multielectrode-array-recordings-of-the-vomeronasal-epithelium

Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium

Understanding neural circuits requires methods to record from many neurons simultaneously. For in vitro studies, one currently available technology is ...

Washington University School of Medicine

&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05;&#x5BF9;&#x5C5E;&#x7389;&#x7C73;&#x879F;&#x6027;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x7684;&#x5206;&#x6B67;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x57FA;&#x7840; (&#x9CDE;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A; &#x8349;&#x879F;&#x79D1;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D; O.zaguliaevi&#xFF0C;&#x8FD1;&#x4EB2;&#x7684;&#x6B27;&#x6D32;&#x7389;&#x7C73;&#x879F; O.&#x7814;&#x7A76;&#x521D;&#x62A5;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x6C18;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x68D5;&#x6988;&#x6216;&#x5341;&#x56DB;&#x9178;&#x4E86;&#x5C40;&#x90E8;&#x5E94;&#x7528;&#x5230;&#x7684;&#x6027;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x817A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x6807;&#x7B7E;&#x5C06;&#x7EB3;&#x5165;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x548C;&#x5176;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x6709;&#x4EBA;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5171;&#x4EAB; O.zaguliaevi &#x548C; O.&#x7814;&#x7A76;&#x521D;&#x62A5;&#xFF0C;(E)-11-&#x548C; (Z)-11-tetradecenyl &#x4E59;&#x9178;&#x916F;&#xFF0C;&#x662F;&#x4ECE;&#x68D5;&#x6988;&#x9178;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x8F6E;&#x94FE;&#x7F29;&#x77ED;&#xFF0C;Delta11 &#x51CF;&#x9971;&#x548C;&#x5EA6;&#x3001; &#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x9644;&#x52A0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5177;&#x4F53;&#x53D1;&#x73B0; O.zaguliaevi&#xFF0C;(Z)-9-tetradecenyl &#x918B;&#x9178;&#xFF0C;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; delta11 &#x51CF;&#x9971;&#x548C;&#x5EA6;&#x7684;&#x68D5;&#x6988;&#x9178;&#x3001; &#x4E00;&#x8F6E;&#x94FE;&#x7F29;&#x77ED;&#x3001; &#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x3002;&#x975E;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; (Z)-9-tetradecenyl &#x918B;&#x9178; O.&#x7814;&#x7A76;&#x521D;&#x62A5;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x4EBA;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x5835;&#x585E;&#x7684;&#x94FE;&#x7F29;&#x77ED;&#x4ECE; (Z)-11-hexadecenoate (z)-9-tetradecenoate&#x3002;

&#x6027;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x7389;&#x7C73;&#x879F; zaguliaevi&#xFF0C;&#x540C;&#x7C7B;&#x7684;&#x6B27;&#x6D32;&#x7389;&#x7C73;&#x879F;&#x86FE; O.&#x7814;&#x7A76;&#x521D;&#x62A5;&#x3002;

In order to clarify the biochemical basis to the divergence of sex pheromones in the genus Ostrinia (Lepidoptera: Crambidae), the pheromone biosynthetic pathway in O. zaguliaevi, a close relative of the European corn borer O. nubilalis, was investigated. Deuterium-labeled hexadecanoic or tetradecanoic acids were topically applied to the surface of the pheromone gland, and the incorporation of the label into pheromone components and their putative precursors was determined. It was suggested that the two components shared by O. zaguliaevi and O. nubilalis, (E)-11- and (Z)-11-tetradecenyl acetates, are biosynthesized from hexadecanoic acid through one round of chain shortening, Delta11 desaturation, reduction, and acetylation. An additional component specifically found in O. zaguliaevi, (Z)-9-tetradecenyl acetate, is likely to be produced by delta11 desaturation of hexadecanoic acid, one round of chain shortening, reduction, and acetylation. Non-production of (Z)-9-tetradecenyl acetate in O. nubilalis was suggested to be due to the blockage of chain shortening from (Z)-11-hexadecenoate to (Z)-9-tetradecenoate.

Sex pheromone biosynthesis in Ostrinia zaguliaevi, a congener of the European corn borer moth O. nubilalis.

Afin de clarifier la base biochimique de la divergence des ph&eacute;romones sexuelles dans le genre Ostrinia (Lepidoptera : Crambidae), la voie de biosynth&egrave;se de ph&eacute;romone dans o. zaguliaevi, un proche parent de la pyrale du ma&iuml;s O. nubilalis, a &eacute;t&eacute; l&#39;objet d&#39;une enqu&ecirc;te. Marqu&eacute;s au deut&eacute;rium hexad&eacute;cano&iuml;que ou t&eacute;trad&eacute;cano&iuml;que acides ont &eacute;t&eacute; par voie topique appliqu&eacute;es sur la surface de la glande de ph&eacute;romone, et l&#39;incorporation de l&#39;&eacute;tiquette dans les composants de ph&eacute;romone et leurs pr&eacute;curseurs pr&eacute;sum&eacute;s a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e. Il a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; que les deux composants partagent par o. zaguliaevi et o. nubilalis, (E) -11- et (Z) -11-t&eacute;trad&eacute;c&eacute;nyle ac&eacute;tates sont biosynth&eacute;tis&eacute;es &agrave; partir de l&#39;acide hexad&eacute;cano&iuml;que gr&acirc;ce &agrave; un tour de cha&icirc;ne shortening, la d&eacute;saturation de le Delta11, la r&eacute;duction et l&#39;ac&eacute;tylation. Un composant suppl&eacute;mentaire sp&eacute;cifiquement trouv&eacute;s &agrave; o. zaguliaevi, (Z) -9-ac&eacute;tate de t&eacute;trad&eacute;c&eacute;nyle, est susceptible d&#39;&ecirc;tre produite par delta11 d&eacute;saturation de l&#39;acide hexad&eacute;cano&iuml;que, un tour de raccourcissement de la cha&icirc;ne, la r&eacute;duction et l&#39;ac&eacute;tylation. Non-production de (Z) -9-ac&eacute;tate de t&eacute;trad&eacute;c&eacute;nyle dans o. nubilalis a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; d&#39;&ecirc;tre caus&eacute;e par le blocage de cha&icirc;ne raccourcissement de (Z) -11-hexad&eacute;c&eacute;noate (z) -9-tetradecenoate.

Biosynth&egrave;se du sexe ph&eacute;romone dans Ostrinia zaguliaevi, un cong&eacute;n&egrave;re de la teigne de la pyrale du ma&iuml;s nubilalis o..

Sex Pheromonbiosynthese in Ostrinia zaguliaevi, ein Kongener der Europ&#xE4;ischen Maisz&#xFC;nsler O. nubilalis.

Al fine di chiarire la base biochimica per la divergenza dei feromoni sessuali del genere Ostrinia nubilalis (Lepidoptera: Crambidae), il pathway biosintetico feromone in o. zaguliaevi, un parente stretto del nubilalis di Ostrinia nubilalis O., &egrave; stato indagato. Acidi esadecanoico o tetradecanoico deuterio-contrassegnati sono stati applicati topicamente alla superficie della ghiandola feromone, e l&#39;incorporazione dell&#39;etichetta nei componenti del feromone e loro precursori putativi &egrave; stato determinato. &Egrave; stato suggerito che le due componenti condivisi da o. zaguliaevi e o. nubilalis, (E) -11- e (Z) -11-tetradecenyl acetati, sono biosynthesized da acido esadecanoico attraverso un giro di catena accorciamento, Delta11 desaturazione, riduzione e acetilazione. Un componente aggiuntivo in particolare trovato in o. zaguliaevi, (Z) -9-tetradecenyl acetato, rischia di essere prodotto da delta11 desaturazione dell&#39;acido esadecanoico, un giro di accorciamento catena, riduzione e acetilazione. Non-produzione di (Z) -9-tetradecenyl acetato in o. nubilalis &egrave; stato suggerito per essere dovuto il bloccaggio della catena accorciamento da (Z) -11-hexadecenoate a (Z) -9-tetradecenoate.

Biosintesi di feromone sessuale in Ostrinia zaguliaevi, un congenere della falena Ostrinia nubilalis di Ostrinia o..

&#x30A2;&#x30EF;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5C5E;&#x306E;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5C90;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081; (&#x9C57;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A; &#x30B3;&#x30D6;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x306E;&#x6027;), O. zaguliaevi &#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x306E;&#x30A2;&#x30EF;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC; O. nubilalis &#x306E;&#x8FD1;&#x89AA;&#x3067;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x6C34;&#x7D20;&#x6A19;&#x8B58;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30C7;&#x30AB;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C7;&#x30AB;&#x30F3;&#x9178;&#x5C40;&#x6240;&#x7684;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x817A;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C; O. zaguliaevi &#x304A;&#x3088;&#x3073; (E)-11 O. nubilalis &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5171;&#x6709;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;- &#x3068; (Z)-11-tetradecenyl &#x9162;&#x9178;&#x304C;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3001;Delta11 &#x4E0D;&#x98FD;&#x548C;&#x5316;&#x30FB;&#x9084;&#x5143;&#x6319;&#x52D5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30C7;&#x30AB;&#x30F3;&#x9178;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x767A;&#x898B; O. zaguliaevi&#x3001;&#xFF08;Z&#xFF09;-9-tetradecenyl &#x9162;&#x9178;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30C7;&#x30AB;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x4E0D;&#x98FD;&#x548C; delta11 &#x5316;&#x3001;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3; &#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x524A;&#x6E1B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E; 1 &#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#xFF08;Z&#xFF09;-9 &#x306E;&#x975E;&#x751F;&#x7523;-tetradecenyl &#x9162;&#x9178; O. nubilalis &#x3067;&#x9589;&#x585E;&#x304B;&#x3089; (Z)-11 &#x77ED;&#x7E2E;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-hexadecenoate &#xFF08;Z&#xFF09;-9 &#x3092;-tetradecenoate&#x3002;

&#x30A2;&#x30EF;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC; zaguliaevi, O. nubilalis &#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x306E;&#x30A2;&#x30EF;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x86FE;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x6027;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Ostrinia &#xC18D;&#xC5D0; &#xC139;&#xC2A4; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xBC1C;&#xC0B0; &#xD558; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xADFC;&#xAC70;&#xB97C; &#xBA85;&#xD655;&#xD788; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; (&#xB098;&#xBE44;&#xBAA9;: Crambidae), &#xC624; zaguliaevi, &#xC720;&#xB7FD; &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC1A1;&#xACF3; O. nubilalis&#xC758; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xCE5C;&#xCC99;&#xC758; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC218;&#xC18C; &#xB77C;&#xB294; hexadecanoic &#xB610;&#xB294; tetradecanoic &#xC0B0; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC120; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xBAB8;&#xC5D0; &#xBD99;&#xC774;&#xAE30;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC5C6;&#xC774; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1; &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC624; zaguliaevi&#xC640; &#xC624; nubilalis, (E)-11&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xC720; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;-(z)-11-tetradecenyl &#xC544;&#xC138;&#xD14C;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xB2E8;&#xCD95;, Delta11 &#xBD88;&#xD3EC;&#xD654;, &#xAC10;&#xC18C;, &#xBC0F; acetylation &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xD55C; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; hexadecanoic &#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; biosynthesized. &#xCD94;&#xAC00; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC788;&#xB294; &#xC624; zaguliaevi (Z)-9-tetradecenyl &#xCD08; &#xC0B0; hexadecanoic &#xC0B0;&#xC758; &#xBD88;&#xD3EC;&#xD654; delta11, &#xCCB4;&#xC778; &#xB2E8;&#xCD95;, &#xAC10;&#xC18C;, &#xBC0F; acetylation &#xD55C; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. (Z)-9&#xC758; &#xBE44;-&#xD504;&#xB85C;&#xB355;&#xC158;-&#xC624; nubilalis&#xC5D0; tetradecenyl &#xCD08; &#xC0B0; &#xCCB4;&#xC778; &#xB2E8;&#xCD95; (Z)-11&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9;&#xD798; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;-(z)-9 hexadecenoate-tetradecenoate.

Ostrinia zaguliaevi, &#xC720;&#xB7FD; &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC1A1;&#xACF3; &#xC5C4; &#xC624; nubilalis congener&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC139;&#xC2A4; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;.

Con el fin de aclarar las bases bioqu&iacute;micas de la divergencia de feromonas en el g&eacute;nero Ostrinia (Lepidoptera: Crambidae), la v&iacute;a biosint&eacute;tica de feromona en o. zaguliaevi, un pariente cercano de la Europea perforador de ma&iacute;z O. nubilalis, fue investigada. Marcado con deuterio hexadecanoico o tetradecanoico &aacute;cidos fueron aplicados t&oacute;picamente a la superficie de la gl&aacute;ndula de la feromona, y se determin&oacute; la incorporaci&oacute;n de la etiqueta en componentes de feromona y sus precursores putativos. Se sugiri&oacute; que los dos componentes compartieron por o. zaguliaevi y o. nubilalis, (E) -11- y (Z) -11-tetradecenilo acetatos, son biosintetizada a partir de &aacute;cido hexadecanoico a trav&eacute;s de una ronda de cadena acortamiento, Delta11 desaturaci&oacute;n, reducci&oacute;n y acetilaci&oacute;n. Un componente adicional se encuentra espec&iacute;ficamente en o. zaguliaevi, (Z) -9-tetradecenilo acetato, es probable que se produit delta11 desaturaci&oacute;n del &aacute;cido hexadecanoico, una ronda de acortamiento de la cadena, reducci&oacute;n y acetilaci&oacute;n. No-producci&oacute;n de (Z) -9-tetradecenilo acetato en o. nubilalis sugiri&oacute; que se debe a la obstrucci&oacute;n de cadena acortamiento de (Z) -11-hexadecenoate a (Z) -9-tetradecenoate.

Bios&iacute;ntesis de feromonas sexuales en Ostrinia zaguliaevi, un cong&eacute;nere de la polilla Europea perforador de ma&iacute;z o. nubilalis.

