28;&#x81F4;&#x5BC6;&#x5E26;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53CA;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;Tgfbeta &#x548C; Gdnf &#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;Haploinsufficiency Tgfbeta &#x6216; Gdnf &#x5BFC;&#x81F4;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x8D64;&#x5B57;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x5206;&#x6790;&#x9ED1;&#x8D28;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8001;&#x5E74; Tgfbeta2 (+ /-) / (+ /-&#xFF09; &#x53CC;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20; Gdnf&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x5339;&#x914D;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9ED1;&#x8D28;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x6709;&#x7684;&#x8111; TH &#x9633;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x82A8; (+ /-) Tgfbeta2 TH &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x6027;&#x7684;&#x5149;&#x5B66;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x53D8;&#x5316; / Gdnf (+ /-&#xFF09; &#x53CC;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x53CA;&#x5176;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269; dihydroxyphenylacetic &#x9178;&#x548C; homovanillic &#x9178;&#x6C34;&#x5E73;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8054;&#x5408;&#x7684; haploinsufficiency Tgfbeta2 &#x548C; Gdnf &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x8111; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6B63;&#x5E38;&#x8001;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x8001;&#x5E74;&#x7684; Tgfbeta2/Gdnf &#x53CC;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9ED1;&#x8D28;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x65E0;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

Loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta and the resulting decrease in striatal dopamine levels are the hallmarks of Parkinson's disease. Tgfbeta and Gdnf have been identified as neurotrophic factors for dopaminergic midbrain neurons in vivo and in vitro. Haploinsufficiency for either Tgfbeta or Gdnf led to dopaminergic deficits. In this study we therefore analyzed the nigrostriatal system of aged Tgfbeta2 (+/-)/Gdnf (+/-) double-heterozygous mice. Unexpectedly, we found no morphological changes in the nigrostriatal system as compared with age-matched wild-type mice. There were no significant differences in the number of TH-positive midbrain neurons and no changes in the optical density of TH immunoreactivity in striata of Tgfbeta2 (+/-)/Gdnf (+/-) double-heterozygous mice. Moreover, we found no significant differences in the striatal levels of dopamine and its metabolites dihydroxyphenylacetic acid and homovanillic acid. Our results indicate that a combined haploinsufficiency for Tgfbeta2 and Gdnf has no impact on the function and the survival of midbrain DA neurons under normal aging conditions.

Aged Tgfbeta2/Gdnf double-heterozygous mice show no morphological and functional alterations in the nigrostriatal system.

Perte de neurones dopaminergiques dans la substantia nigra pars compacta et la diminution des niveaux de dopamine striatale qui en r&eacute;sulte sont les ma&icirc;tres mots de la maladie de Parkinson. TGF et Gdnf ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s comme facteurs neurotrophiques pour les neurones dopaminergiques m&eacute;senc&eacute;phale in vivo et in vitro. Sim1 TGF ou Gdnf conduit &agrave; des d&eacute;ficits dopaminergique. Dans cette &eacute;tude, nous avons donc analys&eacute; le syst&egrave;me sont de Tgfbeta2 ans (+/-) / Gdnf (souris doubles-h&eacute;t&eacute;rozygotes +/-). Contre toute attente, nous avons ne constat&eacute; aucun changement morphologique du syst&egrave;me sont comparativement aux souris de type sauvage de m&ecirc;me &acirc;ge. Il n&#39;y a aucune diff&eacute;rence significative du nombre de neurones du m&eacute;senc&eacute;phale TH-positif et pas de changements dans la densit&eacute; optique de l&#39;immunor&eacute;activit&eacute; de TH dans striata de Tgfbeta2 (+/-) / Gdnf (souris doubles-h&eacute;t&eacute;rozygotes +/-). En outre, nous avons ne trouv&eacute; aucune diff&eacute;rence significative dans les niveaux striatal de dopamine et son acide dihydroxyph&eacute;nylac&eacute;tique m&eacute;tabolites et acide homovanillique. Nos r&eacute;sultats indiquent qu&#39;un combin&eacute; Sim1 pour Tgfbeta2 et Gdnf n&#39;a aucun impact sur la fonction et la survie des neurones dopaminergiques m&eacute;senc&eacute;phale dans des conditions de vieillissement normal.

Les souris h&eacute;t&eacute;rozygotes-doubles Tgfbeta2/Gdnf &acirc;g&eacute;es ne montrent aucune alt&eacute;ration morphologique et fonctionnelle du syst&egrave;me sont.

Verlust der dopaminergen Neuronen in der Substantia Nigra Pars Compacta und der daraus resultierende R&uuml;ckgang der Striatale Dopamin Niveaus sind die Markenzeichen der Parkinson-Krankheit. TGFbeta und Gdnf wurden als Neurotrophic Faktoren f&uuml;r dopaminergen Mittelhirn Neuronen in-vivo und in vitro. Haploinsuffizienz f&uuml;r Tgfbeta oder Gdnf f&uuml;hrte zu dopaminergen Defizite. In dieser Studie haben wir deshalb das Nigrostriatal System der alten Tgfbeta2 (+/-) analysiert / Gdnf (+/-) Doppel-heterozygote M&auml;use. Unerwartet fanden wir keine morphologischen Ver&auml;nderungen im Nigrostriatal System im Vergleich zu Wildtyp-M&auml;usen altersbezogenen. Es gab keine signifikanten Unterschiede in der Anzahl der TH-positivem Mittelhirn Nervenzellen und keine &Auml;nderungen in die optische Dichte der TH Immunoreactivity in Striata von Tgfbeta2 (+/-) / Gdnf (+/-) Doppel-heterozygote M&auml;use. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir keine signifikanten Unterschiede im Niveau Striatale Dopamin und seiner Metaboliten Dihydroxyphenylacetic S&auml;ure und Homovanillins&auml;ure. Unsere Ergebnisse zeigen, dass eine kombinierte Haploinsuffizienz f&uuml;r Tgfbeta2 und Gdnf keinen Einfluss auf die Funktion und das &Uuml;berleben von Mittelhirn DA Neuronen unter normalen Alterungsprozess Bedingungen hat.