&#x5973;&#x6027;&#x6027;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x5728;&quot;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x817A;&quot;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x8179;&#x90E8;&#x672B;&#x8282; (8-10 &#x65E5;&#xFF0C;TAS) &#x86FE; &#xFF1B; &#x751F;&#x4EA7;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x86FE;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9E;&#x9645;&#x4E0A;&#x5C1A;&#x672A;&#x6307;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5728; TAS &#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x53CA;&#x5176; mRNA &#x524D;&#x4F53;&#xFF0C;Delta11-&#x53BB;&#x9971;&#x548C;&#x9176;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x9176;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x5728;&#x7389;&#x7C73;&#x879F; scapulalis &#x5C0F;&#x8C46;&#x4E8C;&#x5316;&#x879F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x6210;&#x5206;&#xFF0C;(E)-11-&#x548C; (Z)-11-tetradecenyl &#x918B;&#x9178;&#x548C;&#x5176;&#x8102;&#x80AA;&#x9170;&#x57FA;&#x524D;&#x4F53;&#x5177;&#x4F53;&#x8F7D;&#x4E8E;&#x7406;&#x5DE5;&#x79D1;&#x7684;&#x80CC;&#x90E8;&#x5206;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801; Delta11-&#x53BB;&#x9971;&#x548C;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0; (OscaZ/E11) &#x662F;&#x4ECE;&#x7406;&#x5DE5;&#x79D1;&#x514B;&#x9686;RT-PCR &#x548C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6BEB;&#x4E0D;&#x542B;&#x7CCA;&#x5730;&#x8868;&#x660E; OscaZ/E11 &#x5177;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x80CC;&#x4FA7;&#x7AEF;&#x7684; 8-9 &#x8282;&#x95F4;&#x819C;&#x7684;&#x6539;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Delta11-&#x53BB;&#x9971;&#x548C;&#x9176;&#xFF0C;&#x5728;&#x7389;&#x7C73;&#x879F; scapulalis &#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x9176; cDNA &#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F; (&#x9CDE;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A; &#x8349;&#x879F;&#x79D1;&#xFF09;&#x3002;

Female sex pheromones are considered to be produced in a "pheromone gland" located in the terminal abdominal segments (8th-10th, TAS) of a moth; however, in many moth species, the cells that produce pheromones have not actually been specified. We investigated cells in the TAS that synthesize pheromones in the adzuki bean borer Ostrinia scapulalis, by locating pheromones and their precursors, and mRNA for Delta11-desaturase, a key enzyme in pheromone biosynthesis. We demonstrated that the pheromone components, (E)-11- and (Z)-11-tetradecenyl acetates, and their fatty acyl precursors were specifically contained in the dorsal part of the TAS. A cDNA (OscaZ/E11) that encodes a Delta11-desaturase was cloned from the TAS. RT-PCR and in situ hybridization unequivocally showed that OscaZ/E11 is specifically expressed in the modified epidermal cells located at the dorsal end of the 8th-9th intersegmental membrane.

cDNA cloning and in situ hybridization of Delta11-desaturase, a key enzyme of pheromone biosynthesis in Ostrinia scapulalis (Lepidoptera: Crambidae).

Ph&eacute;romones sexuelles femelles sont cens&eacute;es provenir d&#39;une &laquo; glande de ph&eacute;romone &raquo; situ&eacute;e dans les segments abdominaux terminaux (8-10, TAS) d&#39;une esp&egrave;ce de l&eacute;pidopt&egrave;re ; Toutefois, dans nombreuses esp&egrave;ces de papillons nocturnes, les cellules qui produisent des ph&eacute;romones n&#39;ont pas r&eacute;ellement &eacute;t&eacute; pr&eacute;cis&eacute;es. Nous avons &eacute;tudi&eacute; dans le TAS des cellules qui synth&eacute;tisent les ph&eacute;romones dans le charan&ccedil;on d&#39;haricot adzuki Ostrinia scapulalis, en rep&eacute;rant des ph&eacute;romones et leurs pr&eacute;curseurs et les ARNm pour Delta11-d&eacute;saturase, une enzyme cl&eacute; dans la biosynth&egrave;se des ph&eacute;romones. Nous avons d&eacute;montr&eacute; que les composants de ph&eacute;romone, (E) -11- et (Z) -11-t&eacute;trad&eacute;c&eacute;nyle ac&eacute;tates et leurs pr&eacute;curseurs acyl gras figurent express&eacute;ment dans la partie dorsale de la TAS. Un ADNc (OscaZ/E11) qui encode une d&eacute;saturase Delta11 de la TAS. a &eacute;t&eacute; clon&eacute; RT-PCR et hybridation in situ ont montr&eacute; sans &eacute;quivoque que OscaZ/E11 est sp&eacute;cifiquement exprim&eacute; dans les cellules &eacute;pidermiques modifi&eacute;es, situ&eacute;s &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; dorsale de la membrane intersegmentaire 8-9.

ADNc clonage et in situ hybridation de Delta11-d&eacute;saturase, une enzyme cl&eacute; de la biosynth&egrave;se de ph&eacute;romone dans Ostrinia scapulalis (Lepidoptera : Crambidae).

Weiblicher Sexualpheromone gelten als eine &quot;Pheromon-Dr&uuml;se&quot; befindet sich im terminal Abdominal-Segmente (8.-10., TAS) eines Nachtfalters; produziert werden jedoch wurden viele Nachtfalter-Arten, die Zellen, die Pheromone produzieren nicht tats&auml;chlich angegeben. Wir untersuchten Zellen in der TAS, die Pheromone in der Adzuki Bohne-Bohrmaschine Ostrinia Scapulalis, synthetisieren Auffinden Pheromone und deren Vorstufen und mRNA Delta11-Desaturase, ein Schl&uuml;sselenzym in Pheromon-Biosynthese. Wir zeigten, dass die Pheromon-Komponenten, (E)-11- und (Z)-11-Tetradecenyl Acetate und deren fetthaltige Acyl-Vorstufen enthalten waren speziell im dorsalen Teil der TAS Eine DNA (OscaZ/E11), die eine Delta11-Desaturase kodiert wurde von der TAS geklont. RT-PCR und in situ Hybridisierung zeigte eindeutig, dass OscaZ/E11 speziell in der ver&auml;nderten Epidermiszellen am dorsalen Ende der Platz 8-9 intersegmental Membran ausgedr&uuml;ckt wird.

cDNA Klonen und in-situ-Hybridisierung von Delta11-Desaturase, ein Schl&uuml;sselenzym der Pheromon-Biosynthese in Ostrinia Scapulalis (Lepidoptera: Crambidae).

Feromoni sessuali femminili sono considerati essere prodotto in una &quot;ghiandola di feromone&quot; si trova nei segmenti addominali terminali (VIII-x, TAS) di una falena; Tuttavia, in molte specie di falena, le cellule che producono feromoni non sono effettivamente state specificate. Abbiamo studiato le cellule nel TAS che sintetizzano i feromoni nel fagiolo questi borer Ostrinia scapulalis, individuando i feromoni e loro precursori e mRNA per Delta11-desaturasi, enzima chiave nella biosintesi del feromone. Abbiamo dimostrato che i componenti del feromone, (E) -11- e (Z) -11-tetradecenyl acetati e loro precursori acilico grassi in particolare erano contenuti nella parte dorsale del TAS Un cDNA (OscaZ/E11) che codifica un Delta11-desaturasi &egrave; stato clonato dal TAS RT-PCR e l&#39;ibridazione in situ ha dimostrato inequivocabilmente che OscaZ/E11 &egrave; specificatamente espresso nelle cellule epidermiche modificate sull&#39;estremit&agrave; dorsale della membrana intersegmentale VIII-IX.

cDNA ibridazione in situ e clonazione di Delta11-desaturasi, enzima chiave della biosintesi di feromone in Ostrinia scapulalis (Lepidoptera: Crambidae).

&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x300C;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x8179;&#x90E8;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x86FE;; &#x3067; (8-10 &#x65E5;&#x3001;&#x30BF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x5DDE;&#xFF09; &#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x817A;&#x300D;&#x3067;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x86FE;&#x306E;&#x7A2E;&#x3067;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A2;&#x30BA;&#x30AD; &#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A6; &#x30A2;&#x30BA;&#x30AD;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x3067;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AD;&#x30FC;&#x9175;&#x7D20; Delta11 &#x30C7;&#x30B5;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3068; mRNA &#x3092;&#x914D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B; TA &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2; &#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x6210;&#x5206;&#x3001;(E)-11- &#x3068; (Z)-11-tetradecenyl &#x30A2;&#x30BB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;TAS. &#x306E;&#x80CC;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;Delta11-&#x30C7;&#x30B5;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; cDNA (OscaZ/E11) &#x304B;&#x3089; TAS. &#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RT-PCR &#x3068; in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3063;&#x304D;&#x308A;&#x3068; 8 &#x65E5; &#x301C; 9 &#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x9593;&#x819C;&#x80CC;&#x5074;&#x306E;&#x7AEF;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; OscaZ/E11 &#x304C;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30A2;&#x30BA;&#x30AD;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x9375;&#x9175;&#x7D20; Delta11 &#x4E0D;&#x98FD;&#x548C;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E; cDNA &#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068; in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; (&#x9C57;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A; &#x30B3;&#x30D6;&#x30CE;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x306E;&#x6027;)&#x3002;

&#xC5EC;&#xC131; &#xC139;&#xC2A4; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &quot;&#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC120;&quot; &#xB098; &#xBC29;; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBCF5; &#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; (8-10, TAS)&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB9CE;&#xC740; &#xB098; &#xBC29; &#xC885;&#xC5D0; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; TAS &#xC140; Delta11-desaturase, &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;, &#xBC0F; Mrna&#xB97C; &#xCC3E;&#xC544; adzuki &#xCF69; &#xAD6C;&#xBA4D; &#xB6AB;&#xB294; Ostrinia scapulalis&#xC5D0;&#xC11C; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xC744; &#xD569;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, (E)-11-(z)-11-tetradecenyl &#xC544;&#xC138;&#xD14C;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC29; acyl &#xB2E8;&#xACC4;&#xC778; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; TAS.&#xC758; &#xB4F1; &#xCABD; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; CDNA (OscaZ/E11) Delta11 desaturase &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; TAS.&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; RT-PCR &#xBC0F; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBA85;&#xBC31; &#xD558; &#xAC8C; OscaZ/e 11&#xC740; 8-9 &#xAC1C;&#xCD95; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xB4F1; &#xCABD; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB41C; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Delta11-desaturase, &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; Ostrinia scapulalis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; cDNA &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD; &#xD558; &#xACE0; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50; &#xC7A1; (&#xB098;&#xBE44;&#xBAA9;: Crambidae).

Las feromonas de sexo femenino se consideran que se produce en una &quot;gl&aacute;ndula de feromona&quot; situada en el segmento abdominal terminal (8-10, TAS) de una polilla; sin embargo, en muchas especies de polilla, las c&eacute;lulas que producen las feromonas no realmente ha especificado. Investigamos las c&eacute;lulas en el TAS que sintetizan las feromonas en el barrenador de habichuelas adzuki Ostrinia scapulalis, ubicando las feromonas y sus precursores, mRNA para Delta11-desaturasa, una enzima clave en la bios&iacute;ntesis de feromonas. Hemos demostrado que los componentes de la feromona, (E) -11- y (Z) -11-tetradecenilo acetatos y sus precursores de acil graso figuran espec&iacute;ficamente en la parte dorsal de la TAS. Un cDNA (OscaZ/E11) que codifica una Delta11-desaturasa fue reproducido de la TAS. RT-PCR e hibridaci&oacute;n in situ demostraron inequ&iacute;vocamente que OscaZ/E11 espec&iacute;ficamente se expresa en las c&eacute;lulas epid&eacute;rmicas modificadas, situadas en el extremo dorsal de la membrana intersegmental de 8-9.

hibridaci&oacute;n in situ y clonaci&oacute;n de cDNA de Delta11-desaturasa, una enzima clave de la bios&iacute;ntesis de feromonas en Ostrinia scapulalis (Lepidoptera: Crambidae).

&#x4EE5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8179;&#x6CFB;&#x578B;&#x80A0;&#x6613;&#x6FC0;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x813E;&#x80C3;&#x6E7F;&#x70ED;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; (IBS PDS) &#x80A0;&#x9053;&#x83CC;&#x7FA4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

[&#x8179;&#x6CFB;&#x578B;&#x80A0;&#x6613;&#x6FC0;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x813E;&#x80C3;&#x6E7F;&#x70ED;&#x8BC1;&#x4E0E;&#x80A0;&#x9053;&#x83CC;&#x7FA4;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;]&#x3002;

To observe the changes of intestinal flora in diarrhea type irritable bowel syndrome with Pi-wei dampness-heat syndrome (IBS-PDS).

[Preliminary study on intestinal flora in diarrhea type irritable bowel syndrome with pi-wei dampness-heat syndrome].

D&#39;observer les changements de la flore intestinale dans le syndrome du c&ocirc;lon irritable type diarrh&eacute;e avec syndrome d&#39;humidit&eacute;-chaleur de Pi-wei (IBS-PDS).

[Etude pr&eacute;liminaire sur la flore intestinale dans le syndrome du c&ocirc;lon irritable type diarrh&eacute;e avec syndrome d&#39;humidit&eacute;-chaleur de pi-wei].

Die Ver&auml;nderungen der Darmflora in Durchfall Typ Reizdarm mit Pi-Wei-Feuchtigkeit-Hitze-Syndrom (IBS-PDS) zu beobachten.

[Voruntersuchung auf Darmflora in Durchfall Typ Reizdarm mit Pi-Wei-Feuchtigkeit-Hitze-Syndrom].

Per osservare i cambiamenti della flora batterica intestinale nella sindrome del colon irritabile tipo diarrea con sindrome di umidit&agrave;-calore Pi-wei (IBS-PDS).

[Studio preliminare sulla flora intestinale nella sindrome del colon irritabile tipo diarrea con sindrome di umidit&agrave;-calore pi-wei].

&#x4E0B;&#x75E2;&#x578B;&#x904E;&#x654F;&#x6027;&#x8178;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4; Pi &#x9B4F;&#x6E7F;&#x6C17;&#x71B1;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4; &#xFF08;IBS PDS) &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8178;&#x5185;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E9;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3002;

[Pi &#x9B4F;&#x6E7F;&#x6C17;&#x71B1;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x4E0B;&#x75E2;&#x578B;&#x904E;&#x654F;&#x6027;&#x8178;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8178;&#x5185;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E9;&#x306E;&#x4E88;&#x5099;&#x7684;&#x8003;&#x5BDF;]&#x3002;

&#xD30C;&#xC774; &#xC6E8;&#xC774; &#xC2B5;&#xAE30; &#xC5F4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (IBS-PDS) &#xD615;&#xC2DD; &#xACFC;&#xBBFC;&#xC131; &#xB300; &#xC7A5; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC124;&#xC0AC; &#xC7A5;&#xC758; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30;.

[&#xD30C;&#xC774; &#xC6E8;&#xC774; &#xC2B5;&#xAE30; &#xC5F4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC124;&#xC0AC; &#xD615;&#xC2DD; &#xACFC;&#xBBFC;&#xC131; &#xB300; &#xC7A5; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC758; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xBE44; &#xC5F0;&#xAD6C;].

Observar los cambios de la flora intestinal en el s&iacute;ndrome de intestino irritable de tipo diarr&eacute;ico con s&iacute;ndrome de humedad calor Pi-wei (IBS-PDS).

[Estudio preliminar sobre la flora intestinal en el s&iacute;ndrome de intestino irritable de tipo diarr&eacute;ico con s&iacute;ndrome de humedad calor pi-wei].