Im Alter von Tgfbeta2/Gdnf Doppel-heterozygote M&auml;use zeigen keine morphologischen und funktionellen Ver&auml;nderungen im Nigrostriatal System.

Perdita di Neuroni dopaminergici della substantia nigra pars compacta e la conseguente diminuzione nei livelli di striatal della dopamina sono i tratti distintivi della malattia di Parkinson. TGFbeta e Gdnf sono stati identificati come fattori neurotrofici per i neuroni dopaminergici di mesencefalo in vivo e in vitro. Aploinsufficienza per Tgfbeta o Gdnf ha condotto ai deficit dopaminergico. In questo studio abbiamo analizzato quindi il sistema Sonografia dell&#39;et&agrave; Tgfbeta2 (+ /-) / Gdnf (+ /-) double-eterozigoti topi. Inaspettatamente, abbiamo non trovato nessun cambiamenti morfologici nel sistema Sonografia rispetto ai topi wild-type age-matched. Non c&#39;erano differenze significative nel numero di neuroni mesencefalo TH-positivo e nessun cambiamento nella densit&agrave; ottica di immunoreattivit&agrave; TH in striata di Tgfbeta2 (+ /-) / Gdnf (+ /-) double-eterozigoti topi. Inoltre, abbiamo trovato differenze significative nei livelli di striatal della dopamina e suoi metaboliti dihydroxyphenylacetic acido e Acido omovanilico. I nostri risultati indicano che un combinato aploinsufficienza per Tgfbeta2 e Gdnf non ha alcun impatto sulla funzione e la sopravvivenza dei neuroni DA mesencefalo in condizioni di normale invecchiamento.

Et&agrave; Tgfbeta2/Gdnf doppio eterozigoti topi non mostrano alterazioni morfologiche e funzionali del sistema Sonografia.

&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x9ED2;&#x8CEA;&#x7DFB;&#x5BC6;&#x3068;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Tgf &beta; &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x3068; Gdnf &#x4E2D;&#x8133;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; in vivo &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vitro &#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Tgf &beta; &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; Gdnf &#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; &#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x8D64;&#x5B57;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7DDA;&#x6761;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005;&#x306E; Tgfbeta2 (+/-) &#x306E;&#x5206;&#x6790;/Gdnf (+/-) &#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002;&#x7A81;&#x7136;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x7DDA;&#x6761;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5E74;&#x9F62;&#x3092;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;TH &#x967D;&#x6027;&#x4E2D;&#x8133;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x3068;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x4E0E;&#x3048;, Tgfbeta2 (+/-) &#x306E; TH &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5149;&#x5B66;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;/Gdnf (+/-) &#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269; dihydroxyphenylacetic &#x9162;&#x9178;&#x3001;&#x30DB;&#x30E2;&#x30D0;&#x30CB;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x8907;&#x5408;&#x306E;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; Tgfbeta2 &#x3068; Gdnf &#x95A2;&#x6570;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E2D;&#x8133; DA &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x8001;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005; Tgfbeta2/Gdnf &#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; &#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x6761;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

Substantia nigra &#xAC08; &#xAC70; &#xC608;&#xC694; compacta&#xC5D0;&#xC11C; dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; striatal &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tgfbeta &#xBC0F; Gdnf dopaminergic midbrain &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; neurotrophic &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Haploinsufficiency Tgfbeta &#xB610;&#xB294; Gdnf dopaminergic &#xC801;&#xC790;&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC138; Tgfbeta2 (+)&#xC758; nigrostriatal &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBD84;&#xC11D; / Gdnf (+) &#xC774;&#xC911; heterozygous &#xC950;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xC774; &#xBE44;&#xD574; nigrostriatal &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC;. TH &#xC591;&#xC131; midbrain &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; Tgfbeta2 (+)&#xC758; striata&#xC5D0;&#xC11C; immunoreactivity TH&#xC758; &#xAD11;&#xD559; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xC5C6;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4; / Gdnf (+) &#xC774;&#xC911; heterozygous &#xC950;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC0F; metabolites dihydroxyphenylacetic &#xC0B0; homovanillic &#xC0B0;&#xC758; striatal &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xD070; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; haploinsufficiency Tgfbeta2 &#xBC0F; Gdnf&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB178;&#xD654; &#xC870;&#xAC74; midbrain DA &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138; Tgfbeta2/Gdnf &#xB354;&#xBE14; heterozygous &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; nigrostriatal &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

P&eacute;rdida de neuronas dopamin&eacute;rgicas en la sustancia negra pars compacta y la disminuci&oacute;n en los niveles de dopamina estriatal son las caracter&iacute;sticas distintivas de la enfermedad de Parkinson. TGFbeta y Gdnf han sido identificados como factores neurotr&oacute;ficos para las neuronas dopamin&eacute;rgicas del mesenc&eacute;falo in vivo e in vitro. Haploinsufficiency para Tgfbeta o Gdnf condujo a d&eacute;ficit dopamin&eacute;rgico. En este estudio hemos analizado por lo tanto el sistema nigrostriatal de Tgfbeta2 envejecido (+/-) / Gdnf (+/-) dobles heterozig&oacute;ticos ratones. Inesperadamente, no se encontraron cambios morfol&oacute;gicos en el sistema nigrostriatal en comparaci&oacute;n con los ratones de tipo salvaje de edad comparable. Hubo diferencias significativas en el n&uacute;mero de neuronas del cerebro medio de TH-positivo y sin cambios en la densidad &oacute;ptica de la inmunoreactividad de TH en striata de Tgfbeta2 (+/-) / Gdnf (+/-) dobles heterozig&oacute;ticos ratones. Adem&aacute;s, se encontraron diferencias significativas en los niveles de dopamina y sus metabolitos dihydroxyphenylacetic &aacute;cido y &Aacute;cido homovan&iacute;lico de estriado. Nuestros resultados indican que un combinado haploinsufficiency para Tgfbeta2 y Gdnf no tiene ning&uacute;n impacto en la funci&oacute;n y la supervivencia de las neuronas de DA del midbrain bajo condiciones de envejecimiento normal.