&#x4E3A;&#x4E86;&#x51C6;&#x5907;&#x4ECE;&#x743C;&#x8102;&#x7CD6;&#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x7EAF;&#x51C0;&#x548C;&#x660E;&#x786E;&#x754C;&#x5B9A;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x4EE5;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x9176;&#x964D;&#x89E3;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x9000;&#x5316;&#x6216;&#x91CD;&#x7EC4; &beta;-&#x743C; (EC 3.2.1.81) AgaA &#x6216;&#x963F;&#x5361;&#x5E03;&#x548C;&#x51DD;&#x80F6;&#x6E17;&#x900F;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x743C;&#x8102;&#x7CD6;&#x88AB;&#x964D;&#x7EA7;&#xFF0C;AgaA &#x5728;&#x4F18;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x6536;&#x76CA;&#x7387; 47%&#x548C; 45%&#x7684; neoagarotetraose &#x548C; neoagarohexaose&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; neoagaro &#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x8FDE;&#x7EED;&#x67F1;&#x5C42;&#x6790;&#x6CD5;&#x5BF9;&#x751F;&#x7269;&#x51DD;&#x80F6; P2 &#x6216; P6 &#x88AB;&#x65B9;&#x4FBF;&#x5730;&#x5206;&#x5F00;&#xFF0C;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x7684;&#x8138;&#x3002;-&#x8D28;&#x8C31;&#x548C; (13) C &#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B; neoagaro &#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

&#x51C6;&#x5907;&#x4E0E; beta &#x743C;&#x591A;&#x6837; neoagaro &#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

In order to prepare pure and well-defined oligosaccharides from agarose in a rapid and simple manner, an enzymatic degradation method was developed, which includes degradation with either recombinant beta-agarase (EC 3.2.1.81) AgaA or AgaB and gel permeation chromatography. Agarose was degraded with AgaA at the optimized conditions, yielding 47% and 45% of neoagarotetraose and neoagarohexaose, respectively. These neoagaro-oligosaccharides were conveniently separated by consecutive column chromatography on Bio-Gel P2 or P6 and were identified by FACE. The structure of these neoagaro-oligosaccharides was confirmed by MALDI-TOF MS and (13)C NMR spectroscopy.

A simple method of preparing diverse neoagaro-oligosaccharides with beta-agarase.

Afin de pr&eacute;parer des oligosaccharides pures et bien d&eacute;finies de l&#39;agarose de mani&egrave;re rapide et simple, une m&eacute;thode de d&eacute;gradation enzymatique a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;e, qui comprend la d&eacute;gradation avec soit chromatographie &agrave; perm&eacute;ation AgaA ou AgaB et gel recombinant beta-l&#39;agarase (EC 3.2.1.81). Agarose est d&eacute;grad&eacute; avec AgaA aux conditions optimis&eacute;es, donnant des 47 % et 45 % de n&eacute;oagarot&eacute;troase et neoagarohexaose, respectivement. Ces neoagaro-oligosaccharides sont id&eacute;alement s&eacute;par&eacute;s par chromatographie sur colonne cons&eacute;cutives sur Bio-Gel P2 ou P6 et sont identifi&eacute;s par le visage. La structure de ces neoagaro-oligosaccharides a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par MALDI-TOF MS et la spectroscopie RMN du 13C (13).

Une m&eacute;thode simple de pr&eacute;parer divers neoagaro-oligosaccharides avec b&ecirc;ta-l&#39;agarase.

Um rein und klar definierte Oligosaccharide aus Agarose in eine schnelle und einfache Weise vorzubereiten, wurde eine enzymatische Abbau-Methode entwickelt die Verschlechterung mit entweder rekombinantes Beta-Agarase (EG 3.2.1.81)-AgaA oder AgaB und Gel-Permeations-Chromatografie. Agarose wurde mit AgaA zu den optimierten Bedingungen abgebaut, Gewinnung von 47 % und 45 % der Neoagarotetraose und Neoagarohexaose. Diese Neoagaro-Oligosaccharide wurden bequem durch aufeinanderfolgende S&auml;ulenchromatographie auf Bio-Gel P2 und P6 getrennt wurden und durch Gesicht. Die Struktur dieser Neoagaro-Oligosaccharide best&auml;tigte MALDI-TOF-MS und (13) C-NMR-Spektroskopie.

Eine einfache Methode der Vorbereitung diverse Neoagaro-Oligosaccharide mit Beta-Agarase.

Al fine di preparare gli oligosaccaridi puri e ben definiti da agarosi in modo rapido e semplice, &egrave; stato sviluppato un metodo di degradazione enzimatica, che comprende la degradazione con entrambi ricombinante beta-il agarase (EC 3.2.1.81) AgaA o AgaB e gel cromatografia di permeazione. Agarosio &egrave; stato degradato con AgaA nelle condizioni ottimizzate, ottenendo il 47% e 45% di neoagarotetraose e neoagarohexaose, rispettivamente. Questi neoagaro-oligosaccaridi sono stati convenientemente separati mediante cromatografia a colonna consecutivi su Bio-Gel P2 o P6 e sono stati identificati da FACE. La struttura di questi neoagaro-oligosaccaridi &egrave; stata confermata da MS MALDI-TOF e spettroscopia NMR C (13).

Un metodo semplice di preparare diversi neoagaro-oligosaccaridi con beta-il agarase.

&#x7D14;&#x7C8B;&#x3067;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6; agarose &#x304B;&#x3089;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x6E96;&#x5099;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x5206;&#x89E3;&#x6CD5;&#x3001;&#x52A3;&#x5316;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-agarase &#xFF08;EC 3.2.1.81&#xFF09; AgaA &#x307E;&#x305F;&#x306F; AgaB &#x3068;&#x30B2;&#x30EB;&#x6D78;&#x900F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30AC;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9; AgaA &#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;47 &#xFF05;&#x3001;45 &#xFF05; &#x306E; neoagarotetraose &#x3068; neoagarohexaose&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x964D;&#x4F0F;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; neoagaro &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x306F;&#x3001;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30B8;&#x30A7;&#x30EB; P2 &#x307E;&#x305F;&#x306F; P6 &#x9023;&#x7D9A;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9854;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; neoagaro &#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;MALDI-TOF MS (13) C NMR &#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x591A;&#x69D8;&#x306A; neoagaro &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; agarase &#x3068;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC21C;&#xC218; &#xD558; &#xACE0; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; oligosaccharides agarose&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xBE44; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC5B4;&#xB290; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBCA0;&#xD0C0;-agarase (EC 3.2.1.81) AgaA &#xB610;&#xB294; Agab&#xC640; &#xC824; &#xD22C;&#xACFC; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC640; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC800;&#xD558; &#xBC29;&#xBC95; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Agarose&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; 47%&#xC640; 45%&#xC758; neoagarotetraose &#xBC0F; neoagarohexaose, &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; Agaa&#xB85C; &#xC800;&#xD558;&#xB294;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; neoagaro oligosaccharides &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC824; P2 &#xB610;&#xB294; P6 &#xC5F0;&#xC18D; &#xC5F4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD3B8;&#xB9AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xC5BC;&#xAD74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; neoagaro oligosaccharides &#xAD6C;&#xC870; MALDI TOF MS&#xC640; (13) C NMR &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xBCA0;&#xD0C0;-agarase&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; neoagaro oligosaccharides &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;.

Para preparar oligosac&aacute;ridos puros y bien definidas de agarosa en forma r&aacute;pida y sencilla, se desarroll&oacute; un m&eacute;todo de degradaci&oacute;n enzim&aacute;tica, que incluye la degradaci&oacute;n con o cromatograf&iacute;a de permeaci&oacute;n AgaA o AgaB y gel recombinante beta-agarase (EC 3.2.1.81). Agarosa se degrad&oacute; con AgaA en las condiciones optimizadas, obteniendo el 47% y 45% de neoagarotetraose y neoagarohexaose, respectivamente. Estos neoagaro-oligosac&aacute;ridos convenientemente estaban separadas por cromatograf&iacute;a en columna consecutivos en biogel P2 o P6 y fueron identificados por la cara. La estructura de estos neoagaro-oligosac&aacute;ridos fue confirmada por MALDI-TOF MS y espectroscopia de RMN de C (13).

Un m&eacute;todo simple de preparar diversos neoagaro-oligosac&aacute;ridos con beta-agarase.

&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x793E;&#x4F1A;&#x6C14;&#x5473;&#x63D0;&#x793A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4F20;&#x8FBE;&#x4FE1;&#x606F;&#x3001; &#x6027;&#x522B;&#x3001; &#x793E;&#x4F1A;&#x5730;&#x4F4D;&#x548C;&#x8EAB;&#x4EFD; &#xFF1B;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EBF;&#x7D22;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x6027;&#x8D28;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EBF;&#x7D22;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7504;&#x522B;&#x8272;&#x8C31;&#x7EC4;&#x5206;&#x9020;&#x6210;&#x91CD;&#x73B0;&#x5C04;&#x51FB;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x96CC;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C3F;&#x7684;&#x901F;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7281;&#x9F3B;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; (VSNs) &#x7528;&#x7535;&#x6781;&#x9635;&#x5217; (MEA) &#x8BB0;&#x5F55;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x662F;&#x975E;&#x5E38;&#x5747;&#x5300;&#x5728;&#x5176;&#x57FA;&#x672C;&#x5C5E;&#x6027;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x6B63;&#x5728;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3001; &#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x3001; &#x4F4E;&#x6CE2;&#x52A8;&#x6027;&#xFF0C;&#x53CA;&#x85CF;&#x6709;&#x8D1F;&#x7684;&#x7535;&#x8377;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7EAF;&#x5316;&#x53CA;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x591A;&#x4E2A;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x786B;&#x9178;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E; 21-&#x786B;&#x9178;&#x3002;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x786B;&#x9178;&#x916F;&#x9176;&#x6CBB;&#x7597;&#x5C3F;&#x63D0;&#x53D6; &gt; &#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x786B;&#x9178;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684; VSN &#x914D;&#x4F53;&#x96CC;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x7684; 80%&#x3002;MEA &#x8BB0;&#x5F55;&#x3001; 31 &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x96C6;&#x5408;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x89E6;&#x53D1;&#x54CD;&#x5E94;&#x6BD4;&#x540C;&#x6837;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x91CF;&#x66F4;&#x9891;&#x7E41;&#x96C6;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x6240;&#x6709;&#x5148;&#x524D;&#x62A5;&#x544A; VSN &#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;VSNs &#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6240;&#x6709;&#x4E3B;&#x8981;&#x7C7B;&#x522B;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5355;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x662F;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5C0F;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027;&#x4ECE; VSNs &#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x4F46;&#x611F;&#x89C9;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x9053; TRPC2 &#x7684;&#x6572;&#x95E8;&#x58F0;&#x56F0;&#x6CA1;&#x6709;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x4E24;&#x79CD;&#x786B;&#x9178;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x6D53;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x5F88;&#x591A;&#x500D;&#x5F3A;&#x8C03;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x6001;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5316;&#x5B66;&#x901A;&#x8BAF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x9F20;&#x6807;&#x9065;&#x611F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x3002;

Among mice, pheromones and other social odor cues convey information about sex, social status, and identity; however, the molecular nature of these cues is essentially unknown. To identify these cues, we screened chromatographic fractions of female mouse urine for their ability to cause reproducible firing rate increases in the pheromone-detecting vomeronasal sensory neurons (VSNs) using multielectrode array (MEA) recording. Active compounds were found to be remarkably homogenous in their basic properties, with most being of low molecular weight, moderate hydrophobicity, low volatility, and possessing a negative electric charge. Purification and structural analysis of active compounds revealed multiple sulfated steroids, of which two were identified as sulfated glucocorticoids, including corticosterone 21-sulfate. Sulfatase-treated urine extracts lost >80% of their activity, indicating that sulfated compounds are the predominant VSN ligands in female mouse urine. As measured by MEA recording, a collection of 31 synthetic sulfated steroids triggered responses 30-fold more frequently than did a similarly sized stimulus set containing the majority of all previously reported VSN ligands. Collectively, VSNs detected all major classes of sulfated steroids, but individual neurons were sensitive to small variations in chemical structure. VSNs from both males and females detected sulfated steroids, but knock-outs for the sensory transduction channel TRPC2 did not detect these compounds. Urine concentrations of the two sulfated glucocorticoids increased many fold in stressed animals, indicating that information about physiological status is encoded by the urine concentration of particular sulfated steroids. These results provide an unprecedented characterization of the signals available for chemical communication among mice.

Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons.

Parmi les souris, les ph&#xE9;romones et d&#x26;#39;autres indices d&#x26;#39;odeur sociaux transmettre des informations sur le sexe, le statut social, et de l&#x26;#39;identit&#xE9;, mais la nature mol&#xE9;culaire de ces indices est essentiellement inconnu. Pour identifier ces indices, nous avons cribl&#xE9; fractions chromatographiques de l&#x26;#39;urine de souris femelles pour leur capacit&#xE9; &#xE0; provoquer des augmentations de cadence de tir reproductibles dans les ph&#xE9;romones d&#xE9;tection Vomeronasal neurones sensoriels (VSN) en utilisant tableau multi&#xE9;lectrodes (MEA) d&#x26;#39;enregistrement. Les compos&#xE9;s actifs ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre remarquablement homog&#xE8;ne dans leurs propri&#xE9;t&#xE9;s de base, la plupart &#xE9;tant de faible poids mol&#xE9;culaire, hydrophobicit&#xE9; mod&#xE9;r&#xE9;e, faible volatilit&#xE9;, et poss&#xE9;dant une charge &#xE9;lectrique n&#xE9;gative. Purification et analyse structurale des compos&#xE9;s actifs a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de multiples st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s, dont deux ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s comme les glucocortico&#xEF;des sulfat&#xE9;s, y compris la corticost&#xE9;rone 21-sulfate. Sulfatase-trait&#xE9; l&#x26;#39;urine extrait perdu&#x26;gt; 80% de leur activit&#xE9;, ce qui indique que les compos&#xE9;s sulfat&#xE9;s sont des ligands VSN pr&#xE9;dominants dans l&#x26;#39;urine de souris femelles. Tel que mesur&#xE9; par l&#x26;#39;enregistrement MEA, une collection de 31 st&#xE9;ro&#xEF;des synth&#xE9;tiques sulfat&#xE9;s provoqu&#xE9; des r&#xE9;actions de 30 fois plus souvent que d&#x26;#39;un ensemble de relance de taille similaire contenant la majorit&#xE9; de tous les ligands VSN signal&#xE9;s pr&#xE9;c&#xE9;demment. Collectivement, VSN d&#xE9;tect&#xE9; toutes les grandes classes de st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s, mais les neurones individuels &#xE9;taient sensibles &#xE0; de petites variations dans la structure chimique. VSN de deux m&#xE2;les et les femelles d&#xE9;tect&#xE9; st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s, mais knock-out pour la transduction sensorielle canal TRPC2 ne d&#xE9;tecte pas ces compos&#xE9;s. Concentrations urinaires de deux des glucocortico&#xEF;des sulfat&#xE9;s augment&#xE9; de plusieurs fois dans les animaux stress&#xE9;s, indiquant que l&#x26;#39;information sur l&#x26;#39;&#xE9;tat physiologique est cod&#xE9;e par la concentration de l&#x26;#39;urine de particulier, de st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s. Ces r&#xE9;sultats fournissent une caract&#xE9;risation sans pr&#xE9;c&#xE9;dent des signaux disponibles pour la communication chimique chez les souris.

Les st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s en tant que ligands naturels de souris ph&#xE9;romone-d&#xE9;tection neurones

Unter den M&auml;usen, Pheromone und andere soziale Geruch-Signale vermitteln Sie Informationen &uuml;ber Geschlecht, sozialen Status und Identit&auml;t; die molekulare Natur dieser Hinweise ist jedoch im wesentlichen unbekannt. Um diese Hinweise zu identifizieren, geschirmt wir Chromatographische Br&uuml;che von weiblichen Maus Urin f&uuml;r ihre F&auml;higkeit, reproduzierbare Brand verursachen bei einem Anstieg in den Pheromon-Erkennung Vomeronasal sensorischen Neuronen (VSNs) mit multielectrode Array (MEA) Aufnahme. Aktive Verbindungen fanden sich bemerkenswert homogenen in ihren grundlegenden Eigenschaften mit den meisten wird der niedermolekularen, moderate Hydrophobie, geringe Volatilit&auml;t und besitzen eine negative elektrische Ladung sein. Reinigung und strukturelle Analyse von aktiven Verbindungen ergab mehrere sulfatierte Steroide, von denen zwei als sulfatierte Glucocorticoide, einschlie&szlig;lich Corticosteron 21-Sulfat identifiziert wurden. Sulfatase-behandelten Urin Extrakte verloren &gt; 80 % ihrer T&auml;tigkeit, die darauf hinweist, dass sulfatierte Verbindungen die vorherrschenden VSN-Liganden im weiblichen Maus Urin sind. Gemessen an MEA recording, eine Sammlung von 31 synthetische sulfatierte Steroide ausgel&ouml;st Antworten festlegen 30-fold h&auml;ufiger als ein &auml;hnlich gro&szlig;en Reiz hat, enth&auml;lt die Mehrheit aller zuvor gemeldeten VSN-Liganden. Zusammenfassend als VSNs erkannt alle Hauptgruppen von sulfatierte Steroide, aber einzelne Neuronen wurden kleine &Auml;nderungen in der chemischen Struktur. VSNs von M&auml;nnchen und Weibchen festgestellt sulfatierte Steroide, aber Knock-outs f&uuml;r den sensorischen Transduktion Kanal TRPC2 diese Verbindungen nicht erkennen konnte. Urin-Konzentrationen der beiden sulfatierten Glukokortikoiden erh&ouml;ht in gestresste Tiere, die darauf hinweist, dass Informationen &uuml;ber physiologische Status durch die Urin-Konzentration von bestimmten sulfatierte Steroiden codiert werden viele Falten. Diese Ergebnisse liefern eine beispiellose Charakterisierung der Signale f&uuml;r die chemische Kommunikation zwischen M&auml;usen zur Verf&uuml;gung.

Sulfatiertes Steroide als nat&uuml;rlichen Liganden der Maus Pheromon-Sensorik Neuronen.

Tra i topi, i feromoni e altri spunti sociali odore trasmettono informazioni su sesso, stato sociale e identit&agrave;; Tuttavia, la natura molecolare di questi spunti &egrave; sostanzialmente sconosciuta. Per identificare questi spunti, abbiamo proiettato cromatografiche frazioni di urina di topo femmina per la loro capacit&agrave; di provocare infornamento riproducibile tasso aumenta nel rilevamento di feromone vomeronasal sensoriale neuroni (VSNs) con multielectrode array (MEA) registrazione. Composti attivi sono stati trovati per essere notevolmente omogenei nella loro propriet&agrave; di base, con la maggior parte di basso peso molecolare, moderata idrofobicit&agrave;, bassa volatilit&agrave; e che possiedono una carica elettrica negativa. Analisi strutturali e purificazione di composti attivi rivelato pi&ugrave; steroidi solfati, di cui due sono stati identificati come i glucocorticoidi, tra cui 21-solfato di corticosterone. Estratti di urina trattati solfatasi perduti &amp;gt; 80% della loro attivit&agrave;, indicando che i composti sono i ligandi VSN predominanti nell&#39;urina dei mouse femminili. Come misurato da MEA di registrazione, una raccolta di 31 sintetiche risposte solfato steroidi innescati impostare 30-fold pi&ugrave; frequentemente di quanto ha fatto uno stimolo Analogamente dimensione contenente la maggior parte di tutti i ligandi VSN precedentemente segnalati. Collettivamente, VSNs rilevato tutte le principali classi di steroidi solfati, ma i singoli neuroni sono stati sensibili a piccole variazioni nella struttura chimica. VSNs da sia i maschi che le femmine rilevato solfati steroidi, ma knock-out per il canale di trasduzione sensoriale TRPC2 non rilevare questi composti. I glucocorticoidi solfati due concentrazioni urina aumentata molte volte negli animali stressati, indicante che informazioni sullo stato fisiologico sono codificate dalla concentrazione urinaria di steroidi particolare solfati. Questi risultati forniscono una caratterizzazione dei segnali disponibili per la comunicazione chimica tra topi senza precedenti.

Solfato steroidi come ligandi naturali dei neuroni di feromone-sensing mouse.

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x306A;&#x81ED;&#x6C17;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306F;&#x3001;&#x6027;&#x5225;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;ID&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x4F1D;&#x3048;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306F;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x96FB;&#x6975;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#xFF08;MEA&#xFF09;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x92E4;&#x9F3B;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;VSNS&#xFF09;&#x3067;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x706B;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x96CC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5C3F;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x753B;&#x5206;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x304C;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3001;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x3001;&#x4F4E;&#x63EE;&#x767A;&#x6027;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x96FB;&#x8377;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5747;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6D44;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;21  - &#x786B;&#x9178;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x51E6;&#x7406;&#x5C3F;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x304C;&#x3001;&#x96CC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;VSN&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x26;gt; 80&#xFF05;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3068;&#x3057;&#x3066;MEA&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;31&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;30&#x500D;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;VSN&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x540C;&#x3058;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5F15;&#x304D;&#x91D1;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;VSNS&#x306F;&#x3001;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;VSNS&#x306F;&#x3001;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;TRPC2&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#xB7;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x4F55;&#x500D;&#x306B;&#x3082;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x611F;&#x77E5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5929;&#x7136;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xD68C; &#xB0C4;&#xC0C8; &#xC2E0;&#xD638; &#xC911; &#xC139;&#xC2A4;, &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xC9C0;&#xC704;, &#xC2E0;&#xBD84;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC804;&#xB2EC; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC790;&#xC5F0; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC6D0;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xC131; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC18C;&#xBCC0;&#xC758; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8; &#xBD84;&#xC218; &#xC0C1;&#xC601; &#xBE44;&#xC728; &#xC99D;&#xAC00; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; vomeronasal &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0; (VSNs) multielectrode &#xBC30;&#xC5F4; (MEA) &#xB179;&#xC74C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xD65C;&#xC131; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC740; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xB0AE;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xB7C9;, &#xC628;&#xAC74;&#xD55C; hydrophobicity, &#xB0AE;&#xC740; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xB418; &#xACE0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xAE30; &#xC694;&#xAE08;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xAC8C; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654; &#xD65C;&#xC131; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xB450; corticosterone 21-&#xD669;&#xC0B0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC5EC;&#xB7EC; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Sulfatase &#xB300;&#xC6B0; &#xC18C;&#xBCC0; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C; &#xC190;&#xC2E4; &amp;gt; sulfated &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC740; &#xC5EC;&#xC131; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC18C;&#xBCC0;&#xC758; &#xC6B0;&#xC138;&#xD55C; VSN ligands &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; 80%. MEA &#xAE30;&#xB85D;, 31 &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC720;&#xBC1C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4E0; VSN ligands&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; 30-fold &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD06C;&#xAE30; &#xC790;&#xADF9; &#xC124;&#xC815;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; VSNs sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB274;&#xB7F0; &#xD654;&#xD559; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB0A8;&#xC131;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC131; &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0;&#xC11C; VSNs &#xAC80;&#xC0C9; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xAC01; &#xC804;&#xB2EC; &#xCC44;&#xB110; trpc2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC18C;&#xBCC0; &#xB18D;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xC18C;&#xBCC0; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC30; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC950; &#xC911; &#xD654;&#xD559; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC804;&#xB840;&#xAC00; &#xC5C6;&#xB294; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; ligands&#xB85C; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;.

Entre los ratones, las feromonas y otras se&#xF1;ales de olor sociales transmitir informaci&#xF3;n acerca de sexo, condici&#xF3;n social, y la identidad, sin embargo, la naturaleza molecular de estas se&#xF1;ales es esencialmente desconocida. Para identificar estas se&#xF1;ales, se examinaron las fracciones cromatogr&#xE1;ficas de la orina del rat&#xF3;n hembra para su capacidad de causar reproducibles aumentos de las tasas de disparo en la detecci&#xF3;n de las feromonas-las neuronas sensoriales vomeronasal (VSNs) con amplia multielectrodo (MEA) de grabaci&#xF3;n. Los compuestos activos se encontr&#xF3; que ser notablemente homog&#xE9;neo en sus propiedades b&#xE1;sicas, con m&#xE1;s de ser de bajo peso molecular, hidrofobicidad moderada, baja volatilidad, y que posea una carga el&#xE9;ctrica negativa. Purificaci&#xF3;n y an&#xE1;lisis estructural de los compuestos activos revel&#xF3; m&#xFA;ltiples esteroides sulfatados, de los cuales dos se identificaron como glucocorticoides sulfatados, incluyendo corticosterona 21-sulfato. Sulfatasa tratada con orina extrae perdido&#x26;gt; 80% de su actividad, indicando que los compuestos sulfatados son los ligandos VSN predominantes en la orina del rat&#xF3;n hembra. Si se mide por la grabaci&#xF3;n de MEA, una colecci&#xF3;n de 31 esteroides sint&#xE9;ticos sulfatados provocado respuestas de 30 veces m&#xE1;s frecuencia que un conjunto de est&#xED;mulos de tama&#xF1;o similar, que contiene la mayor&#xED;a de los ligandos VSN se inform&#xF3; anteriormente. Colectivamente, VSNs detect&#xF3; todas las clases principales de esteroides sulfatados, pero las neuronas individuales eran sensibles a peque&#xF1;as variaciones en la estructura qu&#xED;mica. VSNs de hombres y mujeres detectaron esteroides sulfatados, pero knock-out para la transducci&#xF3;n sensorial canal trpC2 no se detectaron estos compuestos. Concentraciones de orina de los dos glucocorticoides sulfatados aumentado pliegue en muchos animales estresados, lo que indica que la informaci&#xF3;n sobre el estado fisiol&#xF3;gico es codificado por la concentraci&#xF3;n de orina particulares esteroides sulfatados. Estos resultados proporcionan una caracterizaci&#xF3;n sin precedentes de las se&#xF1;ales disponibles para la comunicaci&#xF3;n qu&#xED;mica entre los ratones.

Los esteroides sulfatados como ligandos naturales de rat&#xF3;n feromonas las neuronas sensibles al

&#x8981;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9A;&#x5411;&#x8FDB;&#x5316;&#x589E;&#x52A0; beta &#x743C;&#x963F;&#x5361;&#x5E03;&#x7684;&#x70ED;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E93;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6613;&#x51FA;&#x9519;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (PCR) &#x548C;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178; (DNA) &#x6D17;&#x724C;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x8010;&#x9AD8;&#x6E29;&#x88AB;&#x5C4F;&#x853D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x743C;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x7684;&#x743C;&#x8102;&#x751F;&#x6210;&#x743C;&#x8102;&#x677F;&#x4E0A;&#x7684;&#x660E;&#x786E;&#x533A;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;PCR &#x548C; dna &#x53CA;&#x9009;&#x62E9;&#x5355;&#x8F6E;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8; S2 &#x83B7;&#x5F97;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E24;&#x8F6E;&#x7684;&#x9519;&#x8BEF;&#x503E;&#x5411;&#x3002;&#x5B83;&#x5177;&#x6709;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x70ED;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7565;&#x5FAE;&#x589E;&#x52A0;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x963F;&#x5361;&#x5E03;&#x3002;&#x7194;&#x5316;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6; &#xFF08;S2 T(m))&#xFF0C;&#x7531;&#x5706;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#xFF0C;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x662F; 4.6 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x963F;&#x5361;&#x5E03;&#xFF0C;&#x548C; S2 &#x7684;&#x534A;&#x8870;&#x671F;&#x662F;&#x5728; 40 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x9176; 18.4-fold &#x957F; 350 &#x5206;&#x3002;&#x9971;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x7684;&#x805A;&#x7C7B;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x793A;&#x758F;&#x6C34;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x589E;&#x5F3A;&#x9176;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

&#x52A0;&#x5F3A;&#x65B0;&#x578B; &beta;-&#x743C;&#x963F;&#x5361;&#x5E03;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9A;&#x5411;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x70ED;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;

To increase the thermostability of beta-agarase AgaB by directed evolution, the mutant gene libraries were generated by error-prone polymerase chain reaction (PCR) and deoxyribonucleic acid (DNA) shuffling. Mutants with high thermostability were screened by a simple method based on agarase-degrading agar to generate a clear zone on the agar plate. A mutant S2 was obtained through two rounds of error-prone PCR and a single round of DNA shuffling and selection. It has higher thermostability and slightly increased catalytic activity than wild-type AgaB. Melting temperature (T(m)) of S2, as determined by circular dichroism, is 4.6 degrees C higher than that of wild-type AgaB, and the half-life of S2 is 350 min at 40 degrees C, which is 18.4-fold longer than that of the wild-type enzyme. Saturation mutagenesis and hydrophobic cluster analysis indicated that hydrophobic interaction might be the key factor that enhances the enzyme stability.

Enhancing the thermostability of a novel beta-agarase AgaB through directed evolution.

Pour augmenter la thermostabilit&eacute; de b&ecirc;ta-l&#39;agarase AgaB par &eacute;volution dirig&eacute;e, les banques de g&egrave;nes mutants ont &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;r&eacute;s par erreurs polymerase chain reaction (PCR) et le m&eacute;lange de l&#39;acide d&eacute;soxyribonucl&eacute;ique (ADN). Mutants avec haute thermostabilit&eacute; ont &eacute;t&eacute; cribl&eacute;s par une m&eacute;thode simple bas&eacute;e sur g&eacute;lose d&eacute;gradant l&#39;agarase pour g&eacute;n&eacute;rer une zone claire sur la g&eacute;lose. Un mutant S2 a &eacute;t&eacute; obtenu gr&acirc;ce &agrave; deux s&eacute;ries d&#39;erreurs PCR et un rond simple de l&#39;ADN de brassage et de s&eacute;lection. Il a la thermostabilit&eacute; plus &eacute;lev&eacute;e et une activit&eacute; catalytique que sauvage AgaB a l&eacute;g&egrave;rement augment&eacute;. Fusion de temp&eacute;rature (T(m)) de S2, telle que d&eacute;termin&eacute;e par dichro&iuml;sme circulaire, est de 4,6 degr&eacute;s C plus &eacute;lev&eacute;e que celle du type sauvage AgaB et la demi-vie du S2 sont 350 min &agrave; 40 degr&eacute;s C, 18.4-fold plus longue que celle de l&#39;enzyme de type sauvage. Mutag&eacute;n&egrave;se de saturation et l&#39;analyse typologique hydrophobe a indiqu&eacute; que l&#39;interaction hydrophobe peut &ecirc;tre le facteur cl&eacute; qui am&eacute;liore la stabilit&eacute; de l&#39;enzyme.