De Tgfbeta2/Gdnf dobles heterozig&oacute;ticos ratones no muestran alteraciones morfol&oacute;gicas y funcionales en el sistema nigroestriatal.

&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D; (DAT) &#x4ECB;&#x5BFC;&#x8BB8;&#x591A;&#x8111;&#x533A;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x7684;&#x6444;&#x53D6;&#x548C;&#x66FE;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x9ED1;&#x8D28;&#x5E15;&#x5C14;&#x7F51;&#x8109;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x6B64;&#x7248;&#x672C;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x5E95;&#x8282;&#x8F93;&#x51FA;&#x548C;&#x7535;&#x673A;&#x6027;&#x80FD;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x7531;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x4E18;&#x8111;&#x5E95; afferents &#x89E6;&#x53D1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B; &#xFF08;G(q)-coupled) &#x7B2C;&#x4E00;&#x7EC4;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x53D1;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x5185;&#x9ED1;&#x8D28;&#x5E15;&#x5C14;&#x7F51;&#x8109;&#x7247;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x91CA;&#x653E;&#x7531;&#x5B89;&#x57F9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x6291;&#x5236; DAT &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x3002;&#x5728; DAT &#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#xFF0C;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; G (q)-&#x8026;&#x5408;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x91CA;&#x653E;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x6291;&#x5236; DAT &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8303;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC) &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x548C;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;G (q)-&#x8026;&#x5408;&#x53D7;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F; DAT &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#x901A;&#x8FC7; PKC&#xFF0C;&#x548C;&#x7531; PKC &#x4ECB;&#x5BFC; DAT &#x7248;&#x672C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x63D0;&#x4F9B;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6BD2;&#x8548;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x548C; PKC &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E5F;&#x5F15;&#x8D77;&#x4ECE;&#x8868;&#x793A;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x8F6C;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8111;&#x5730;&#x533A;&#x8FD0;&#x8F93;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;

PKC &#x94FE;&#x63A5;&#x5230; DAT &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#x7684; Gq &#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;

The dopamine transporter (DAT) mediates dopamine uptake in many brain areas and has been suggested to underlie dopamine release in the substantia nigra pars reticulata. This release modulates basal ganglia output and motor performance. It is triggered by glutamatergic subthalamic afferents. We show here that activation of (G(q)-coupled) group I metabotropic glutamate receptors are sufficient to induce dopamine release in rat substantia nigra pars reticulata slices. Release was measured by amperometry and inhibited by a DAT antagonist. In a DAT-expressing cell line, dopamine release could be induced by activation of G(q)-coupled muscarinic receptors. Release was measured by HPLC and inhibited by a DAT antagonist. In both paradigms, activation of protein kinase C (PKC) was necessary and sufficient for dopamine release, suggesting that G(q)-coupled receptors can induce DAT-mediated dopamine release through PKC, and providing a physiological role for the known regulation of DAT-mediated release by PKC. Activation of muscarinic receptors and PKC also induced release from a cell line expressing the norepinephrine transporter, suggesting that transport-mediated release might be relevant in further brain areas.

PKC links Gq-coupled receptors to DAT-mediated dopamine release.

Le transporteur de la dopamine (DAT) intervient dans la captation de la dopamine dans de nombreuses r&eacute;gions du cerveau et a sugg&eacute;r&eacute; &agrave; la base de la lib&eacute;ration de dopamine dans la substantia nigra pars reticulata. Cette version module de sortie de noyaux gris centraux et de la performance motrice. Elle est d&eacute;clench&eacute;e par les aff&eacute;rences sous-thalamique glutamatergique. Nous montrons ici que l&#39;activation des (G(q)-coupled) Groupe I metabotropic r&eacute;cepteurs de glutamate sont suffisants pour induire la lib&eacute;ration de dopamine dans la substantia nigra pars reticulata tranches de rat. Version a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e par amp&eacute;rom&eacute;trie et inhib&eacute;e par un antagoniste de la DAT. Dans une lign&eacute;e de cellules exprimant le DAT, la lib&eacute;ration de dopamine pourrait &ecirc;tre induite par l&#39;activation de G (q)-coupl&eacute; des r&eacute;cepteurs muscariniques. Version a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e par HPLC et inhib&eacute;e par un antagoniste de la DAT. Dans les deux paradigmes, activation de la prot&eacute;ine kinase C (PKC) &eacute;tait n&eacute;cessaire et suffisant pour la lib&eacute;ration de dopamine, ce qui sugg&egrave;re que G (q)-r&eacute;cepteurs coupl&eacute;s peuvent provoquer la lib&eacute;ration de dopamine induite par le DAT par la PKC et pr&eacute;voyant un r&ocirc;le physiologique de la r&eacute;gulation connue de version DAT-m&eacute;di&eacute;e par la PKC. Activation des r&eacute;cepteurs muscariniques et PKC induit &eacute;galement la lib&eacute;ration d&#39;une lign&eacute;e de cellules exprimant le transporteur de la noradr&eacute;naline, sugg&eacute;rant que la lib&eacute;ration induite par le transport pourrait &ecirc;tre pertinente dans d&#39;autres r&eacute;gions du cerveau.

PKC relie r&eacute;cepteurs coupl&eacute;s Gq &agrave; la lib&eacute;ration de dopamine induite par le DAT.

Der Dopamin-Transporter (DAT) vermittelt Dopamin Aufnahme in vielen Bereichen des Gehirns und ist vorgeschlagen worden, um die Dopamin-Freisetzung in der Substantia Nigra Pars Reticulata zugrunde liegen. Diese Version moduliert Basalganglien-Output und motor. Es wird durch Glutamat-subthalamischen-afferenten ausgel&ouml;st. Wir zeigen hier, dass die Aktivierung des (G(q)-coupled) Gruppe I Metabotropic Glutamatrezeptoren sind ausreichend, um die Dopamin-Freisetzung in Ratte Substantia Nigra Pars Reticulata Scheiben zu induzieren. Release wurde durch Amperometry gemessen und durch eine DAT-Antagonist gehemmt. In eine DAT-Ausdr&uuml;cken-Zelllinie Dopamin-Freisetzung durch Aktivierung von G (Q) induziert werden konnte-gekoppelte muskarinische Rezeptoren. Release wurde durch HPLC gemessen und durch eine DAT-Antagonist gehemmt. In beiden Paradigmen, Aktivierung der Proteinkinase C (PKC) war notwendig und ausreichend f&uuml;r Dopamin-Release, darauf hindeutet, dass G (Q)-gekoppelte Rezeptoren Dopamin DAT-vermittelte Freisetzung durch PKC, und eine physiologische Rolle f&uuml;r die bekannte Regelung der DAT-vermittelte Freisetzung von PKC induzieren k&ouml;nnen. Aktivierung von muskarinische Rezeptoren und PKC induziert auch Entlassung aus einer Zelllinie, die Ausdruck des Noradrenalin-Transporter, die darauf hindeutet, dass Transport-vermittelte Freisetzung in weitere Hirnareale relevant sein k&ouml;nnten.

PKC verbindet Gq-gekoppelte Rezeptoren Dopamin DAT-vermittelte Freisetzung.

Il trasportatore della dopamina (DAT) da intermediario uptake di dopamina in molte aree del cervello ed &egrave; stato suggerito a sottendono il rilascio di dopamina nella substantia nigra pars reticulata. Questa release modula output dei gangli della base e le prestazioni di motore. Si &egrave; innescato da afferenze subtalamico glutamatergico. Mostriamo qui tale attivazione di (G(q)-coupled) gruppo I metabotropic glutammato ricevitori sono sufficienti per indurre il rilascio di dopamina nel ratto substantia nigra pars reticulata fette. Rilascio &egrave; stato misurato da amperometria e inibito da un antagonista DAT. In una linea cellulare che esprime DAT, rilascio di dopamina potrebbe essere indotta da attivazione di G (q)-accoppiato i recettori muscarinici. Rilascio &egrave; stato misurato mediante HPLC e inibito da un antagonista DAT. In entrambi i paradigmi, attivazione della protein chinasi C (PKC) era necessaria e sufficiente per il rilascio di dopamina, suggerendo che G (q)-recettori accoppiati possono indurre il rilascio di dopamina DAT-mediata attraverso PKC e fornendo un ruolo fisiologico per il noto regolamento del rilascio-DAT-mediata da PKC. Attivazione dei recettori muscarinici e PKC indotta anche comunicato da una linea cellulare che esprime il trasportatore della noradrenalina, suggerendo che trasporto mediato rilascio potrebbe essere rilevante in altre aree del cervello.

PKC link recettori accoppiati Gq al rilascio di dopamina DAT-mediata.

&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; (DAT) &#x8133;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x8133; pars &#x30EC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x5927;&#x8133;&#x57FA;&#x5E95;&#x6838;&#x51FA;&#x529B;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x8996;&#x5E8A;&#x795E;&#x7D4C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059; (G(q)-coupled) &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; I &#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x4E2D;&#x8133; pars &#x30EC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x3002;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;DAT &#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x3067;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DAT &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x884C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3092; G (q) &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;-&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; HPLC &#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3001;DAT &#x62EE;&#x6297;&#x3067;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C (PKC) &#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x304B;&#x3064;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; G (q)-&#x7D50;&#x5408;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;PKC, &#x3068;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306E; DAT &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; PKC &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; DAT &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073; PKC &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3082;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8133;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

PKC Gq &#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F; DAT &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC804;&#xC1A1; (DAT) &#xB9CE;&#xC740; &#xB450;&#xB1CC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xAE00;&#xADC0;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C; substantia nigra &#xAC08; &#xAC70; &#xC608;&#xC694; reticulata&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC870; &#xAE30;&#xC800; ganglia &#xCD9C;&#xB825;&#xACFC; &#xBAA8;&#xD130; &#xC131;&#xB2A5;. Glutamatergic &#xC2DC;&#xC0C1; afferents&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; (G(q)-coupled) I metabotropic &#xC870; glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC950; substantia nigra &#xAC08; &#xAC70; &#xC608;&#xC694; reticulata &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB294; amperometry&#xB85C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; DAT &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574;. DAT &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C; G (q)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC218;-muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xACB0;&#xD569;. &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB294; HPLC&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; DAT &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574;. &#xB450; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;, &#xADF8; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; G (q)-&#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; PKC, PKC, DAT &#xC911;&#xC7AC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; DAT &#xC911;&#xC7AC; &#xB41C; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; muscarinic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; PKC&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC790;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911;&#xC7AC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xCD94;&#xAC00; &#xB1CC; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB420; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; norepinephrine &#xC804;&#xC1A1; &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xB2E4;.

PKC DAT &#xC911;&#xC7AC; &#xB41C; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBC29;&#xCD9C; Gq &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El transportador de dopamina (DAT) interviene en la absorci&oacute;n de la dopamina en muchas &aacute;reas del cerebro y se ha sugerido que subyacen a la liberaci&oacute;n de dopamina en la sustancia negra pars reticulata. Esta versi&oacute;n modula la salida de los ganglios basales y el rendimiento del motor. Es accionada por aferentes subtal&aacute;mico glutamat&eacute;rgica. Aqu&iacute; mostramos que la activaci&oacute;n de (G(q)-coupled) Grupo I metabotr&oacute;picos receptores de glutamato son suficientes para inducir la liberaci&oacute;n de dopamina en ratas substantia nigra pars reticulata rebanadas. Liberaci&oacute;n se midi&oacute; por Amperometr&iacute;a e inhibida por un antagonista DAT. En una l&iacute;nea celular DAT-expresi&oacute;n, liberaci&oacute;n de dopamina podr&iacute;a ser inducida por activaci&oacute;n de G (q)-junto a los receptores muscar&iacute;nicos. Liberaci&oacute;n se midi&oacute; por HPLC e inhibida por un antagonista DAT. En ambos paradigmas, activaci&oacute;n de la prote&iacute;na quinasa C (PKC) era necesaria y suficiente para la liberaci&oacute;n de dopamina, lo que sugiere que G (q)-receptores acoplados pueden inducir la liberaci&oacute;n de dopamina DAT-mediada a trav&eacute;s de PKC y prev&eacute;n un papel fisiol&oacute;gico de la regulaci&oacute;n conocida de liberaci&oacute;n DAT-mediada por PKC. Activaci&oacute;n de los receptores muscar&iacute;nicos y PKC hab&iacute;a inducida tambi&eacute;n el lanzamiento de una l&iacute;nea de c&eacute;lulas que expresan el transportador de norepinefrina, sugiriendo que liberaci&oacute;n mediada por transporte podr&iacute;a ser relevante en otras &aacute;reas del cerebro.