Renforcer la thermostabilit&eacute; d&#39;un AgaB nouveaux b&ecirc;ta-l&#39;agarase par &eacute;volution dirig&eacute;e.

Um die Temperaturstabilit&auml;t von Beta-Agarase AgaB durch gerichtete Evolution zu erh&ouml;hen, wurden die mutierten Gen-Bibliotheken von fehleranf&auml;lligen Polymerase-Kettenreaktion (PCR) und Mischen von Desoxyribonukleins&auml;ure (DNA) generiert. Mutanten mit hohen Thermostabilit&auml;t wurden durch eine einfache Methode, basierend auf Agarase-erniedrigende Agar eine klare Zone auf der Agarplatte generieren gezeigt. Eine Mutante S2 wurde in zwei fehleranf&auml;llige PCR und DNA mischen und Auswahl einer einzelnen Runde erhalten. Es hat h&ouml;here Thermostabilit&auml;t und etwas h&ouml;herer katalytische Aktivit&auml;t als Wildtyp AgaB. Schmelztemperatur (T(m)) von S2, festgelegt durch Circulardichroismus, ist 4.6C Grad h&ouml;her als die von Wildtyp AgaB und die Halbwertszeit von S2 350 min bei 40 Grad C, die 18.4-fold l&auml;nger als die des Enzyms Wildtyp. S&auml;ttigung Mutagenese und hydrophobe Clusteranalyse erkl&auml;rt, dass hydrophobe Interaktion der entscheidende Faktor sein k&ouml;nnte, der die Enzym-Stabilit&auml;t verbessert.

Verbesserung der Temperaturstabilit&auml;t von einer neuartigen Beta-Agarase-AgaB durch gerichtete Evolution.

Per aumentare la termostabilit&agrave; di beta-il agarase AgaB diretta evoluzione, le librerie gene mutante sono state generate da error-prone polymerase chain reaction (PCR) e mischiare acido deossiribonucleico (DNA). Mutanti con alta termostabilit&agrave; sono state vagliate da un semplice metodo basato sull&#39;agar il agarase-degradanti per generare una zona chiara sulla piastra di agar. Un mutante S2 &egrave; stato ottenuto attraverso due turni di error-prone PCR e un singolo tondo di DNA shuffling e selezione. Ha pi&ugrave; alta termostabilit&agrave; e leggermente aumentata attivit&agrave; catalitica di AgaB wild-type. Fusione temperatura (T(m)) di S2, come determinato da Dicroismo circolare, &egrave; 4,6 gradi C superiore a quella del selvaggio-tipo AgaB e il tempo di dimezzamento di S2 &egrave; 350 min a 40 gradi C, che &egrave; 18.4-fold pi&ugrave; lungo di quello dell&#39;enzima wild-type. Mutagenesi di saturazione e analisi dei cluster idrofobo indicato che interazione idrofoba potrebbe essere il fattore chiave che migliora la stabilit&agrave; dell&#39;enzima.

Migliorare la termostabilit&agrave; di un romanzo beta-il agarase AgaB attraverso l&#39;evoluzione diretta.

&#x9032;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; agarase AgaB &#x306E;&#x71B1;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA; &#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC; (PCR) &#x3068;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x9178; &#xFF08;DNA&#xFF09; &#x3092;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D5;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x8010;&#x71B1;&#x6027;&#x3068;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F; agarase &#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x5BD2;&#x5929;&#x5BD2;&#x5929;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E0A;&#x6620;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DF;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C8; S2 &#x306E;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3084;&#x3059;&#x3044; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; PCR &#x304A;&#x3088;&#x3073; DNA &#x30B7;&#x30E3;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x8010;&#x71B1;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3061;&#x3088;&#x308A;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; AgaB &#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FAE;&#x5897;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6EB6;&#x878D;&#x6E29;&#x5EA6; (T(m)) &#x306E;&#x5186;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B; S2&#x3001;4.6 &#x5EA6; C S2 &#x306E;&#x534A;&#x6E1B;&#x671F;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; AgaB &#x306E; 18.4-fold &#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x9175;&#x7D20;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9577;&#x3044; 40 &#x2103; &#x3067; 350 &#x5206;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x98FD;&#x548C;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3068;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x6790;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; agarase AgaB &#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x71B1;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C1;&#xC811;&#xB41C; &#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCA0;&#xD0C0; agarase Agab&#xC758; &#xB0B4;&#xC5F4;&#xC131;&#xC744; &#xB192;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC624;&#xB958;&#xAC00; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; (PCR)&#xACFC; deoxyribonucleic &#xC0B0; (DNA) &#xB354;&#xBBF8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;. &#xB192;&#xC740; &#xB0B4;&#xC5F4;&#xC131;&#xACFC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; agarase &#xC800;&#xD558; agar agar &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC601; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; S2 &#xC624;&#xB958;&#xAC00; 2 &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5BB;&#xC740; PCR &#xBC0F; DNA &#xAC78;&#xC5B4; &#xAC14;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xD55C; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;. &#xB192;&#xC740; &#xB0B4;&#xC5F4;&#xC131; &#xBC0F; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; AgaB &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC57D;&#xAC04; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6A9;&#xC735; &#xC628;&#xB3C4; (T(m)) S2, &#xC6D0;&#xD615; &#x9EC4; &#xC815;&#xD55C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; Agab&#xACFC; s 2&#xC758; &#xBC18;&#xAC10;&#xAE30;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; 18.4-fold &#xC774;&#xC0C1; 40&#xB3C4; c 350 &#xBD84; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; 4.6&#xB3C4; C&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC44;&#xB3C4; mutagenesis &#xBC0F; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xBD84;&#xC11D; &#xB098;&#xD0C0;&#xB09C; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xB420; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C1;&#xC811;&#xB41C; &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBCA0;&#xD0C0;-agarase Agab&#xC758; &#xB0B4;&#xC5F4;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1;.

Para aumentar la termoestabilidad de beta-agarase AgaB por evoluci&oacute;n dirigida, las bibliotecas del gen mutante fueron generadas por la reacci&oacute;n en cadena de errores de la polimerasa (PCR) y el &aacute;cido desoxirribonucleico (ADN) arrastrando los pies. Mutantes con alta termoestabilidad fueron defendidos por un m&eacute;todo simple basado en agar agarase-degradantes para generar una zona clara en la placa de agar. Un mutante S2 se obtuvo a trav&eacute;s de dos rondas de error-prone PCR y una sola ronda de ADN barajando y selecci&oacute;n. Tiene mayor termoestabilidad y aument&oacute; ligeramente la actividad catal&iacute;tica que salvaje-tipo AgaB. Fusi&oacute;n de temperatura (T(m)) de S2, seg&uacute;n lo determinado por dicro&iacute;smo circular, es 4.6 grados C superior a la de tipo salvaje AgaB y la vida media de S2 son 350 min a 40 grados C, que es 18.4-fold mayor que el de la enzima de tipo salvaje. Mutag&eacute;nesis de saturaci&oacute;n y an&aacute;lisis cluster hidrof&oacute;bico indicaron que la interacci&oacute;n hidr&oacute;foba podr&iacute;a ser el factor clave que aumenta la estabilidad de la enzima.

Mejora de la termoestabilidad de una novela de beta-agarase AgaB a trav&eacute;s de la evoluci&oacute;n dirigida.

&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x793E;&#x4F1A;&#x884C;&#x4E3A;&#x88AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x901A;&#x8FC7;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F88;&#x591A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x6606;&#x866B;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x5316;&#x5B66;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x793E;&#x4F1A;&#x7EBF;&#x7D22; &#xFF08;&#x901A;&#x5E38;&#x79F0;&#x4E3A;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x9694;&#x79BB;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D1;&#x5C04;&#x9065;&#x611F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7281;&#x9F3B;&#x5668;&#x5B98;&#x9020;&#x6210;&#x96CC;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x7EBF;&#x7D22; [Nodari&#xFF0C;F.&#x3001; &#x4E2D;&#x5357;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5927;&#x5B66; &#xFF08;2008 &#x5E74;&#xFF09; J.Neurosci.28&#x3001; 6407 6418]&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x53CA;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x8D28;&#x8C31;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x4E32;&#x8054;&#x56DB;&#x6781;&#x3001; &#x591A;&#x9636;&#x6BB5;&#x7EBF;&#x6027;&#x79BB;&#x5B50;&#x9631;&#x3001; &#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F; ESI &#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; (1) H &#x548C; (13) C &#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x5B66;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x76F8;&#x5173;&#x7EA2;&#x5916;&#x5149;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3001; &#x603B;&#x76F8;&#x5173;&#x5149;&#x8C31;&#x3001; &#x5F02;&#x591A;&#x91CF;&#x5B50;&#x76F8;&#x5E72;&#x548C;&#x8BFA;&#xFF0C;H D &#x4EA4;&#x6362;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x3001; 4-pregnene-11beta,20,21-triol-3-one 21-&#x786B;&#x9178; (I) (C20 &#x5728;&#x914D;&#x7F6E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63A8;&#x65AD;) &#x548C; 4-&#x753E;-11beta21-&#x4E8C;&#x9187;-3,20-&#x8FEA;&#x5965;&#x5185; 21-&#x786B;&#x9178; &#xFF08;&#x4E8C;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x5B58;&#x5728;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x6027;&#x522B;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x7C7B;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x793E;&#x4F1A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x6FC0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5171;&#x8F6D;&#x540E;, &#x627F;&#x62C5;&#x65B0;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8F93;&#x9001;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x548C;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9F20;&#x6807;&#x9065;&#x611F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

In many species, social behavior is organized via chemical signaling. While many of these signals have been identified for insects, the chemical identity of these social cues (often called pheromones) for mammals is largely unknown. We recently isolated these chemical cues that caused firing in the pheromone-sensing neurons of the vomeronasal organ from female mouse urine [Nodari, F., et al. (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. Here, we report their structural characterization. Mass spectrometric approaches, including tandem quadrupole, multiple-stage linear ion trap, high-resolution mass spectrometry, and H-D exchange followed by ESI mass spectrometry, along with (1)H and (13)C nuclear magnetic resonance spectroscopy, including two-dimensional correlation spectroscopy, total correlation spectroscopy, heteronuclear multiple-quantum coherence, and NOE, were used to identify two sulfated steroids, 4-pregnene-11beta,20,21-triol-3-one 21-sulfate (I) (the configuration at C20 was not deduced) and 4-pregnene-11beta,21-diol-3,20-dione 21-sulfate (II), whose presence is sex-specific. The identification of this novel class of mammalian social signaling compounds suggests that steroid hormones, upon conjugation, assume a new biological role, conveying information about the organism's identity and physiological state.

Structural characterization of sulfated steroids that activate mouse pheromone-sensing neurons.

Chez de nombreuses esp&#xE8;ces, le comportement social est organis&#xE9; via la signalisation chimique. Alors que beaucoup de ces signaux ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s pour les insectes, l&#x26;#39;identit&#xE9; chimique de ces indices sociaux (souvent appel&#xE9; ph&#xE9;romones) pour les mammif&#xE8;res est en grande partie inconnue. Nous avons r&#xE9;cemment isol&#xE9; ces signaux chimiques qui ont caus&#xE9; de tir dans les neurones de ph&#xE9;romones de d&#xE9;tection de l&#x26;#39;organe vom&#xE9;ronasal de l&#x26;#39;urine de souris femelles [Nodari, F., et al. (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. Nous rapportons ici leur caract&#xE9;risation structurale. Masse par spectrom&#xE9;trie, y compris les approches tandem quadripolaire, &#xE0; &#xE9;tages multiples pi&#xE8;ge &#xE0; ions lin&#xE9;aire, la spectrom&#xE9;trie de masse &#xE0; haute r&#xE9;solution, et HD &#xE9;change suivie par spectrom&#xE9;trie de masse ESI, avec (1) H et (13) C spectroscopie de r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique nucl&#xE9;aire, comprenant deux dimensions La spectroscopie de corr&#xE9;lation, la spectroscopie de corr&#xE9;lation totale, h&#xE9;t&#xE9;ronucl&#xE9;aire multiples coh&#xE9;rence quantique, et NOE, ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour identifier les deux st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s, 4-pr&#xE9;gn&#xE8;ne-11beta ,20,21-triol-3-one 21-sulfate (I) (la configuration au C20 n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;duite) et 4-pr&#xE9;gn&#xE8;ne-11b&#xE9;ta ,21-diol-3 ,20-dione 21-sulfate de (II), dont la pr&#xE9;sence est sp&#xE9;cifique du sexe. L&#x26;#39;identification de cette nouvelle classe de mammif&#xE8;res sociaux compos&#xE9;s de signalisation sugg&#xE8;re que les hormones st&#xE9;ro&#xEF;des, sur la conjugaison, assumer un nouveau r&#xF4;le biologique, transmettre des informations sur l&#x26;#39;identit&#xE9; de l&#x26;#39;organisme et l&#x26;#39;&#xE9;tat physiologique.

Caract&#xE9;risation structurale des st&#xE9;ro&#xEF;des sulfat&#xE9;s Cela Activer souris ph&#xE9;romone-d&#xE9;tection neurones

Bei vielen Arten ist Sozialverhalten &uuml;ber chemische Signale organisiert. W&auml;hrend viele dieser Signale f&uuml;r Insekten identifiziert wurden, ist die chemische Identit&auml;t der diese soziale Hinweise (oft als Pheromone) f&uuml;r S&auml;ugetiere weitgehend unbekannt. Wir vor kurzem lokalisiert diese chemische Hinweise, die feuern die Neuronen Pheromon-Sensorik des Vomeronasal Organs aus weiblichen Maus Urin verursacht [Nodari, F., Et Al. (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. Hier berichten wir &uuml;ber ihre strukturelle Charakterisierung. Massenspektrometrische Ans&auml;tze, einschlie&szlig;lich Tandem Quadrupol, Multiple-B&uuml;hne lineare Ionenfalle, hochaufl&ouml;sende Massenspektrometrie und H-D-Austausch, gefolgt von ESI-Massenspektrometrie, zusammen mit (1) H und (13) C KERNRESONANZSPEKTROSKOPIE, einschlie&szlig;lich zweidimensionaler Korrelation Spektroskopie, Gesamt-Korrelations-Spektroskopie, heteronukleare Multiple-Quantum Koh&auml;renz und NOE, wurden verwendet, um zwei sulfatierte Steroide, 4-pregnene-11beta,20,21-triol-3-one 21-Sulfat (I) (die Konfiguration zum C20 wurde nicht abgeleitet) und 4-Pregnene-11beta identifizieren, 21-Diol-3,20-Dione 21-Sulfat (II), deren Anwesenheit Geschlecht-spezifisch ist. Die Identifizierung dieser neuartige Klasse von S&auml;ugetier-soziale Verbindungen Signalisierung zufolge Steroidhormone, bei der Konjugation, eine neue biologische Rolle, Informationsvermittlung &uuml;ber Identit&auml;t und physiologischen Zustand des Organismus &uuml;bernehmen.