PKC enlaces receptores acoplados a Gq a la liberaci&oacute;n de dopamina DAT-mediada.

&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C; &#xFF08;&#x80DE;&#xFF09; &#x5B9E;&#x73B0;&#x7684;&#x3002;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7136;&#x540E;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C; &#xFF08;&#x541E;&#xFF09; &#x4E2D;&#x68C0;&#x7D22;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x5047;&#x8BBE; 3 &#x591A;&#x5E74;&#x524D; endosomes &#x5728;&#x56CA;&#x6CE1;&#x56DE;&#x6536;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6784;&#x6210;&#x6162;&#x541E;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5728;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E4B;&#x540E;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x6B64;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x65B0; endocytosed &#x56CA;&#x6CE1;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x4E0E; endosome &#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F; &#xFF08;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF09; &#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x82BD;&#x80DE;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x6C34;&#x6CE1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5206;&#x6790;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3001; &#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2; &#xFF08;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F53;) &#x548C;&#x53D7;&#x6FC0;&#x7684;&#x8F90;&#x5C04;&#x635F;&#x8017;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3001; &#x5149;&#x6C27;&#x5316; EM &#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5E38;&#x89C4;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x68C0;&#x6D4B; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; endosome &#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; endosomal &#x6392;&#x5E8F;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x521D;&#x59CB;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x91CA;&#x653E;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x8F7B;&#x6613;&#x900F;&#x9732;&#x7684;&#x6C60;&#x4E0A;&#x7684;&#x56DE;&#x6536;&#x5229;&#x7528;&#x3002;Endosomal &#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x6210;&#x540E;&#x541E;&#xFF0C;&#x6539;&#x53D8;&#x4E0E;&#x65B0;&#x6210;&#x7ACB;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E30;&#x5BCC;&#x3002;&#xFF08;&#x5173;&#x4E8E;&#x80DE;) &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x96C6;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E86;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; endosome&#x3002;&#x5728;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5206;&#x5F00;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x662F;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6392;&#x5E8F;/&#x840C;&#x82BD;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x53D1;&#x5C55;&#x4ECE; endosome &#x6C34;&#x6CE1;&#x3002;

Endosomal &#x6392;&#x5E8F;&#x8F7B;&#x6613;&#x900F;&#x9732;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x3002;

Neurotransmitter release is achieved through the fusion of synaptic vesicles with the neuronal plasma membrane (exocytosis). Vesicles are then retrieved from the plasma membrane (endocytosis). It was hypothesized more than 3 decades ago that endosomes participate in vesicle recycling, constituting a slow endocytosis pathway required especially after prolonged stimulation. This recycling model predicts that newly endocytosed vesicles fuse with an endosome, which sorts (organizes) the molecules and buds exocytosis-competent vesicles. We analyzed here the endosome function using hippocampal neurons, isolated nerve terminals (synaptosomes), and PC12 cells by stimulated emission depletion microscopy, photooxidation EM, and several conventional microscopy assays. Surprisingly, we found that endosomal sorting is a rapid pathway, which appeared to be involved in the recycling of the initial vesicles to be released on stimulation, the readily releasable pool. In agreement with the endosomal model, the vesicle composition changed after endocytosis, with the newly formed vesicles being enriched in plasma membrane proteins. Vesicle proteins were organized in clusters both in the plasma membrane (on exocytosis) and in the endosome. In the latter compartment, they segregated from plasma membrane components in a process that is likely important for sorting/budding of newly developed vesicles from the endosome.

Endosomal sorting of readily releasable synaptic vesicles.

La lib&#xE9;ration de neurotransmetteurs est obtenue par la fusion des v&#xE9;sicules synaptiques avec la membrane plasmique des neurones (exocytose). Les v&#xE9;sicules sont ensuite r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;es &#xE0; partir de la membrane plasmique (endocytose). Il a &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se de plus de 3 d&#xE9;cennies que les endosomes participer au recyclage des v&#xE9;sicules, constituant une voie d&#x26;#39;endocytose lent n&#xE9;cessaires, en particulier apr&#xE8;s une stimulation prolong&#xE9;e. Ce mod&#xE8;le pr&#xE9;dit que le recyclage fusible nouvellement endocytose des v&#xE9;sicules avec un endosome, qui trie (organise) les mol&#xE9;cules et les bourgeons exocytose des v&#xE9;sicules-comp&#xE9;tentes. Nous avons analys&#xE9; ici la fonction endosome utilisant neurones de l&#x26;#39;hippocampe, les terminaisons nerveuses isol&#xE9;es (synaptosomes), et les cellules PC12 par microscopie d&#x26;#39;&#xE9;mission stimul&#xE9;e &#xE9;puisement, EM photooxydation, et plusieurs essais microscopie conventionnelle. &#xC9;tonnamment, nous avons constat&#xE9; que le tri endosomal est une voie rapide, ce qui semble &#xEA;tre impliqu&#xE9; dans le recyclage des v&#xE9;sicules initiales &#xE0; &#xEA;tre lib&#xE9;r&#xE9;s sur la stimulation, la piscine facilement d&#xE9;tachable. En accord avec le mod&#xE8;le endosomal, la composition des v&#xE9;sicules chang&#xE9; apr&#xE8;s endocytose, avec les v&#xE9;sicules nouvellement form&#xE9;es &#xE9;tant enrichie en prot&#xE9;ines de la membrane plasmatique. Prot&#xE9;ines des v&#xE9;sicules ont &#xE9;t&#xE9; organis&#xE9;es en grappes &#xE0; la fois dans la membrane plasmique (sur l&#x26;#39;exocytose) et dans l&#x26;#39;endosome. Dans ce dernier compartiment, ils s&#xE9;par&#xE9;s des composants de la membrane du plasma dans un processus qui est probablement important pour le tri / bourgeonnement des v&#xE9;sicules nouvellement d&#xE9;velopp&#xE9;s &#xE0; partir de l&#x26;#39;endosome.

Le tri endosomal facilement d&#xE9;tachable v&#xE9;sicules synaptiques

Neurotransmitter-Freisetzung wird durch die Fusion der synaptischen Vesikel mit der neuronalen Plasmamembran (Exozytose) erreicht. Bl&auml;schen werden dann von der Plasmamembran (Endozytose) abgerufen. Es wurde vor mehr als 3 Jahrzehnten die Hypothese, dass sich Vesikel recycling, Endosomen an bilden einen langsamen Endozytose-Weg ben&ouml;tigt, vor allem nach l&auml;ngerer Stimulation. Dieses recycling Modell prognostiziert, dass neu Endocytosed Bl&auml;schen mit einem Endosom verschmelzen die sortiert (organisiert) die Molek&uuml;le und Knospen Exozytose-zust&auml;ndigen Vesicles. Wir analysierten hier die Endosom-Funktion mithilfe von Neuronen, isolierte Nervenenden (Synaptosomes) und PC12 Zellen durch stimulierte Emission Depletion Microscopy, Photooxidation EM und mehrere konventioneller Mikroskopie-Proben. &Uuml;berraschenderweise fanden wir, dass Endosomen sortieren einen schnellen Weg ist, die das recycling von der anf&auml;nglichen Bl&auml;schen &uuml;ber Stimulation, leicht l&ouml;sbare Pool freigegeben werden beteiligt zu sein schien. Im Einvernehmen mit den Endosomen-Modell &auml;nderte sich die Vesikel-Zusammensetzung nach Endozytose, mit der neu gebildeten Bl&auml;schen wird angereichertes Plasma Membranproteine. Vesikel-Proteine in Clustern sowohl in der Plasmamembran (auf Exozytose) organisiert und in das Endosom. Im letzteren Fach, sie getrennt von Plasmamembran Komponenten in einem Prozess, der wahrscheinlich ist wichtig f&uuml;r die Sortierung/Knospen von neu entwickelten Bl&auml;schen aus dem Endosom.

Endosomen Sortierung leicht l&ouml;sbare synaptische Vesikel.

Rilascio di neurotrasmettitore &egrave; ottenuta attraverso la fusione delle vescicole sinaptiche con la membrana plasmatica neuronale (esocitosi). Le vescicole sono poi estratto dalla membrana del plasma (endocitosi). &Egrave; stato ipotizzato pi&ugrave; di 3 decenni fa che endosomes partecipare vescicola di riciclaggio, che costituiscono un percorso lento endocitosi necessario soprattutto dopo stimolazione prolungata. Questo modello di riciclaggio predice che appena le vescicole endocytosed fusibile con un endosoma, che ordina (organizza) le vescicole di esocitosi-competente molecole e germogli. Abbiamo analizzato qui la funzione endosoma usando neuroni hippocampal, terminali nervose isolate (ad) e cellule PC12 da emissione stimolata deplezione microscopia fotoossidazione EM e diversi dosaggi di microscopia convenzionale. Sorprendentemente, abbiamo scoperto che l&#39;ordinamento endosomal &egrave; un percorso rapido, che sembrava essere coinvolti nel riciclaggio delle vescicole iniziali di essere rilasciato su stimolazione, la piscina facilmente sganciabile. In accordo con il modello endosomal, la composizione della vescicola cambiato dopo endocitosi, con la neonata vescicole essendo arricchite in proteine di membrana del plasma. Le proteine della vescicola erano organizzate in cluster sia nella membrana del plasma (su esocitosi) e nell&#39;endosoma. Nel vano posteriore, essi separati dai componenti della membrana del plasma in un processo che &egrave; probabile che importante per ordinamento/erba di recente sviluppato vescicole dall&#39;endosoma.

Endosomal smistamento delle vescicole sinaptiche facilmente sganciabile.

&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#xFF08;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#xFF09;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#xFF08;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x53D6;&#x5F97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x9577;&#x671F;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x4F4E;&#x901F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x305D;&#x306E;3&#x3064;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x524D;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#xFF08;&#x6574;&#x7406;&#xFF09;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x82BD;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x80FD;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x305D;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x5149;&#x9178;&#x5316;&#x306E;EM&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#xFF08;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF09;&#x3068;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x523A;&#x6FC0;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x5265;&#x96E2;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x6025;&#x901F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D9;&#x30B7;&#x30AF;&#x30EB;&#x7D44;&#x6210;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x5BCC;&#x3093;&#x3067;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3002;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#xFF08;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#xFF09;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;/&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x51FA;&#x82BD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x6210;&#x5206;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3002;

&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x653E;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x9078;&#x5225;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; (exocytosis)&#xC640; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xD3EC; &#xB2E4;&#xC74C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; (endocytosis)&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; endosomes &#xAD6C;&#xC131; &#xD2B9;&#xD788; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB290;&#xB9B0; endocytosis &#xD1B5;&#xB85C; &#xAE30; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; 3 &#xC5EC; &#xB144; &#xC804; &#xAC00;&#xC124; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB378; &#xC608;&#xCE21; &#xC0C8;&#xB85C; endocytosed vesicles &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; endosome&#xC640; &#xD4E8;&#xC988; (&#xAD6C;&#xC131;) &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xC2F9; exocytosis &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC18C;&#xD3EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5EC;&#xAE30; endosome &#xD568;&#xC218;&#xB97C; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;, &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30; (synaptosomes), &#xC720;&#xB3C4; &#xBC29;&#xCD9C; &#xACE0;&#xAC08; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;, &#xD654; &#xC5E0;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; endosomal &#xC815;&#xB82C; &#xC790;&#xADF9;, &#xC27D;&#xAC8C; releasable &#xD480;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xCD08;&#xAE30; vesicles &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098; &#xBE60;&#xB978; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC784;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. Endosomal &#xBAA8;&#xB378; &#xACC4;&#xC57D; &#xAE30; &#xC870;&#xC131; endocytosis, &#xD6C4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xCD95; &#xB418; &#xACE0; &#xC0C8;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;&#xB41C; &#xB41C; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xBAA8;&#xB450; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; (exocytosis)&#xC5D0; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F;&#xB294; endosome. &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xC815;&#xB82C;/&#xC2E0;&#xC9C4;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; vesicles&#xB294; endosome&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C;.

Endosomal &#xC27D;&#xAC8C; releasable synaptic vesicles&#xC758; &#xC815;&#xB82C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La liberaci&#xF3;n de neurotransmisores se logra a trav&#xE9;s de la fusi&#xF3;n de las ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas con la membrana plasm&#xE1;tica neuronal (exocitosis). Las ves&#xED;culas se recuperan de la membrana plasm&#xE1;tica (endocitosis). Es la hip&#xF3;tesis de m&#xE1;s de 3 d&#xE9;cadas atr&#xE1;s, que endosomas participar en el reciclaje de ves&#xED;culas, lo que constituye una v&#xED;a endocitosis lenta requiere sobre todo despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n prolongada. Este modelo predice que el reciclaje fusible nuevo endocitosis ves&#xED;culas con un endosoma, que ordena (organiza) de las mol&#xE9;culas y los brotes exocitosis competentes en las ves&#xED;culas. Se analizaron aqu&#xED; la funci&#xF3;n endosoma utilizando las neuronas del hipocampo, terminales nerviosas aisladas (sinaptosomas) y c&#xE9;lulas PC12 por microscop&#xED;a estimulado el agotamiento de emisi&#xF3;n, EM fotooxidaci&#xF3;n, y varios ensayos de microscop&#xED;a convencionales. Sorprendentemente, encontramos que la clasificaci&#xF3;n endosomal es una v&#xED;a r&#xE1;pida, que parec&#xED;a estar implicado en el reciclaje de las ves&#xED;culas iniciales para ser liberados en la estimulaci&#xF3;n, la piscina desmontable con facilidad. De acuerdo con el modelo endosomal, la composici&#xF3;n de la ves&#xED;cula cambiado despu&#xE9;s de la endocitosis, con las ves&#xED;culas de reciente formaci&#xF3;n que se enriquece en prote&#xED;nas de la membrana plasm&#xE1;tica. Prote&#xED;nas de ves&#xED;culas estaban organizados en grupos, tanto en la membrana plasm&#xE1;tica (en exocitosis) y en el endosoma. En el compartimiento de estos &#xFA;ltimos, separados de los componentes de la membrana de plasma en un proceso que es probable importante para clasificar / gemaci&#xF3;n de ves&#xED;culas reci&#xE9;n desarrolladas a partir de la endosoma.

Endosomal clasificaci&#xF3;n de las ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas f&#xE1;cilmente liberables

&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; boutons&#xFF0C;&#x63A5;&#x7740;&#x662F;&#x56DE;&#x6536;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x548C;&#x65B0;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x5B83;&#x4E0D;&#x662F;&#x5C1A;&#x672A;&#x6E05;&#x9664;&#x878D;&#x5408;&#x540E;&#x6C34;&#x6CE1;&#x575A;&#x6301;&#x4F5C;&#x4E3A; multimolecular &#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x662F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9694;&#x79BB;&#x5230;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x884D;&#x5C04;&#x65E0;&#x9650;&#x6210;&#x50CF; &#xFF08;&#x53D7;&#x6FC0;&#x53D1;&#x7684;&#x5C04;&#x67AF;&#x7AED;&#x6216;&#x5F97;&#x94A2;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECD;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x96C6;&#x7FA4;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x4E0D;&#x6DF7;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x5BF9;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x56DE;&#x6536;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5360;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6; post-fusion &#x547D;&#x8FD0;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x878D;&#x5408;&#x540E;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x3002;

Neurotransmitter release relies on the fusion of synaptic vesicles with the plasma membrane of synaptic boutons, which is followed by the recycling of vesicle components and formation of new vesicles. It is not yet clear whether upon fusion the vesicles persist as multimolecular patches in the plasma membrane, or whether they segregate into individual components. Evidence supporting each of these two models has been suggested in recent years. Using diffraction-unlimited imaging (stimulated emission depletion, or STED) of native synaptic vesicle proteins, we have proposed that vesicle proteins remain in clusters on the neuronal surface. These clusters do not appear to intermix. We discuss here these findings in the context of previous studies on synaptic vesicle fusion, and we propose a recycling model which accounts for most of the recent findings on the post-fusion fate of synaptic vesicle components.

The fate of synaptic vesicle components upon fusion.

Lib&#xE9;ration des neurotransmetteurs repose sur la fusion des v&#xE9;sicules synaptiques avec la membrane plasmique des boutons synaptiques, qui est suivie par le recyclage des composants des v&#xE9;sicules et la formation de nouvelles v&#xE9;sicules. Il n&#x26;#39;est pas encore clair si lors de la fusion des v&#xE9;sicules persistent sous forme de taches multimol&#xE9;culaires dans la membrane plasmique, ou si elles s&#xE9;parer en composants individuels. Preuves &#xE0; l&#x26;#39;appui de chacune de ces deux mod&#xE8;les a &#xE9;t&#xE9; sugg&#xE9;r&#xE9; dans ces derni&#xE8;res ann&#xE9;es. Utilisation de la diffraction illimit&#xE9; d&#x26;#39;imagerie (appauvrissement de la couche d&#x26;#39;&#xE9;mission stimul&#xE9;e, ou STED) de prot&#xE9;ines natives des v&#xE9;sicules synaptiques, nous avons propos&#xE9; que les prot&#xE9;ines des v&#xE9;sicules restent en grappes sur la surface des neurones. Ces regroupements ne semblent pas se m&#xE9;langer. Nous discutons ici ces r&#xE9;sultats dans le contexte des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures sur la fusion des v&#xE9;sicules synaptiques, et nous proposons un mod&#xE8;le de recyclage qui repr&#xE9;sente pour la plupart des d&#xE9;couvertes r&#xE9;centes sur le sort post-fusion des composants des v&#xE9;sicules synaptiques.

Le destin des composants des v&#xE9;sicules synaptiques lors de la fusion

Neurotransmitter-Version basiert auf der Fusion der synaptischen Vesikel mit der Plasmamembran der synaptischen Bottoni, gefolgt durch das recycling von Vesikel-Komponenten und die Bildung von neuen Bl&auml;schen. Es ist noch nicht klar, ob bei der Verschmelzung die Bl&auml;schen als multimolekularen-Patches in der Plasmamembran beizubehalten, oder ob sie in einzelne Komponenten zu trennen. Nachweise f&uuml;r jedes dieser beiden Modelle wurde in den letzten Jahren vorgeschlagen. Mit Beugung-unbegrenzte Bildgebung (stimulierte Emission Ersch&ouml;pfung oder STED) native synaptische Vesikel Proteine, haben wir vorgeschlagen, dass Vesikel Proteine in Clustern auf der neuronalen Oberfl&auml;che bleiben. Diese Cluster erscheinen nicht zu vermischen. Hier diskutieren wir diese Erkenntnisse im Zusammenhang mit fr&uuml;heren Studien &uuml;ber synaptische Vesikel Fusion, und wir schlagen eine Wiederverwertung Modell welche Konten f&uuml;r den Gro&szlig;teil der j&uuml;ngsten Erkenntnisse &uuml;ber das post-fusion Schicksal der synaptischen Vesikel-Komponenten.

Das Schicksal der synaptische Vesikel Komponenten nach Verschmelzung.

Rilascio di neurotrasmettitore si basa sulla fusione delle vescicole sinaptiche con la membrana plasmatica di sinaptico boutons, cui &egrave; seguita il riciclaggio dei componenti della vescicola e la formazione di nuove vescicole. Non &egrave; ancora chiaro se su fusione le vescicole persistono come patch multimolecular nella membrana del plasma, o se essi segregare in singoli componenti. Prove a sostegno di ciascuno di questi due modelli sono stata suggerita negli ultimi anni. Mediante diffrazione-illimitato imaging (svuotamento stimolato dell&#39;emissione, o STED) delle proteine native Vescicola sinaptica, abbiamo proposto che le proteine della vescicola rimangono in grappoli sulla superficie del neurone. Questi ammassi non sembrano intermix. Discutiamo qui di queste scoperte nel contesto degli studi precedenti sulla fusione della vescicola sinaptica, e vi proponiamo un modello di riciclaggio che rappresenta per la maggior parte delle recenti scoperte sul destino post-fusion dei componenti della vescicola sinaptica.

Il destino dei componenti della vescicola sinaptica sulla fusione.

&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7D42;&#x672B;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C0F;&#x80DE;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x591A;&#x5206;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x8FD1;&#x5E74;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x56DE;&#x6298;&#x7121;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;&#x8A98;&#x5C0E;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;STED&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306B;&#x6B8B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x6DF7;&#x5728;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5148;&#x884C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x878D;&#x5408;&#x904B;&#x547D;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x308B;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x969B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x904B;&#x547D;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAE30; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; vesicles&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; boutons&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xACFC; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD4E8;&#xC804;&#xC5D0;&#xB294; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; multimolecular &#xD328;&#xCE58;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC18D; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC544;&#xC9C1; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAC01; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD68C;&#xC808; &#xBB34;&#xC81C;&#xD55C; &#xC601;&#xC0C1; (&#xC720;&#xB3C4; &#xBC29;&#xCD9C; &#xACE0;&#xAC08; &#xB610;&#xB294; STED)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC218;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xB294; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB294; &#xD63C;&#xD569;&#xD560; &#xC218; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD4E8;&#xC804;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xD574; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xC758; post-fusion &#xC6B4;&#xBA85;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB378; &#xACC4;&#xC815;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xD4E8;&#xC804; &#xC2DC; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La liberaci&#xF3;n de neurotransmisores se basa en la fusi&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas con la membrana plasm&#xE1;tica de botones sin&#xE1;pticos, que es seguido por el reciclado de los componentes de ves&#xED;culas y la formaci&#xF3;n de nuevas ves&#xED;culas. No est&#xE1; claro si en la fusi&#xF3;n de las ves&#xED;culas persisten como parches multimolecular en la membrana plasm&#xE1;tica, o si se segregan en los componentes individuales. La evidencia que apoya cada uno de estos dos modelos se ha sugerido en los &#xFA;ltimos a&#xF1;os. Uso ilimitado de im&#xE1;genes de difracci&#xF3;n (el agotamiento de la emisi&#xF3;n estimulada, o STED) de los nativos de prote&#xED;nas de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas, hemos propuesto que las prote&#xED;nas de ves&#xED;culas permanecen en grupos en la superficie neuronal. Estos grupos no parecen entremezclarse. Aqu&#xED; analizamos estos resultados en el contexto de los estudios anteriores sobre la fusi&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas, y se propone un modelo de reciclaje que representa la mayor parte de los recientes hallazgos sobre el destino posterior a la fusi&#xF3;n de los componentes de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas.

Felipe Opazo

STED Microscopy of Synaptic Function

European Neuroscience Institute Göttingen

Studying Synaptic Vesicle Pools using Photoconversion of Styryl Dyes