Strukturelle Charakterisierung der sulfatierte Steroide, die Maus Pheromon-Sensorik Neuronen aktivieren.

In molte specie, comportamento sociale &egrave; organizzato attraverso segnali chimici. Mentre molti di questi segnali sono stati identificati per gli insetti, l&#39;identit&agrave; chimica di questi spunti sociali (spesso chiamato feromoni) per i mammiferi &egrave; in gran parte sconosciuto. Abbiamo recentemente isolati questi spunti chimici che ha causato la cottura nei neuroni feromone di rilevamento dell&#39;organo vomeronasale dall&#39;urina di topo femmina [Nodari, F., et al (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. Riportiamo qui, loro caratterizzazione strutturale. Approcci spettrometrico di massa tandem quadrupolo, multiple-fase lineare trappola ionica, spettrometria di massa ad alta risoluzione e cambio H-D seguita dalla spettrometria di massa ESI, insieme a (1) H e spettroscopia di risonanza magnetica nucleare di C (13), spettroscopia di correlazione bidimensionale, spettroscopia totale di correlazione, coerenza quantistica pi&ugrave; eteronucleari e NOE, sono stati utilizzati per identificare i due steroidi solfati, 4-pregnene-11beta,20,21-triol-3-one 21-solfato (I) (non &egrave; stata dedotta la configurazione a C20) e 4-pregnene-11beta, 21-diolo-3,20-dione 21-solfato (II), di cui presenza &egrave; sex-specific. L&#39;identificazione di questa classe di composti di segnalazione sociale dei mammiferi romanzo suggerisce che gli ormoni steroidei, alla coniugazione, assumono un nuovo ruolo biologico, trasmettere informazioni circa l&#39;identit&agrave; e stato fisiologico dell&#39;organismo.

Caratterizzazione strutturale di solfato steroidi che attivano i neuroni di feromone-sensing mouse.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x884C;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#xFF08;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x96CC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5C3F;[Nodari&#x3001;F.&#x3089;&#x304B;&#x3089;&#x92E4;&#x9F3B;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x6027;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3092;&#x611F;&#x77E5;&#x3059;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x767A;&#x706B;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08;2008&#xFF09;J.&#x795E;&#x7D4C;&#x3002; 28&#x3001;6407&#x304B;&#x3089;6418]&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x56DB;&#x91CD;&#x6975;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x6BB5;&#x306E;&#x30EA;&#x30CB;&#x30A2;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3001;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;HD&#x4EA4;&#x63DB;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#xFF08;1&#xFF09;H&#xFF08;13&#xFF09;C&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;ESI&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x76F8;&#x95A2;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3001;&#x5168;&#x76F8;&#x95A2;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3001;&#x7570;&#x7A2E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x91CF;&#x5B50;&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x3001;NOE&#x306F;&#x3001;4 pregnene-11beta ,20,21-&#x30C8;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;-3-1 21-&#x786B;&#x9178;&#x5869;&#xFF08;I&#xFF09;&#xFF08;C20&#x3067;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#xFF09;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x304C;&#x6027;&#x5225;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x3067;&#x3042;&#x308B;4-pregnene-11beta ,21-&#x30B8;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;-3,20  - &#x30B8;&#x30AA;&#x30F3;21-&#x786B;&#x9178;&#x5869;&#xFF08;II&#xFF09;&#x3001;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x63A5;&#x5408;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x60C5;&#x5831;&#x3068;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x4F1D;&#x3048;&#x308B;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x611F;&#x77E5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xD589;&#xB3D9; &#xD654;&#xD559; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xACE4;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xC2E0;&#xD638; (&#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xC774; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;)&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC544;&#xB2D9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5EC;&#xC131; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC18C;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; vomeronasal &#xAE30;&#xAD00;&#xC758; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xC774; &#xD654;&#xD559; &#xC2E0;&#xD638; &#xC808;&#xC5F0; [Nodari, F., &#xC678;. (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0E0;&#xB364; quadrupole, &#xB2E4;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC120;&#xD615; &#xC774;&#xC628; &#xD2B8;&#xB7A9;, &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; H D &#xAD50;&#xD658; (1) H &#xD568;&#xAED8; ESI &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC0C1;&#xAD00; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;, &#xCD1D; &#xC0C1;&#xAD00; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;, heteronuclear &#xB2E4;&#xC911; &#xC591;&#xC790; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;&#xACFC; &#xB178;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; (13) C &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xC811;&#xADFC; &#xB450; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;, 4-pregnene-11beta,20,21-triol-3-one 21-&#xD669;&#xC0B0; (I) (c 20&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xCD94;&#xB860; &#xD558;&#xC9C0;) &#xBC0F; 4-pregnene-11beta &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;21-diol-3, 20-&#xB514;&#xC624;&#xB124; 21-&#xD669;&#xC0B0; (2 &#xCC28;), &#xADF8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xC139;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xC2E0;&#xD638; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758;&#xC774; &#xC18C;&#xC124;&#xC740; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC81C;&#xC548; &#xD65C;&#xC6A9;, &#xC2DC; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xBA85;&#xCCB4;&#xC758; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC804;&#xB2EC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB274;&#xB7F0;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; sulfated &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

En muchas especies, el comportamiento social se organiza a trav&#xE9;s de se&#xF1;ales qu&#xED;micas. Si bien muchas de estas se&#xF1;ales han sido identificados por los insectos, la identidad qu&#xED;mica de estas se&#xF1;ales sociales (a menudo llamadas feromonas) para los mam&#xED;feros es en gran parte desconocido. Recientemente hemos aislado estas se&#xF1;ales qu&#xED;micas que causaron fuego en las neuronas de detecci&#xF3;n de feromonas-el &#xF3;rgano vomeronasal de la orina de rat&#xF3;n hembra [Nodari, F., et al. (2008) J. Neurosci. 28, 6407-6418]. Aqu&#xED; reportamos la caracterizaci&#xF3;n estructural. Masa de espectrometr&#xED;a de enfoques, incluyendo t&#xE1;ndem cuadrupolo, de m&#xFA;ltiples etapas de trampa de iones lineal de alta resoluci&#xF3;n, espectrometr&#xED;a de masas, y el intercambio HD seguida de espectrometr&#xED;a de masas ESI, junto con (1) H y (13) C espectroscopia de resonancia magn&#xE9;tica nuclear, incluidos los de dos dimensiones espectroscopia de correlaci&#xF3;n, la espectroscopia de correlaci&#xF3;n total, la coherencia heteronuclear m&#xFA;ltiple cu&#xE1;ntica, y NOE, se utilizaron para identificar dos esteroides sulfatados, 4-pregneno-11beta ,20,21-triol-3-21-un sulfato (I) (la configuraci&#xF3;n en C20 Se deduce que no) y 4-pregneno-11beta ,21-diol-3 ,20-diona 21-sulfato (II), cuya presencia es espec&#xED;fica de un sexo. La identificaci&#xF3;n de esta nueva clase de compuestos de mam&#xED;feros sociales de se&#xF1;alizaci&#xF3;n sugiere que las hormonas esteroides, a la conjugaci&#xF3;n, asumir un papel biol&#xF3;gico nuevo, la transmisi&#xF3;n de informaci&#xF3;n sobre la identidad del organismo y el estado fisiol&#xF3;gico.

Caracterizaci&#xF3;n estructural de esteroides sulfatados que activar el rat&#xF3;n feromonas las neuronas sensibles al

&#x82E5;&#x8981;&#x83B7;&#x53D6;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x6709;&#x5229;&#x7279;&#x8272;&#x7684;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5BC6;&#x7801;&#x5B50;&#x4F18;&#x5316;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5F17;&#x52B3;&#x5730;&#x67B8;&#x6A7C;&#x9178;&#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x6BD5;&#x8D64;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x8F6C;&#x5165;&#x3002;&#x5C0F;&#x89C4;&#x6A21;&#x8868;&#x8FBE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x6D3B;&#x6027;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7528;&#x4E8E;&#x5C4F;&#x5E55;&#x6B63;&#x9762;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; Ni&sup2; +-NTA &#x743C;&#x8102;&#x7CD6;&#x4EB2;&#x548C;&#x67F1;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x523B;&#x753B;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x690D;&#x9178;&#x9176; (r &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09; &#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; ph &#x503C; optima 2.5 &#x548C; 4.5 &#x548C;&#x6700;&#x4F73;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5728; 50 &deg; c&#x3002;&#x5B83;&#x4FDD;&#x7559;&#x8D85;&#x8FC7; 80%&#x540E;&#x6839;&#x636E;&#x5404;&#x79CD;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A; (pH 1.5-8.0) &#x5728; 37 &deg; C 1 h &#x6B63;&#x5728;&#x5B75;&#x5316;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3001; &#x516C;&#x91CC;&#x548C; Vmax r &#x57FA;&#x56E0;&#x4E3A;&#x94A0;&#x690D;&#x9178;&#x503C;&#x662F; 2,072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;&#x3001; 0.52 &plusmn; 0.04 m m &#x548C; 2,380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E; K +&#x3001; Ca&sup2; + Mg&sup2; + 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF0C;&#x5927;&#x4E3A;&#x6539;&#x5584;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x6027;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x9972;&#x6599;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x524D;&#x666F;&#x3002;

&#x9178;&#x7A33;&#x5B9A;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x4ECE;&#x5F17;&#x52B3;&#x5730;&#x67B8;&#x6A7C;&#x9178;&#x5728;&#x6BD5;&#x8D64;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

To obtain a high level expression of phytase with favorable characteristics, a codon-optimized phytase gene from Citrobacter freundii was synthesized and transferred into Pichia pastoris. Small-scale expression experiments and activity assays were used to screen positive colonies. After purified by NiÂ²+-NTA agarose affinity column, the characterizations of the recombinant phytase were determined. The recombinant phytase (r-phyC) had two distinct pH optima at 2.5 and 4.5 and an optimal temperature at 50 Â°C. It retained more than 80% activity after being incubated under various buffer (pH 1.5-8.0) at 37 Â°C for 1 h. The specific activity, Km, and Vmax values of r-phyC for sodium phytate were 2,072â€‰Â±â€‰18 U mgâ»Â¹, 0.52â€‰Â±â€‰0.04 mM, and 2,380â€‰Â±â€‰84 U mgâ»Â¹ minâ»Â¹, respectively. The enzyme activity was significantly improved by 1 mM of K+, CaÂ²+, and MgÂ²+. These characteristics contribute to its potential application in feed industry.

High level expression of an acid-stable phytase from Citrobacter freundii in Pichia pastoris.

Pour obtenir un haut niveau d&#39;expression de phytase avec caract&eacute;ristiques favorables, un g&egrave;ne de phytase codon optimis&eacute; de Citrobacter freundii a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute; et transf&eacute;r&eacute; dans Pichia pastoris. Des exp&eacute;riences &agrave; petite &eacute;chelle expression et tests d&#39;activit&eacute; ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour d&eacute;pister les colonies positives. Apr&egrave;s purifi&eacute; par Ni&sup2; +-colonne d&#39;affinit&eacute; d&#39;agarose NTA les caract&eacute;risations de la phytase recombinante ont &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;es. La phytase recombinante (r-phyC) avait deux optima pH distinctes &agrave; 2,5 et 4,5 et une temp&eacute;rature optimale &agrave; 50 &deg; C. Il a conserv&eacute; plus de 80 % de l&#39;activit&eacute; apr&egrave;s &ecirc;tre incub&eacute;es sous divers tampon (pH 1,5 &agrave; 8,0) &agrave; 37 &deg; C pendant 1 h. L&#39;activit&eacute; sp&eacute;cifique, Km et Vmax des valeurs de r-phyC de sodium phytate &eacute;taient 2 072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;, 0,52 &plusmn; 0,04 mM et 2 380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;, respectivement. L&#39;activit&eacute; enzymatique a &eacute;t&eacute; significativement am&eacute;lior&eacute;e de 1 mM de K +, Ca&sup2; + et Mg&sup2; +. Ces caract&eacute;ristiques contribuent &agrave; son application potentielle dans l&#39;industrie des aliments.

Haut niveau d&#39;expression d&#39;une phytase acide stable de Citrobacter freundii dans Pichia pastoris.

Um einen high-Level Ausdruck von Phytase mit g&uuml;nstigen Eigenschaften zu erhalten, wurde ein Codon-optimierte Phytase-gen von Citrobacter Freundii synthetisiert und in Pichia Pastoris &uuml;bertragen. Kleine Ausdruck Experimente und Aktivit&auml;ten-Assays wurden verwendet, um positive Kolonien des Bildschirms. Denn durch Ni&sup2; + gereinigt-NTA-Agarose-Affinit&auml;tss&auml;ule, die Charakterisierungen der rekombinanten Phytase wurden ermittelt. Die rekombinanten Phytase (R-PhyC) hatte zwei unterschiedliche pH-Optima bei 2.5 und 4.5 und eine optimale Temperatur bei 50 &deg; C. Sie erhalten mehr als 80 % Aktivit&auml;t nach wird unter verschiedenen Puffer (pH 1,5-8,0) bei 37 &deg; C f&uuml;r 1 h inkubiert. Die spezifische Aktivit&auml;t, Km und Vmax Werte von R-PhyC f&uuml;r Natrium Phytate waren 2.072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;, 0,52 &plusmn; 0,04 mM und 2.380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;, beziehungsweise. Die Enzymaktivit&auml;t wurde von 1 mM K + Ca&sup2; + und Mg&sup2; + deutlich verbessert. Diese Eigenschaften dazu beitragen, ihre m&ouml;gliche Anwendung in der Futtermittelindustrie.

Hohe Ebene Ausdruck einer S&auml;ure-Stable-Phytase aus Citrobacter Freundii in Pichia Pastoris.

Per ottenere un&#39;espressione ad alto livello di fitasi con caratteristiche favorevoli, un gene di fitasi codone-ottimizzato da Citrobacter freundii &egrave; stato sintetizzato e trasferito in Pichia pastoris. Esperimenti su scala ridotta espressione e dosaggi di attivit&agrave; sono stati utilizzati per schermo colonie positivi. Dopo purificato da Ni&sup2; +-colonna di affinit&agrave; NTA dell&#39;agarosi, le caratterizzazioni della fitasi ricombinante sono state determinate. La fitasi ricombinante (r-phyC) avevano due distinti pH optima a 2.5 e 4.5 e una temperatura ottimale a 50 &deg; C. Mantenuto pi&ugrave; di 80% attivit&agrave; dopo essere incubate sotto vari tampone (pH 1.5-8.0) a 37 &deg; C per 1 h. L&#39;attivit&agrave; specifica, Km e Vmax valori di r-phyC per sodio fitato erano 2.072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;, 0,52 &plusmn; 0,04 mM e 2.380 84 &plusmn; U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;, rispettivamente. L&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima &egrave; stato notevolmente migliorato da 1 mM di K +, Ca&sup2; + e Mg&sup2; +. Queste caratteristiche contribuiscono alla sua potenziale applicazione nell&#39;industria alimentare.

Alta espressione di livello di un acido-stabile fitasi da Citrobacter freundii in Pichia pastoris.

&#x826F;&#x597D;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B7;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E; freundii &#x304B;&#x3089;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x30FB;&#x7D44;&#x6210;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x8EE2;&#x9001;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x898F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3092;&#x753B;&#x9762;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C; Ni&sup2; + &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7CBE;&#x88FD;-NTA agarose &#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB; &#x30C6;&#x30A3;&#x30FC; &#x30FB; &#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; (r phyC) 2 &#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x500B;&#x306E; pH &#x30AA;&#x30D7;&#x30C6;&#x30A3;&#x30DE; 2.5 &#x3068; 4.5 &#x3068;&#x6700;&#x9069;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306F; 50 &#x2103; &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4FDD;&#x6301;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC; (pH 1.5 8.0) 37 &#x2103; &#x3067; 1 &#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x5F8C; 80% &#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3001;&#x30AD;&#x30ED;&#x3001;Vmax &#x5024; r-phyC &#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3042;&#x3063;&#x305F; 2,072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;&#x3001;0.52 &plusmn; 0.04 mM &#x3068; 2,380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;K +&#x3001;Ca&sup2; + &#x304A;&#x3088;&#x3073; Mg&sup2; + &#x306E; 1 mM &#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x696D;&#x754C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9178;&#x5B89;&#x5B9A;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; &#x30FB;&#x7D44;&#x6210;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E; freundii &#x304B;&#x3089;&#x3002;

&#xC720;&#xB9AC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; phytase&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; Citrobacter freundii&#xC5D0;&#xC11C; phytase codon&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD569;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; Pichia pastoris&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC2DD; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC740; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Ni&sup2; +&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xD654; &#xD6C4;-NTA agarose &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC5F4;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; phytase&#xC758; characterizations &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; phytase (r phyC) 2.5 &#xBC0F; 4.5&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; pH &#xC635; &#xD2F0; &#xB9C8;&#xC640; 50 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC84;&#xD37C; (pH 1.5-8.0) 1 &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 37 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778; &#xD050;&#xBCA0;&#xC774; &#xD305; &#xB418; &#xACE0; &#xD6C4; 80% &#xD65C;&#xB3D9;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD65C;&#xB3D9;, Km, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Vmax &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; phytate&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; r-Phyc&#xC758; &#xAC12;&#xC740; 2,072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;, 0.52 &plusmn; 0.04 m m &#xBC0F; 2380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;, &#xAC01;&#xAC01;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; 1mm&#xC758; K +, Ca&sup2; + Mg&sup2; +&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE09; &#xC2DD;&#xB41C; &#xC5C5;&#xACC4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;.

&#xC5D0; Pichia pastoris Citrobacter freundii&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0; &#xC131; &#xC548;&#xC815; phytase&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;.

Para obtener una alto nivel expresi&oacute;n de fitasa con caracter&iacute;sticas favorables, un gen de la fitasa cod&oacute;n optimizado de Citrobacter freundii fue sintetizado y trasladado en Pichia pastoris. Expresi&oacute;n peque&ntilde;os experimentos y ensayos de actividad fueron utilizados para detectar colonias positivas. Purificando despu&eacute;s Ni&sup2; +-columna de afinidad de agarosa NTA, las caracterizaciones de la fitasa recombinante se determinaron. La fitasa recombinante (r-Rep&uacute;blica) ten&iacute;a dos optima de distintos pH 2.5 y 4.5 y una temperatura &oacute;ptima a 50 &deg; C. Se conservan m&aacute;s de 80% de actividad despu&eacute;s de ser incubada bajo varios tamp&oacute;n (pH 1.5-8.0) a 37 &deg; C durante 1 hora. La actividad espec&iacute;fica, Km y Vmax valores de r-Rep&uacute;blica de fitato de sodio fueron 2.072 &plusmn; 18 U mg&#x207B;&sup1;, 0,52 &plusmn; 0.04 mM y 2.380 &plusmn; 84 U mg&#x207B;&sup1; min&#x207B;&sup1;, respectivamente. Se mejor&oacute; significativamente la actividad enzim&aacute;tica de 1 mM de K +, Ca&sup2; + y Mg&sup2; +. Estas caracter&iacute;sticas contribuyen a su potencial aplicaci&oacute;n en la industria de los piensos.

Alta nivel expresi&oacute;n de una fitasa &aacute;cido estable de Citrobacter freundii en Pichia pastoris.

&#x4F7F;&#x7528;&#x65B0;&#x578B;&#x7A00;&#x571F;&#x7EDC;&#x5408;&#x7269;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53D1;&#x5149;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x6216;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6280;&#x672F;&#x662F;&#x53D1;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x548C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x662F;&#x5404;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D1;&#x5149;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x6216;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6307;&#x6807;&#x7684;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x4E00;&#x53CC;&#x87AF;&#x5408;&#x914D;&#x4F53; N&#xFF0C;N&#xFF0C;N (1)&#x3001; (1) N-{2&#xFF0C;6-&#x4E8C;&#x5421; (3&#39;-&#x6C28;&#x7532;&#x57FA;-1&#39;-&#x5511;)-4-[N&#xFF0C;N-bis(2-picolyl) &#x6C28;&#x57FA;-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) &#x5728;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x5176; Tb(3+) &#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x662F;&#x975E;&#x5E38;&#x8584;&#x5F31;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x548C;&#x5927;&#x529B;&#x52A0;&#x5F3A;&#x540E;&#x4E0E; Zn(2+) &#x79BB;&#x5B50;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5316;&#x5B66; Tb(3+) &#x57FA;&#x4E8E;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x654F;&#x611F;&#x5668;&#xFF0C;BBATA-Tb(3+)&#xFF0C;Zn(2+) &#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x8BA4;&#x8BE5;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x65B0;&#x5316;&#x5B66;&#x654F;&#x611F;&#x5668; Zn(2+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86; BBATA-Tb(3+) &#x5316;&#x5B66;&#x654F;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x68C0;&#x6D4B; Zn(2+) &#x79BB;&#x5B50;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x73B0;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x7597;&#x6548;&#x548C; Zn(2+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B0;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x5316;&#x5B66;&#x654F;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;

&#x5316;&#x5B66;&#x65B0;&#x578B;&#x94FD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x654F;&#x611F;&#x5668;&#x5185;&#x6E38;&#x79BB; Zn2 + &#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

Time-resolved luminescence detection technique using lanthanide chelates as luminescent probes or sensors is a highly sensitive and widely used tool for the luminescence detections of various biological and bioactive molecules. The essential of this technique is the developments of various functional luminescent probes or sensors that can selectively recognize the biological targets. In this work, a dual-chelating ligand N,N,N(1),N(1)-{2,6-bis(3'-aminomethyl-1'-pyrazolyl)-4-[N,N-bis(2-picolyl)amino-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) has been designed and synthesized. The luminescence of its Tb(3+) chelate is very weak, but can be selectively and strongly enhanced upon reaction with Zn(2+) ions. Thus a Tb(3+) chelate-based luminescent chemosensor, BBATA-Tb(3+), for highly selective and sensitive time-resolved luminescence detection of Zn(2+) ions was developed. To confirm the utility of new chemosensor for the detection of intracellular Zn(2+) ions, the performance of BBATA-Tb(3+) as a chemosensor for time-resolved luminescent imaging detection of Zn(2+) ions in living cells was investigated. The results demonstrated the efficacy and advantage of the new luminescent chemosensor for time-resolved luminescence detection of intracellular Zn(2+) ions.

Development of a novel terbium chelate-based luminescent chemosensor for time-resolved luminescence detection of intracellular Zn2+ ions.

Technique de d&eacute;tection de luminescence r&eacute;solue &agrave; l&#39;aide de ch&eacute;lates de lanthanide luminescents sondes ou capteurs est un outil tr&egrave;s sensible et largement utilis&eacute; pour la d&eacute;tection de la luminescence de diverses mol&eacute;cules biologiques et bioactifs. L&#39;essentiel de cette technique est l&#39;&eacute;volution de diverses sondes luminescentes fonctionnelles ou capteurs qui peuvent reconna&icirc;tre s&eacute;lectivement les cibles biologiques. Dans ce travail, un ligand ch&eacute;latant dual-N, N, N (1), N (1)-{2, 6-bis (3&#39;-aminomethyl-1&#39;-pyrazolyle) -4-[N, N-bis(2-picolyl) amino-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) a &eacute;t&eacute; con&ccedil;u et synth&eacute;tis&eacute;. La luminescence de son ch&eacute;late de Tb(3+) est tr&egrave;s faible, mais peut &ecirc;tre s&eacute;lectivement et fortement am&eacute;lior&eacute;e par r&eacute;action avec les ions Zn(2+). Ainsi, un Tb(3+) bas&eacute; sur ch&eacute;late luminescent senseur, BBATA-Tb(3+), pour la d&eacute;tection de la luminescence de time-resolved hautement s&eacute;lective et sensible des ions Zn(2+) a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;. Pour confirmer l&#39;utilit&eacute; de nouveau senseur pour la d&eacute;tection des ions intracellulaires de Zn(2+), la performance de BBATA-Tb(3+) comme un senseur pour time-resolved luminescent d&#39;imagerie d&eacute;tection des ions Zn(2+) dans les cellules vivantes a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e. Les r&eacute;sultats ont d&eacute;montr&eacute; l&#39;efficacit&eacute; et l&#39;avantage de la nouvelle senseur luminescent pour la d&eacute;tection de la luminescence de r&eacute;solution temporelle des ions intracellulaires de Zn(2+).

D&eacute;veloppement d&#39;un roman de terbium ax&eacute;e sur le ch&eacute;late luminescent senseur pour la d&eacute;tection de la luminescence de r&eacute;solution temporelle des ions Zn2 + intracellulaires.

Zeit aufgel&ouml;st Lumineszenz-Erkennung-Technik, die Verwendung von Lanthanide Chelate als leuchtende Sonden oder Sensoren ist ein hochsensibler und weit verbreitete Werkzeug f&uuml;r die Lumineszenz-Erkennungen verschiedene biologische und bioaktiver Molek&uuml;le. Das Wesentliche dieser Technik ist die Entwicklung der verschiedenen funktionalen leuchtende Sonden oder Sensoren, die selektiv die biologischen Zielen erkennen kann. In dieser Arbeit, ein Dual-Chelat-Ligand N, N, N (1), N (1)-{2,6-Bis (3&#39;-Aminomethyl-1&#39;-Pyrazolyl)-4-[N, N-bis(2-picolyl) amino-Methylenepyridine]} Tetrakis(acetic acid) (BBATA) entwickelt und synthetisiert wurde. Die Lumineszenz von seiner Tb(3+)-Chelat ist sehr schwach, aber kann selektiv und stark durch Reaktion mit Zn(2+)-Ionen verbessert werden. So entwickelte sich eine Tb(3+) Chelat-basierte leuchtende Chemorezeptor, BBATA-Tb(3+), h&ouml;chst selektiv und sensiblen Zeit aufgel&ouml;st Lumineszenz-Nachweis von Zn(2+) Ionen. Um den Nutzen der neuen Chemorezeptor zum Nachweis der intrazellul&auml;ren Zn(2+) Ionen zu best&auml;tigen, wurde die Leistung des BBATA-Tb(3+) als ein Chemorezeptor Zeit aufgel&ouml;st leuchtende bildgebenden Nachweis von Zn(2+) Ionen in lebenden Zellen untersucht. Die Resultate zeigten die Wirksamkeit und Nutzen der neuen leuchtenden Chemorezeptor f&uuml;r Zeit aufgel&ouml;st Lumineszenz Nachweis der intrazellul&auml;ren Zn(2+) Ionen.

Entwicklung eine neuartige Terbium Chelat-basierte leuchtende Chemorezeptor Zeit aufgel&ouml;st Lumineszenz Nachweis von intrazellul&auml;ren Zn2 +-Ionen.

Tecnica di rilevazione Time-resolved luminescenza con chelati lantanidi come sonde luminescenti o sensori &egrave; uno strumento altamente sensibile e ampiamente usato per i rilevamenti di luminescenza di varie molecole biologiche e bioattivi. L&#39;essenziale di questa tecnica &egrave; gli sviluppi di varie sonde luminescenti funzionale o sensori in grado di riconoscere selettivamente i bersagli biologici. In questo lavoro, un ligando dual-chelanti N, N, N (1), N (1)-{2,6-bis (3 - amminometil - 1-pyrazolyl) -4-[N, N-bis(2-picolyl) ammino-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) &egrave; stato progettato e sintetizzato. La luminescenza dei suoi Tb(3+) chelato &egrave; molto debole, ma pu&ograve; essere selettivamente e fortemente migliorata su reazione con gli ioni Zn(2+). Cos&igrave; &egrave; stato sviluppato un Tb(3+) base chelato luminescenti chemosensor, BBATA-Tb(3+), per la rilevazione di luminescenza time-resolved altamente selettivo e sensibile di ioni Zn(2+). Per confermare l&#39;utilit&agrave; del nuovo chemosensor per la rilevazione di ioni intracellulari di Zn(2+), &egrave; stata studiata la performance di BBATA-Tb(3+) come un chemosensor per time-resolved luminescenti imaging rilevazione di ioni Zn(2+) in cellule viventi. I risultati hanno dimostrato l&#39;efficacia e il vantaggio della nuova chemosensor luminescenti per il rilevamento di time-resolved luminescenza di ioni intracellulari di Zn(2+).

Sviluppo di un romanzo terbio chelato-based chemosensor luminescenti per il rilevamento di time-resolved luminescenza di ioni Zn2 + intracellulari.

&#x767A;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5E0C;&#x571F;&#x985E;&#x91D1;&#x5C5E;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x767A;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x767A;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB; &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50; N, N, N (1), N (1)-{2, 6-&#x30D3;&#x30B9; (3 &#39;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB; - 1&#39;-pyrazolyl)-4-[N, N bis(2-picolyl) &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) &#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3066;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E; Tb(3+) &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x767A;&#x5149;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F31;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5F37;&#x304F; Zn(2+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Tb(3+) &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x767A;&#x5149; chemosensor&#x3001;BBATA-Tb(3+)&#x3001;Zn(2+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x9078;&#x629E;&#x30FB;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x767A;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x7528;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; chemosensor &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E; Zn(2+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Zn(2+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x767A;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; chemosensor &#x3068;&#x3057;&#x3066; BBATA-Tb(3+) &#x306E;&#x6027;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x767A;&#x5149;&#x6027; chemosensor &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E; Zn(2+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x767A;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30C6;&#x30EB;&#x30D3;&#x30A6;&#x30E0; &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x767A;&#x5149; chemosensor &#x7D30;&#x80DE;&#x5185; zn 2 + &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x767A;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3002;

&#xBC1C;&#xAD11; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xBC1C;&#xAD11; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xB610;&#xB294; &#xC13C;&#xC11C; &#xB780;&#xD0C0;&#xB118;&#xC871; &#xD0AC;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C;&#xAD11; &#xD0D0;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACE0; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xBC95;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xBC1C;&#xAD11; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xB610;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xC778;&#xC2DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC13C;&#xC11C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;, &#xB4C0;&#xC5BC; &#xD0AC;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xD654; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; N, N, N (1), N (1)-{2, 6-&#xB450;&#xBC88;&#xC9F8; (3&#39;-aminomethyl-1&#39;-pyrazolyl)-4-[methylenepyridine N bis(2-picolyl) &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; N]} tetrakis(acetic acid) (BBATA)&#xB97C; &#xC124;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xD569;&#xC131;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; Tb(3+) chelate &#xBC1C;&#xAD11; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC57D;&#xD55C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; Zn(2+) &#xC774;&#xC628;&#xACFC; &#xBC18;&#xC751; &#xC2DC; &#xAC15;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD55C; Tb(3+) chelate &#xAE30;&#xBC18; &#xBC1C;&#xAD11; chemosensor, BBATA-Tb(3+), Zn(2+) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xBC1C;&#xAD11; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Zn(2+) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; chemosensor &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Zn(2+) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xBC1C;&#xAD11; &#xC601;&#xC0C1; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; chemosensor&#xB85C; Bbata-tb(3+)&#xC758; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Zn(2+) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xBC1C;&#xAD11; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC1C;&#xAD11; chemosensor&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Zn2 + &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xBC1C;&#xAD11; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAD11; chemosensor chelate &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xBE00;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;.

T&eacute;cnica de detecci&oacute;n de luminiscencia resuelta en el tiempo utilizando lant&aacute;nido quelatos como sensores o sondas luminiscentes es una herramienta altamente sensible y ampliamente utilizada para las detecciones de luminiscencia de varias mol&eacute;culas biol&oacute;gicas y bioactivas. Lo esencial de esta t&eacute;cnica es la evoluci&oacute;n de varias sondas luminiscentes funcionales o sensores que pueden reconocer selectivamente los objetivos biol&oacute;gicos. En este trabajo, un ligando quelantes del doble N, N, N (1), N (1)-{2, 6-bis (3&#39;-aminomethyl-1&#39;-compuestos) -4-[N, N-bis(2-picolyl) amino-methylenepyridine]} tetrakis(acetic acid) (BBATA) ha sido dise&ntilde;ado y sintetizado. La luminiscencia de su quelato de Tb(3+) es muy d&eacute;bil, pero puede mejorarse selectivamente y fuertemente a la reacci&oacute;n con los iones del Zn(2+). As&iacute; se desarroll&oacute; una Tb(3+) base de quelato luminiscente chemosensor, BBATA-Tb(3+), para la detecci&oacute;n de tiempo resuelto altamente selectivo y sensible de la luminiscencia de iones Zn(2+). Para confirmar la utilidad de nuevo chemosensor para la detecci&oacute;n de iones intracelulares de Zn(2+), se investig&oacute; el desempe&ntilde;o de BBATA-Tb(3+) como un chemosensor para la detecci&oacute;n de imagen luminiscente resuelta en el tiempo de Zn(2+) iones en las c&eacute;lulas vivas. Los resultados demostraron la eficacia y la ventaja de la nueva chemosensor luminiscente para detecci&oacute;n de luminiscencia resuelta en el tiempo de los iones intracelulares de Zn(2+).

Desarrollo de una novela de terbio basadas en quelato luminiscente chemosensor para detecci&oacute;n de luminiscencia resuelta en el tiempo de iones Zn2 + intracelulares.

&#x51B7;&#x4E3B;&#x52A8;&#x548C;&#x6728;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0; &beta;-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; Marinomonas MWYL1 &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x53CA;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176; (reBglM1) &#x662F;&#x51C0;&#x5316;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x7531; SDS-&#x7EAF;&#x51C0; reBglM1 &#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x540C;&#x610F; (50.6 Da) &#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x503C;&#x3002;&#x6E29;&#x5EA6;&#x548C; pH &#x5BF9;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; optima &#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 40 &deg; C &#x548C; 7.0&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5C55;&#x51FA;&#x7EA6; 20%&#x5728; 5 &deg; C &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; ph &#x503C; 5.5-10.0 &#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x6728;&#x7CD6;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8FBE; 600 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x6548;&#x5E94; (&#x7EA6; 1.45-fold) &#x7EA6; 300 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x662F;&#x79EF;&#x6781;&#x4E0E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x82F7;&#x548C; galactosides &#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x50AC;&#x5316;&#x6548;&#x7387; (k (cat) = 500.5 s(-1)) &#x4E3A; oNPGlc&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x5F81;&#x4F7F;&#x9176;&#x662F;&#x4E3A;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5E94;&#x7528;&#x5F88;&#x6709;&#x5E0C;&#x671B;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x3002;

&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x548C;&#x51B7;&#x4E3B;&#x52A8;&#x548C;&#x6728;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0; &beta;-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x4ECE; Marinomonas MWYL1 &#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

The gene encoding a cold-active and xylose-stimulated Î²-glucosidase of Marinomonas MWYL1 was synthesized and expressed in Escherichia coli. The recombinant enzyme (reBglM1) was purified and characterized. The molecular mass of the purified reBglM1 determined by SDS-PAGE agree with the calculated values (50.6Â Da). Optima of temperature and pH for enzyme activity were 40Â°C and 7.0, respectively. The enzyme exhibited about 20% activity at 5Â°C and was stable over the range of pH 5.5-10.0. The presence of xylose significantly enhanced enzyme activity even at higher concentrations up to 600Â mM, with maximal stimulatory effect (about 1.45-fold) around 300Â mM. The enzyme is active with both glucosides and galactosides and showed high catalytic efficiency (k (cat)Â =Â 500.5Â s(-1)) for oNPGlc. These characterizations enable the enzyme to be a promising candidate for industrial applications.

Expression and characterization of a cold-active and xylose-stimulated Î²-glucosidase from Marinomonas MWYL1 in Escherichia coli.

Le g&egrave;ne codant pour une &beta;-glucosidase froide active et xylose stimul&eacute;e par des Marinomonas MWYL1 a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute; et exprim&eacute; chez Escherichia coli. L&#39;enzyme recombinante (reBglM1) a &eacute;t&eacute; purifi&eacute;e et caract&eacute;ris&eacute;e. La masse mol&eacute;culaire de le reBglM1 purifi&eacute; d&eacute;termin&eacute; par SDS-PAGE d&#39;accord avec les valeurs calcul&eacute;es (50,6 Da). Optima de temp&eacute;rature et de pH pour l&#39;activit&eacute; de l&#39;enzyme &eacute;tait respectivement de 40 &deg; C et 7.0. L&#39;enzyme montre environ 20 % activit&eacute; &agrave; 5 &deg; C et est demeur&eacute;e stable dans la gamme de pH 5.5-10.0. La pr&eacute;sence du xylose am&eacute;lior&eacute; significativement l&#39;activit&eacute; enzymatique m&ecirc;me &agrave; des concentrations plus &eacute;lev&eacute;es jusqu&#39;&agrave; 600 mM, avec maximale stimulateur effet (environ 1.45-fold) autour de 300 mM. L&#39;enzyme est active avec les deux glucosides et les galactosides et a montr&eacute; une efficacit&eacute; catalytique &eacute;lev&eacute;e (k (des entreprises TSAE) = 500.5 s(-1)) pour oNPGlc. Ces caract&eacute;risations activer l&#39;enzyme pour &ecirc;tre un candidat prometteur pour les applications industrielles.

Expression et la caract&eacute;risation d&#39;une froide active et stimul&eacute;e par le xylose &beta;-glucosidase de Marinomonas MWYL1 chez Escherichia coli.

Gen f&uuml;r eine K&auml;lte-aktiven und Xylose-stimuliert &beta;-Glucosidase von Marinomonas MWYL1 wurde synthetisiert und ausgedr&uuml;ckt in Escherichia coli. Das rekombinante Enzym (reBglM1) wurde gereinigt und charakterisiert. Die molare Masse von den gereinigten reBglM1 bestimmt durch SDS-PAGE Stimmen die berechneten Werte (50,6 Da). Optima von Temperatur und pH-Wert f&uuml;r Enzymaktivit&auml;t betrugen 40 &deg; C und 7.0. Das Enzym stellte etwa 20 % Aktivit&auml;t bei 5 &deg; C und &uuml;ber den Bereich von pH-Wert 5,5-10,0 stabil war. Das Vorhandensein von Xylose erheblich verbessert worden Enzym-Aktivit&auml;t auch bei h&ouml;heren Konzentrationen bis zu 600 mM, mit Maximal stimulierende Wirkung (etwa 1.45-fold) etwa 300 mM. Das Enzym ist mit Glukoside und Galactosides aktiv und zeigte hohen katalytischen Effizienz (k (Kat) = 500.5 s(-1)) f&uuml;r oNPGlc. Diese Charakterisierungen aktivieren das Enzym sich als vielversprechender Kandidat f&uuml;r industrielle Anwendungen.

Ausdruck und Charakterisierung von einer K&auml;lte-aktiven und Xylose-stimuliert &beta;-Glucosidase aus Marinomonas MWYL1 in Escherichia coli.

Il gene che codifica per un freddo-attivo e stimolato xilosio &beta;-glucosidasi di Marinomonas MWYL1 &egrave; stato sintetizzato ed espresso in Escherichia coli. L&#39;enzima ricombinante (reBglM1) &egrave; stata purificata e caratterizzata. La massa molecolare del reBglM1 purificato determinato da SDS-PAGE sono d&#39;accordo con i valori calcolati (Da 50,6). Optimum di temperatura e pH per l&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima erano 40 &deg; C e 7.0, rispettivamente. L&#39;enzima esposto circa il 20% attivit&agrave; a 5 &deg; C ed &egrave; stabile nell&#39;intervallo di pH 5.5-10.0. La presenza di xilosio significativamente migliorata l&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima anche a concentrazioni pi&ugrave; elevate fino a 600 mM, con massimo stimolante effetto (circa 1.45-fold) circa 300 mM. L&#39;enzima &egrave; attivo sia con glucosidi e galactosides e ha mostrato ad alta efficienza catalitica (k (gatto) = 500.5 s(-1)) per oNPGlc. Queste caratterizzazioni attivare l&#39;enzima essere un candidato promettente per applicazioni industriali.

Espressione e caratterizzazione di un freddo-attivo e stimolato xilosio &beta;-glucosidasi da Marinomonas MWYL1 in Escherichia coli.

&#x4F4E;&#x6E29;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30AD;&#x30B7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0; &beta;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; Marinomonas MWYL1 &#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x9175;&#x7D20; (reBglM1) &#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;SDS-PAGE &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7CBE;&#x88FD; reBglM1 &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x8A08;&#x7B97;&#x5024; &#xFF08;50.6 Da&#xFF09; &#x3068;&#x306B;&#x540C;&#x610F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30D7;&#x30C6;&#x30A3;&#x30DE;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; pH &#x3068;&#x6E29;&#x5EA6; 40 &#x2103; &#x304A;&#x3088;&#x3073; 7.0 &#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D04; 20 &#xFF05;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x5C55;&#x793A; 5 &#x2103; &#x3067;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068; pH 5.5 10.0 &#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30AD;&#x30B7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3082;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x5F37;&#x5316; 600 mM&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x4FC3;&#x9032;&#x52B9;&#x679C; (&#x7D04; 1.45-fold) &#x7D04; 300 &#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x914D;&#x7CD6;&#x4F53;&#x3068;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x9AD8;&#x89E6;&#x5A92;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; (k (cat) oNPGlc &#x306E; 500.5 s(-1)) =&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x306F;&#x7523;&#x696D;&#x7528;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x5019;&#x88DC;&#x306B;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x7279;&#x6027;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E29;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30AD;&#x30B7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0; &beta;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; Marinomonas MWYL1 &#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3002;

&#xD55C; &#xB0C9; &#xD65C;&#xC131; &#xBC0F; xylose &#xC790;&#xADF9; &beta;-glucosidase Marinomonas mwyl1&#xC758; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xD45C;&#xD604;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (reBglM1)&#xB294; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xC815;&#xC81C; Rebglm1&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xACC4;&#xC0B0;&#xB41C; &#xAC12; (50.6 &#xB2E4;) &#xB3D9;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC628;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Ph&#xC758; &#xC635; &#xD2F0; &#xB9C8;&#xB294; 40 &deg; C &#xBC0F; 7.0, &#xAC01;&#xAC01;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xC804;&#xC2DC; 20% &#xC57D; 5 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; pH 5.5-10.0&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Xylose &#xC874;&#xC7AC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCD5C;&#xB300; 600 m m, &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; stimulatory &#xD6A8;&#xACFC; (&#xC57D; 1.45-fold) &#xC57D; 300 m m. &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131; glucosides&#xC640; galactosides &#xC774;&#xBA70; &#xB192;&#xC740; &#xCD09;&#xB9E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; (k (&#xACE0;&#xC591;&#xC774;) 500.5 s(-1)) Onpglc&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; =. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; characterizations &#xC0B0;&#xC5C5;&#xC6A9; &#xC5B4;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC218; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DD; &#xBC0F; &#xD55C; &#xB0C9; &#xD65C;&#xC131; &#xBC0F; xylose &#xC790;&#xADF9; &beta;-glucosidase Marinomonas mwyl1&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;.

El gene que codifica una &beta;-glucosidasa fr&iacute;o activo y xilosa-estimulado de Marinomonas MWYL1 fue sintetizado y expresado en Escherichia coli. La enzima recombinante (reBglM1) fue purificada y caracterizada. La masa molecular de la reBglM1 purificada determinado por SDS-PAGE de acuerdo con los valores calculados (50,6 Da). Optima de la temperatura y el pH para la actividad enzim&aacute;tica fueron 40 &deg; C y 7.0, respectivamente. La enzima exhibi&oacute; cerca de 20% actividad en 5 &deg; C y se encontraba estable en el rango de pH 5.5-10.0. La presencia de xilosa mejorado significativamente la actividad enzim&aacute;tica incluso en concentraciones m&aacute;s altas hasta 600 mM, con m&aacute;ximas estimulante efecto (aproximadamente 1.45-fold) alrededor de 300 mM. La enzima es activa con gluc&oacute;sidos y galact&oacute;sidos y mostr&oacute; alta eficiencia catal&iacute;tica (k (gato) = 500.5 s(-1)) para oNPGlc. Estas caracterizaciones activar la enzima que un candidato prometedor para aplicaciones industriales.

Xiaoyan Fu

Anatomy and Neurobiology

Washington University School of Medicine

Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium