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Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

BloodCenter of Wisconsin

&#x5C0F;&#x8BF4; 120 kDa &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (ApABP-F1) &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x5206;&#x914D;&#x5230;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5728; subplasma &#x819C;&#x548C;&#x6838;&#x5468;&#x6838;&#x9886;&#x57DF;&#xFF0C;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;ApABP &#x5168;&#x957F; cDNA &#x5305;&#x62EC; 2672&#x5E74;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; 878 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x7ED9;&#x4E88;&#x7406;&#x8BBA; pI &#x503C;&#x4E3A; 5.11 ~ 95 kDa &#x86CB;&#x767D;&#x5F00;&#x653E;&#x8BFB;&#x6846;&#x3002;&#x5B83;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x57DF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF1A; N &#x603B;&#x7AD9; (&#x6B8B;&#x7559; 1-104) &#x6240;&#x8F7D; 1 &#x808C;&#x9499;&#x86CB;&#x767D;&#x540C;&#x6E90; (CH) &#x57DF;&#x540E;, &#x8DDF;&#x4EC5; 1 &#x662F;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x7EC6;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x590D; (FR&#xFF0C;&#x6B8B;&#x7559; 209-324) &#x548C;&#x4E2D;&#x592E;&#x533A;&#x57DF; (&#x6B8B;&#x7559; 344-577&#xFF09; &#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5F88;&#x9AD8;&#x7684;&#x6982;&#x7387;&#x7684;&#x7EBF;&#x5708;&#x76D8;&#x7ED5;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x805A;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x5404;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x900F;&#x9732; ApABP CH &#x57DF;&#x6700;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x9F20;&#x6807;&#x7C7B;&#x4F3C; KIAA0903 &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x800C;&#x6CA1;&#x6709;&#x592A;&#x5927;&#x5173;&#x7CFB;&#x4E3A; filamins &#x6216;&#x76D8;&#x57FA;&#x7F51;&#x67C4;&#x83CC;&#x548C;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x56E0;&#x5B50; (&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;-120&#xFF09; &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684; 25 &#x65E5; CH &#x57DF;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x6811;&#x3002;

&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x53EA;&#x6709; 1 &#x7EC6;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x7EBF;&#x5708;&#x76D8;&#x7ED5;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x65B0;&#x578B;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC; 120 kDa &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

A novel 120 kDa actin-binding protein (ApABP-F1) was found in Amoeba proteus. It was distributed throughout the cytoplasm, mainly in the subplasma membrane and perinuclear-nuclear areas, enriched in actin. The full-length cDNA of ApABP consisted of 2672 nucleotides with an open reading frame of 878 amino acids, giving a ~95 kDa protein with a theoretical pI value of 5.11. It had a novel domain organization pattern: the N terminus (residues 1-104) contained 1 calponin-homology (CH) domain, followed by only 1 region that was homologous to the filamin repeat (FR, residues 209-324), and a central region (residues 344-577) exhibiting a very high probability of coiled-coil formation, probably engaged in the observed protein dimerization. A phylogenetic tree constructed for CH domains from 25 various proteins revealed that the CH domain of ApABP was most related to that of the hypothetical mouse KIAA0903-like protein, whereas not much relationship to either filamins or the gelation factor (ABP-120) of Dictyostelium discoideum and Entamoeba histolytica was found.

A novel Amoeba proteus 120 kDa actin-binding protein with only 1 filamin repeat and a coiled-coil region.

Une prot&eacute;ine de liaison de l&#39;actine roman 120 kDa (ApABP-F1) a &eacute;t&eacute; trouv&eacute;e chez Amoeba proteus. Il a &eacute;t&eacute; distribu&eacute; dans tout le cytoplasme, principalement dans la membrane de la r&eacute;gion et les zones nucl&eacute;aires p&eacute;rinucl&eacute;aires, enrichi &agrave; l&#39;actine. L&#39;ADNc pleine longueur de ApABP comprenait 2672 nucl&eacute;otides avec un cadre de lecture ouvert de 878 acides amin&eacute;s, ce qui donne une prot&eacute;ine ~ 95 kDa dont la valeur th&eacute;orique IP 5.11. Il avait un mod&egrave;le d&#39;organisation domaine roman : l&#39;extr&eacute;mit&eacute; N terminale (r&eacute;sidus 1-104) contenait 1 domaine de calponine-homologie (CH), suivi par seulement 1 r&eacute;gion qui est homologue &agrave; la r&eacute;p&eacute;tition de la filamine (FR, r&eacute;sidus 209-324) et une r&eacute;gion centrale (r&eacute;sidus 344-577) pr&eacute;sentant une tr&egrave;s forte probabilit&eacute; de formation de coiled-coil, probablement engag&eacute;e dans la dim&eacute;risation de la prot&eacute;ine observ&eacute;s. Un arbre phylog&eacute;n&eacute;tique construit pour les domaines CH de 25 que diff&eacute;rentes prot&eacute;ines ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que le domaine CH de ApABP &eacute;tait plus li&eacute; &agrave; celle de la souris hypoth&eacute;tique KIAA0903-like protein, alors que pas beaucoup de relation filamines ou le facteur de g&eacute;lification de Dictyostelium discoideum et Entamoeba histolytica (ABP-120) a &eacute;t&eacute; trouv&eacute;e.

Une roman Amoeba proteus 120 kDa prot&eacute;ine liant l&#39;actine avec seulement 1 filamine r&eacute;p&eacute;tition et une r&eacute;gion coiled-coil.

Amoeba Proteus fand ein Roman 120 kDa Aktin-verbindliches Protein (ApABP-F1). Es war das Zytoplasma, haupts&auml;chlich im Subplasma Membran und perinukle&auml;re-nuklearen Bereich, angereichertes Aktin verteilt. Das in cDNA des ApABP bestand aus 2672 Nukleotide mit einem offenen Leseraster 878 Aminos&auml;uren, geben ein ~ 95-kDa-Protein mit einem theoretischen pI-Wert von 5.11. Es hatte eine neue Dom&auml;ne Organisation Muster: das N-Terminus (R&uuml;ckst&auml;nde 1-104) enthaltenen 1 Calponin-(CH) Homologiegebiet, gefolgt von nur 1 Region das homologe auf das Filamin Repeat (FR, R&uuml;ckst&auml;nde 209-324) war und eine zentrale Region (R&uuml;ckst&auml;nde 344-577) pr&auml;sentiert eine sehr hohe Wahrscheinlichkeit der aufgerollte Spule-Formation, die beobachteten Protein-Dimerisierung wahrscheinlich beteiligt. Eine phylogenetische Stammbaum, konstruiert f&uuml;r CH-Domains von 25, die verschiedene Proteine offenbart, dass die CH-Dom&auml;ne des ApABP am meisten, dass der hypothetische Maus KIAA0903-wie Protein, verbunden war, w&auml;hrend ihre Beziehung nicht viel zu Filamins oder der Gelbildung Faktor (ABP-120) von Dictyostelium Discoideum und Entamoeba Histolytica gefunden wurde.

Eine neuartige Amoeba Proteus 120 kDa Aktin-verbindliches Protein mit nur 1 Filamin wiederholen und eine aufgerollte Spule-Region.

Una romanzo 120 kDa actina-proteina (ApABP-F1) &egrave; stata trovata in Amoeba proteus. Esso &egrave; stato distribuito in tutto il citoplasma, principalmente nelle aree perinucleari-nucleari e membrana subplasma arricchito di actina. Il full-length cDNA di ApABP consisteva di nucleotidi 2672 con un open reading frame di 878 aminoacidi, dando una proteina di kDa ~ 95 con un valore teorico pI del 5.11. Esso aveva un modello di organizzazione del dominio romanzo: il N-terminale (residui 1-104) conteneva 1 dominio calponin-omologia (CH), seguita dalla regione solo 1 che &egrave; stata omologa per la ripetizione della filamina (FR, residui 209-324) e una regione centrale (residui 344-577) esibendo una probabilit&agrave; molto alta di formazione coiled-coil, probabilmente impegnato la dimerizzazione della proteina osservati. Un albero filogenetico costruito per domini CH da 25 che diverse proteine ha rivelato che il dominio CH di ApABP era pi&ugrave; legato a quella del mouse ipotetico proteina KIAA0903-simile, considerando che &egrave; stato trovato non molto rapporto di filamins o il fattore di gelificazione (ABP-120) di Dictyostelium discoideum ed Entamoeba histolytica.

Un romanzo Amoeba proteus 120 kDa actina-binding protein con solo 1 filamina ripetizione e una regione coiled-coil.

&#x5C0F;&#x8AAC; 120 kDa &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (ApABP F1) &#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x30FB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; subplasma &#x819C;&#x3068;&#x6838;&#x6838;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x914D;&#x5E03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;ApABP &#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577; cDNA 2672 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E; ~ 95 kDa &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 5.11 &#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x7684; pI &#x5024;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3066; 878 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x898F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x7D44;&#x7E54;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;: N &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF; &#xFF08;1 104 &#x6B8B;&#x57FA;&#xFF09; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057; &#xFF08;FR&#x3001;&#x6B8B;&#x7559; 209 324) &#x76F8;&#x540C;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x307F; 1 &#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x3068;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9; &#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x78BA;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4E2D;&#x592E;&#x9818;&#x57DF; (&#x6B8B;&#x57FA; 344-577) &#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;1 &#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DD;&#x30CB;&#x30F3; &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC; (CH) &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3002;CH &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30BF;&#x30DE;&#x30DB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30AB;&#x30D3;&#x3068;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x30B2;&#x30EB;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; (ABP-120) &#x306B;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; ApABP &#x306E; CH &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x6700;&#x3082;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; KIAA0903 &#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; 25 &#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x7CFB;&#x7D71;&#x6A39;&#x3002;

&#x65B0;&#x898F;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9; 120 kDa &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x307F; 1 &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9; &#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x9818;&#x57DF;&#x3002;

&#xC18C;&#xC124; 120 kDa &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (ApABP-F1) &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC6B0; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;, subplasma &#xB9C9; perinuclear &#xD575; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB18D;&#xCD95;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC30;&#xD3EC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Apabp&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; cDNA 2672 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xC774;&#xB860;&#xC801;&#xC778; pI &#xAC12;&#xC774; 5.11 ~ 95 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC8FC;&#xB294; 878 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1; &#xD328;&#xD134; &#xD588;&#xB2E4;: N &#xC885;&#xC810; (&#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 1-104) &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB4A4;&#xC5D0; filamin &#xBC18;&#xBCF5; (FR, &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 209-324), &#xB3D9;&#xC885; 1 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xACFC; &#xC911;&#xBD80; &#xC9C0;&#xC5ED; (&#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 344-577) &#xCF54;&#xC77C; &#xCF54;&#xC77C; &#xD615;&#xC131;, &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; dimerization&#xC5D0; &#xC885;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC544;&#xB9C8; &#xD655;&#xB960;&#xC774; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xC2DC; 1 calponin-&#xC0C1; &#xB3D9; (CH) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Apabp&#xC758; CH &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAC00;&#xC0C1; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; KIAA0903 &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBCC4;&#xB85C; &#xAD00;&#xACC4; filamins &#xB610;&#xB294; Dictyostelium discoideum &#xBC0F; Entamoeba histolytica &#xAC94; &#xD654; &#xC694;&#xC778; (ABP-120)&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD600; 25&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC74;&#xC124; phylogenetic &#xD2B8;&#xB9AC;.

&#xC18C;&#xC124; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; proteus 120 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 filamin &#xBC18;&#xBCF5; &#xBC0F; &#xCF54;&#xC77C; &#xCF54;&#xC77C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;.

Una prote&iacute;na de uni&oacute;n a actina novela 120 kDa (ApABP-F1) fue encontrada en la ameba. Fue distribuido por todo el citoplasma, principalmente en las &aacute;reas nucleares perinucleares y membrana de subplasma enriquecido en la actina. El cDNA de longitud completo de ApABP consisti&oacute; en 2672 nucle&oacute;tidos con un marco de lectura abierto de 878 amino&aacute;cidos, dando una prote&iacute;na ~ 95 kDa con un valor de pI te&oacute;rica de 5.11. Ten&iacute;a un patr&oacute;n de organizaci&oacute;n de la novela de dominio: la terminal N (residuos 1-104) Figura 1 dominio calponin-homolog&iacute;a (CH), seguido por s&oacute;lo 1 regi&oacute;n que es hom&oacute;loga a la repetici&oacute;n del filamin (FR, residuos 209-324) y una regi&oacute;n central (344-577 de residuos) que exhibe una muy alta probabilidad de formaci&oacute;n de coiled-coil, probablemente a la dimerizaci&oacute;n de prote&iacute;na observados. Un &aacute;rbol filogen&eacute;tico construido para dominios CH 25 que diversas prote&iacute;nas revelaron que el dominio de la CH de ApABP m&aacute;s correspondi&oacute; a que del rat&oacute;n hipot&eacute;tico prote&iacute;na similar a KIAA0903, mientras que se encontr&oacute; poca relaci&oacute;n filamins o el factor de congelaci&oacute;n (ABP-120) de Dictyostelium discoideum y Entamoeba histolytica.

Una novela Amoeba proteus 120 kDa actinia-prote&iacute;na de uni&oacute;n con s&oacute;lo 1 filamin repetici&oacute;n y una regi&oacute;n coiled-coil.

&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; 130 kDa &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI immunoanalog &#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; ATP &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x548C;&#x5728;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4E2D;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x72B6;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; dynamin &#x4E8C;&#x542B;&#x6C34;&#x75B1;&#x7ED3;&#x6784; colocalized &#x6709;&#x58F3;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x53C2;&#x4E0E;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x80DE;&#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C;&#x7535;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x80F6;&#x4F53;&#x91D1;&#x514D;&#x75AB;&#x6E17;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x900F;&#x9732;&#xFF0C;&#x5728; pinocytotic &#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x6709;&#x58F3;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#xFF0C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI immunoanalog &#x662F;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; pinocytotic &#x6E20;&#x9053;&#x548C; pinocytotic &#x6C34;&#x6CE1;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; phagosomes &#x548C;&#x65B0;&#x5174;&#x541E;&#x566C;&#x676F;&#x5185;&#x53EF;&#x89C1;&#x3002;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI &#x6297;&#x4F53; (&#x5F15;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x6CE8;&#x5C04;) &#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x963B;&#x585E;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x5728;&#x80DE;&#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x3002;&#x4E0E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5904;&#x7406;&#x6709;&#x58F3;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x5F62;&#x6210;&#x5C11; ~ 75 %pinocytotic &#x6E20;&#x9053;&#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x540E;&#x5C11;&#x4E86; ~ 65%&#x56DB;&#x819C;&#x866B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI immunoanalog &#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC; (Pal)&#x3002;&#x3002;

&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI immunoanalog &#x548C;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

Recently, we found a 130-kDa myosin VI immunoanalog in amoeba, which bound to actin in an ATP-sensitive manner and in migrating amoebae colocalized to filamentous actin and dynamin II-containing vesicular structures. To further characterize this protein, we assessed its involvement in amoeba pinocytosis and phagocytosis. Confocal immunofluorescence microscopy and electron microscopy of immunogold-stained cells revealed that, in pinocytotic and phagocytotic amoebae, the myosin VI immunoanalog was visible throughout the cells, including pinocytotic channels and pinocytotic vesicles as well as phagosomes and emerging phagocytic cups. Blocking endogenous protein with anti-porcine myosin VI antibody (introduced into cells by means of microinjection) caused severe defects in pinocytosis and phagocytosis. In comparison with control cells, the treated amoebae formed ~75% less pinocytotic channels and phagocytosed ~65% less Tetrahymena cells. These data indicate that the myosin VI immunoanalog has an important role in pinocytosis and phagocytosis in Amoeba proteus (Pal.).

Involvement of myosin VI immunoanalog in pinocytosis and phagocytosis in Amoeba proteus.

R&eacute;cemment, nous avons trouv&eacute; un immunoanalog de la myosine VI 130 kDa dans amibe, qui est li&eacute;e &agrave; l&#39;actine de mani&egrave;re sensibles &agrave; l&#39;ATP et de la migration amibes &eacute;pididymaire de filaments d&#39;actine et de la dynamine II contenant des structures v&eacute;siculaires. Afin de caract&eacute;riser cette prot&eacute;ine, nous avons &eacute;valu&eacute; son implication dans la pinocytose amibe et phagocytose. La microscopie confocale immunofluorescence et microscopie &eacute;lectronique de cellules immunogold a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que, chez les amibes pinocytose et phagocytose, l&#39;immunoanalog de la myosine VI &eacute;tait visible dans les cellules, y compris les canaux pinocytose et des v&eacute;sicules de pinocytose ainsi phagosomes et nouvelles tasses phagocytaires. Bloquant la prot&eacute;ine endog&egrave;ne avec anticorps VI d&#39;anti-porcine de la myosine (introduit dans les cellules par microinjection) caus&eacute; des malformations graves dans la pinocytose et phagocytose. Par rapport aux h&eacute;maties, les amibes trait&eacute;es forment ~ 75 % moins de canaux pinocytose et phagocyt&eacute;es cellules de Tetrahymena ~ 65 % moins. Ces donn&eacute;es indiquent que la myosine VI immunoanalog a un r&ocirc;le important dans la pinocytose et phagocytose chez Amoeba proteus (Pal.).

Implication de la myosine VI immunoanalog dans la pinocytose et phagocytose chez Amoeba proteus.

Vor kurzem fanden wir eine 130-kDa-Myosin VI-Immunoanalog in Am&ouml;ben, die an Aktin in ATP-Sensitive Weise und Migration gebunden Amoeben colocalized filament&ouml;sen Aktin und Dynamin II-haltigen vesikul&auml;re Strukturen. Zur weiteren Charakterisierung dieses Protein, beurteilen wir ihre Beteiligung an Am&ouml;be Pinozytose und Phagozytose. Konfokale Immunofluoreszenz-Mikroskopie und Elektronenmikroskopie Immunogold-befleckten Zellen ergab, dass, in pinocytotic und phagocytotic Am&ouml;ben, die Myosin VI-Immunoanalog innerhalb der Zellen, einschlie&szlig;lich pinocytotic Kan&auml;le sowie pinocytotic Bl&auml;schen und Phagosomen und aufstrebenden phagozytische Tassen sichtbar. Endogene Protein mit anti-porcine Myosin VI Antik&ouml;rper (eingef&uuml;hrt in Zellen mittels Mikroinjektion) blockieren verursacht schwere M&auml;ngel in Pinozytose und Phagozytose. Im Vergleich zu Steuerelement Zellen die behandelten Amoeben gebildet ~ 75 % weniger pinocytotic Kan&auml;le und phagozytierte ~ 65 % weniger Tetrahymena Zellen. Diese Daten zeigen, dass die Myosin-VI-Immunoanalog eine wichtige Rolle in Pinozytose und Phagozytose in Amoeba Proteus (Pal.) hat.

Einbeziehung von Myosin VI Immunoanalog in Pinozytose und Phagozytose in Amoeba Proteus.

Recentemente, abbiamo trovato un 130-kDa miosina VI immunoanalog nell&#39;ameba, che associata all&#39;actina in maniera ATP-sensibili e nella migrazione amebe colocalized filamentosa actina e dynamin II contenente strutture vescicolari. Per caratterizzare ulteriormente questa proteina, abbiamo valutato il suo coinvolgimento nella pinocitosi ameba e fagocitosi. Microscopia confocale, immunofluorescenza e microscopia elettronica delle cellule immunogold Tinto ha rivelato che, in pinocytotic e phagocytotic amebe, la miosina VI immunoanalog era visibile in tutta le cellule, compresi i canali pinocytotic e vescicole pinocytotic cos&igrave; come phagosomes ed emergenti fagocitaria tazze. Blocco della proteina endogena con anticorpo VI anti-porcine miosina (introdotto nelle cellule mediante Microiniezione) causato gravi difetti nella pinocitosi e fagocitosi. Rispetto alle cellule di controllo, le amebe trattate formano canali pinocytotic ~ 75% in meno e phagocytosed cellule Tetrahymena ~ 65% in meno. Questi dati indicano che la miosina VI immunoanalog ha un ruolo importante nella pinocitosi e fagocitosi in Amoeba proteus (Pal.).

Coinvolgimento della miosina VI immunoanalog in pinocitosi e fagocitosi in Amoeba proteus.

&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;130 kDa &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI immunoanalog &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F; ATP &#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30F3; II &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5C0F;&#x80DE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; pinocytosis &#x3068;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x3078;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x67D3;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x98F2;&#x3068;&#x8CAA;&#x55B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x3067;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI immunoanalog &#x5C0F;&#x80C6;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x98F2;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066; phagosome &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3068;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x65B0;&#x8208;&#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF09; anti-porcine &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI &#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0; pinocytosis &#x3068;&#x8CAA;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x301C; 75 &#xFF05; &#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x5C0F;&#x80C6;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;~ 65 &#xFF05; &#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D2;&#x30E1;&#x30CA;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI immunoanalog pinocytosis &#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x30FB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9; (Pal) &#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI immunoanalog pinocytosis &#x3067;&#x3068;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x30FB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;

&#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; ATP &#xAD6C;&#xBD84; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14;&#xC5D0;&#xC11C; 130 kDa myosin VI immunoanalog &#xBC1C;&#xACAC; amoebae filamentous &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; 2 &#xCC28;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; dynamin &#xB098;&#xB178;&#xBBF8;&#xD130; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; colocalized. &#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xCD94;&#xAC00;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; pinocytosis &#xBC0F; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC1C;&#xC785; &#xD3C9;&#xAC00;. Confocal &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; immunogold &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC9C4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; pinocytotic &#xBC0F; phagocytotic amoebae&#xC5D0;&#xC11C; myosin VI immunoanalog, &#xC140; pinocytotic &#xCC44;&#xB110;, pinocytotic vesicles phagosomes &#xB4F1;&#xACFC; &#xC2E0;&#xD765; phagocytic &#xCEF5;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBCFC; &#xC218;&#xB294; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC0DD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; anti-porcine myosin VI &#xD56D; &#xCCB4; (microinjection&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785;)&#xC640; pinocytosis &#xBC0F; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xCE58;&#xB8CC; amoebae ~ 75% &#xC801;&#xC740; pinocytotic &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; ~ 65 %tetrahymena &#xC140;&#xC744; phagocytosed. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; myosin VI immunoanalog pinocytosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; proteus (Pal)&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Myosin VI immunoanalog pinocytosis&#xC5D0; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; proteus&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;.

Recientemente, encontramos una immunoanalog de miosina VI 130-kDa en Ameba, que limitan a la actina en forma de ATP-sensibles y en migraci&oacute;n amebas colocalized actina filamentosa y Dinamina II que contienen estructuras vesiculares. Para caracterizar esta prote&iacute;na, determinamos su participaci&oacute;n en pinocitosis Ameba y fagocitosis. Microscopia confocal de la inmunofluorescencia y microscopia electr&oacute;nica de las c&eacute;lulas manchadas de immunogold revelaron que, en amebas pinocytotic y phagocytotic, el immunoanalog de miosina VI era visible a lo largo de las c&eacute;lulas, como canales pinocytotic y ves&iacute;culas pinocytotic fagosomas y emergentes fagoc&iacute;ticas tazas. Bloquear la prote&iacute;na end&oacute;gena con anticuerpos de VI de miosina anti-porcine (introducido en las c&eacute;lulas por medio de microinyecci&oacute;n) caus&oacute; defectos severos en pinocitosis y fagocitosis. En comparaci&oacute;n con las c&eacute;lulas del control, las amebas tratadas forman canales pinocytotic ~ 75% menos y hab&iacute;a fagocitado ~ 65% menos c&eacute;lulas de Tetrahymena. Estos datos indican que la miosina VI immunoanalog tiene un papel importante en la pinocitosis y fagocitosis en Ameba (Pal.).

Participaci&oacute;n de miosina VI immunoanalog en pinocitosis y fagocitosis en Ameba.

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5982;&#x808C;&#x8089;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x7C98;&#x9644;&#x3001; &#x80DE;&#x5185;&#x8D29;&#x5356;&#x3001; &#x80DE;&#x8D28;&#x5206;&#x88C2;&#x3001; &#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#x5DF2;&#x51FA;&#x7248;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x62A5;&#x544A;&#x63ED;&#x793A;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x5373;&#x53D1;&#x73B0;&#x6838;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; IC (NMI)&#xFF0C;&#x516D;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; XVIB &#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4EC0;&#x4E48;&#x3002;NMI &#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI &#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6838;&#x5185;&#x5305;&#x6DB5;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4EFD;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x76EE;&#x524D;&#x5BF9;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7535;&#x673A;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;

[&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6838;]&#x3002;

Myosins, actin-dependent molecular motors are expressed in almost all eukaryotic cells where are engaged in a panoply of cellular processes such as muscle contraction, cell migration and adhesion, intracellular trafficking, cytokinesis, endocytosis and secretion. In recent years a number of reports has been published revealing nuclear localization of myosins as well as actin and actin-binding proteins. Namely, nuclear form of myosin IC (NMI), myosin VI, myosin XVIB and myosin XVIIIB were found in nucleus. NMI and myosin VI seem to be involved in gene transcription and possibly intranuclear transport. In this paper, current knowledge on the role of myosin motors in nucleus has been presented.

[Myosins in nucleus].

Myosines, actine-d&eacute;pendante des moteurs mol&eacute;culaires sont exprim&eacute;s dans presque toutes les cellules eucaryotes o&ugrave; sont engag&eacute;s dans une panoplie de processus cellulaires tels que la contraction musculaire, cell migration et adh&eacute;rence, trafic intracellulaire, cytocin&egrave;se, endocytose et la s&eacute;cr&eacute;tion. Ces derni&egrave;res ann&eacute;es un certain nombre de rapports a &eacute;t&eacute; publi&eacute; en r&eacute;v&eacute;lant la localisation nucl&eacute;aire de myosines ainsi que l&#39;actine et des prot&eacute;ines de liaison de l&#39;actine. &Agrave; savoir, forme nucl&eacute;aire de myosine d&#39;IC (NMI), VI de la myosine, la myosine XVIB et myosine XVIIIB trouv&eacute;es dans le noyau. NMI et myosine VI semblent impliqu&eacute;s dans la transcription g&eacute;nique et &eacute;ventuellement intranucl&eacute;aire transport. Dans cet article, les connaissances actuelles sur le r&ocirc;le des moteurs de la myosine dans le noyau a &eacute;t&eacute; pr&eacute;sent&eacute;.

[Myosines noyau].

Myosins, Aktin-abh&auml;ngige molekulare Motoren werden ausgedr&uuml;ckt fast allen eukaryotische Zellen wo in einem Spektrum unterschiedlichster zellul&auml;re Prozesse wie Muskelkontraktion, t&auml;tig sind Handy-Migration und Adh&auml;sion, intrazellul&auml;re Menschenhandel, Zellteilung, Endozytose und Sekretion. In den letzten Jahren wurde eine Reihe von Berichten ver&ouml;ffentlicht offenbart nukleare Lokalisierung des Myosins sowie Aktin und Aktin-bindende Proteine. N&auml;mlich nukleare Form von Myosin IC (NMI), Myosin VI, Myosin XVIB und Myosin XVIIIB im Kern gefunden. NMI und Myosin VI scheinen gen-Transkription und m&ouml;glicherweise intranukle&auml;ren Transport beteiligt. In diesem Papier wurde Aktuelles wissen &uuml;ber die Rolle der Myosin-Motoren im Zellkern dargestellt.

[Myosins Nukleonen].

Myosins, actina-dipendente motori molecolari sono espressi in quasi tutte le cellule eucariote dove sono impegnati in una panoplia di processi cellulari quali la contrazione muscolare, cellule migrazione ed adesione, traffico intracellulare, Citocinesi in, endocitosi e secrezione. Negli ultimi anni &egrave; stato pubblicato un certo numero di rapporti rivelando la localizzazione nucleare di myosins cos&igrave; come actina e proteine actina-associazione. Vale a dire, forma nucleare di miosina di IC (NMI), miosina VI, miosina XVIB e miosina XVIIIB trovate nel nucleo. NMI e miosina VI sembrano essere coinvolti nella trascrizione del gene e possibilmente intranucleari trasporto. In questa carta, sono stata presentata attuali conoscenze sul ruolo della miosina motori nel nucleo.

[Myosins nel nucleo].

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;, &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x7B4B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x304B;&#x3056;&#x308B;&#x306B;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3069;&#x3053;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x63A5;&#x7740;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x52D5;&#x614B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5206;&#x88C2;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FD1;&#x5E74;&#x5831;&#x544A;&#x6570;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x516C;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; IC (NMI)&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; XVIB &#x306E;&#x6838;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; XVIIIB &#x6838;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;NMI &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x6838;&#x5185;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x601D;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;, &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; &#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6838;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x6838;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;]&#x3002;

Myosins, &#xB9D0;&#xB77C; &#xC885;&#xC18D; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; &#xB4F1; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95;, &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC11;&#xC637;&#xC5D0; &#xC885;&#xC0AC; &#xC5B4;&#xB514; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC811;&#xCC29;, &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;, cytokinesis, endocytosis &#xBC0F; &#xBD84; &#xBE44;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; myosins &#xB9D0;&#xB77C; &#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC989;, &#xD575; myosin IC (NMI), myosin VI myosin XVIB &#xC591;&#xC2DD;&#xACFC; myosin XVIIIB &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. NMI&#xC640; myosin VI &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; intranuclear &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xAC8C; &#xB420; &#xAC83; &#xAC19;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB17C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xD575;&#xC758; myosin &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xD604;&#xC7AC; &#xC815;&#xBCF4; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

[&#xD575;&#xC5D0; myosins]&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Miosinas, motores moleculares dependientes de actina se expresan en casi todas las c&eacute;lulas eucariotas donde participan en una serie de procesos celulares como la contracci&oacute;n del m&uacute;sculo, c&eacute;lula migraci&oacute;n y adhesi&oacute;n, tr&aacute;fico intracelular, citocinesis, endocitosis y secreci&oacute;n. En los &uacute;ltimos a&ntilde;os se ha publicado una serie de informes revelando la localizaci&oacute;n nuclear de miosinas como actina y prote&iacute;nas de uni&oacute;n a actina. Es decir, forma nuclear de miosina de IC (NMI), VI de la miosina, miosina XVIB y miosina XVIIIB fueron encontrados en el n&uacute;cleo. NMI y miosina VI parecen estar implicados en la transcripci&oacute;n de genes y transporte posiblemente intranuclear. En este trabajo, se presenta el conocimiento actual sobre el papel de los motores de la miosina en el n&uacute;cleo.

[Miosinas en n&uacute;cleo].

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI (&#x5E02;&#x9762;) &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x5DF2;&#x77E5;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x51CF;&#x53BB;&#x7ED3;&#x675F;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x8FCE;&#x9762;&#x6251;&#x6765;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x5E02;&#x9762;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; IB &#x6216; IIB&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x55DC;&#x94EC;&#x9897;&#x7C92;&#x5206;&#x79BB;&#x725B;&#x9AD3;&#x8D28;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8981;&#x4E0E;&#x9897;&#x7C92;&#x6839;&#x5C16;&#x8868;&#x9762;&#x7D27;&#x5BC6;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5E02;&#x9762;&#x4E5F;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x5185;&#x5927;&#x9F20;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x4F53;&#x3001; &#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x7684;&#x5751;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E5F;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x663E;&#x793A;&#x5E02;&#x9762;&#x526A;&#x63A5;&#x53D8;&#x5F02;&#x4F53;&#x5927;&#x63D2;&#x5165; (LI)&#xFF0C;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x662F;&#x5728; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4EC5;&#x53EF;&#x5BDF;&#x89C9;&#xFF0C;&#x800C;&#x53D8;&#x5F02;&#x4F53;&#x5C0F;&#x63D2;&#x5165; &#xFF08;SI&#xFF09; &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x4E9A;&#x578B;&#x3002;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x9AD3;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E02;&#x9762;&#x662F;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5185;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x56CA;&#x6CE1;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E5F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5185;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;

&#x516D;&#x3001; &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x548C;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x9AD3;&#x8D28;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

Myosin VI (MVI) is the only known myosin walking towards minus end of actin filaments. Here, MVI, but not myosins IB or IIB, was detected in chromaffin granules isolated from bovine medulla and found to be tightly associated with the granule apical surface. MVI also localized to secretory granules within rat pheochromocytoma PC12 cells as well as to the Golgi apparatus, endoplasmic reticulum and clathrin-coated pits. Notably, it was also found in the nucleus. RT-PCR revealed that MVI splice variants with a large insert (LI), characteristic of polarized cells, were barely detectable in PC12 cells, whereas variants with a small insert (SI) were the major isoforms. The presented data indicate that MVI in adrenal medulla cells is engaged in secretory vesicle trafficking within the cytoplasm and possibly also involved in transport within the nucleus.

Myosin VI is associated with secretory granules and is present in the nucleus in adrenal medulla chromaffin cells.

La myosine VI (MVI) est la seule myosine connue marchant vers moins fin des filaments d&#39;actine. Ici, MVI, mais pas les myosines IB ou II, b, a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e dans les granules chromaffines isol&eacute;es du bulbe rachidien bovine et av&eacute;r&eacute; pour &ecirc;tre &eacute;troitement li&eacute;e &agrave; la surface apicale de granule. MVI aussi localis&eacute;e dans les granules de s&eacute;cr&eacute;tion dans la rat ph&eacute;ochromocytome cellules PC12 ainsi quant &agrave; l&#39;appareil de Golgi, le r&eacute;ticulum endoplasmique et le puits clathrin-coated. Notamment, il a &eacute;t&eacute; &eacute;galement constat&eacute; dans le noyau. RT-PCR a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que MVI &eacute;pisser les variantes avec un insert grand (LI), caract&eacute;ristique des cellules polaris&eacute;es, &eacute;taient &agrave; peine d&eacute;tectable dans les cellules PC12, tandis que les variantes avec un petit encart (SI) &eacute;taient les principales isoformes. Les donn&eacute;es pr&eacute;sent&eacute;es indiquent que MVI dans les cellules de la m&eacute;dullosurr&eacute;nale est engag&eacute; dans des v&eacute;sicules s&eacute;cr&eacute;trices traite dans le cytoplasme et &eacute;ventuellement aussi impliqu&eacute; dans le transport dans le noyau.

La myosine VI est associ&eacute;e &agrave; des granules s&eacute;cr&eacute;teurs et est pr&eacute;sente dans le noyau dans les cellules chromaffines de la m&eacute;dullo-surr&eacute;nale.

Myosin VI (MVI) ist die einzige bekannte Myosin zu Fu&szlig; in Richtung minus Ende des Aktin-Filamenten. Hier, wurde MVI, aber nicht Myosins IB oder IIB, festgestellt, in chromaffin K&ouml;rnchen von Rindern Medulla isoliert und fand das Untermodul apikalen Oberfl&auml;che fest zugeordnet werden. MVI auch auf sekretorisches Granulat innerhalb der Ratte Ph&auml;ochromozytom PC12 Zellen als auch hinsichtlich der Golgi-Apparat, Endoplasmatisches Reticulum und Clathrin-beschichtete Gruben lokalisiert. Insbesondere auch im Zellkern ergab. RT-PCR ergab, dass MVI splice-Varianten mit einem gro&szlig;en Einsatz (LI), polarisierten Zellen, waren kaum wahrnehmbar in PC12 Zellen, w&auml;hrend Varianten mit einem kleinen Einsatz (SI) die wichtigsten Isoformen waren. Die pr&auml;sentierten Daten zeigen, dass MVI im Nebennierenmark Zellen sekretorischen Vesikel innerhalb des Zytoplasmas Handel beteiligt und m&ouml;glicherweise auch Transport in den Zellkern beteiligt ist.

Myosin VI ist sekretorisches Granulat zugeordnet und in den Zellkern im Nebennierenmark chromaffin Zellen vorhanden.

Miosina VI (MVI) &egrave; la miosina conosciuta sola camminando verso meno fine di filamenti di actina. Qui, MVI, ma non myosins IB o IIB, &egrave; stato rilevato nei granuli cromaffini isolate da midollo bovino e trovato per essere strettamente associato con la superficie apicale del granulo. MVI anche localizzato in granuli secretori nel feocromocitoma ratto le cellule PC12 per quanto riguarda l&#39;apparato di Golgi, reticolo endoplasmatico e rivestite di clatrina pozzi. In particolare, &egrave; stato anche trovato nel nucleo. RT-PCR ha rivelato che MVI splice varianti con un grande inserto (LI), caratteristico delle cellule polarizzate, erano appena rilevabile nelle cellule PC12, mentre varianti con un piccolo inserto (SI) erano i principali isoforme. I dati presentati indicano che MVI in cellule di midollo surrenale &egrave; impegnato nella vescicola secretoria traffico all&#39;interno del citoplasma e possibilmente anche coinvolta nel trasporto all&#39;interno del nucleo.

Miosina VI &egrave; associata con granuli secretori ed &egrave; presente nel nucleo in cellule cromaffini midollare del surrene.

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI (MVI) &#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x6B69;&#x304F;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MVI&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; IB &#x307E;&#x305F;&#x306F; IIB, &#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30B7;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x9802;&#x7AEF;&#x8868;&#x9762;&#x3068;&#x7DCA;&#x5BC6;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x767A;&#x898B;&#x306E;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x9846;&#x7C92;&#x3067;&#x3002;MVI &#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x88AB;&#x8986;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3001;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3001;PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3082;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8910;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x5185;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x6838;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RT-PCR MVI &#x504F;&#x6975;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x633F;&#x5165; (LI) &#x3068;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#xFF0C; &#x4E3B;&#x8981;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x633F;&#x5165; (SI) &#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x304B;&#x308D;&#x3046;&#x3058;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; MVI &#x526F;&#x814E;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5185;&#x5C0F;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3055;&#x308C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3082;&#x6838;&#x5185;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI &#x306F;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x526F;&#x814E;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Myosin VI (MVI)&#xC740; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; myosin &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xB05D;&#xC744; &#xBE80; &#xAC78;&#xC5B4;&#xAC00;. &#xC5EC;&#xAE30;, MVI, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; myosins IB &#xB610;&#xB294; IIB, &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC18C; &#xBAA8; &#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418; &#xACE0; &#xD600;&#xB05D;&#xACFC; &#xB9BD; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MVI &#xC950; pheochromocytoma PC12 &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB610;&#xD55C; Golgi &#xAE30;&#xAD6C;, endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; clathrin-&#xC785;&#xD788;&#xB294; &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. RT-PCR &#xACF5;&#xAC1C; MVI &#xD070; &#xC0BD;&#xC785; (LI), &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xACFC; &#xC774;&#xCCB4; &#xC811;&#xCC29;, &#xC791;&#xC740; &#xC0BD;&#xC785; (SI)&#xACFC; &#xBCC0;&#xC885; &#xD588;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xC694; isoforms &#xBC18;&#xBA74; &#xAC70;&#xC758; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC2DC; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBD80; &#xC2E0; &#xACE8; &#xC218; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; MVI &#xBD84; &#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xC885;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xD575; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xCC38;&#xC5EC; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Myosin 6 &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xBA70; &#xBD80; &#xC2E0; &#xBAA8; &#xD06C;&#xB86C; &#xCE5C;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294;.

Miosina VI (MVI) es la miosina conocida s&oacute;lo caminando hacia menos final de filamentos de actina. Aqu&iacute;, MVI, pero no miosinas IB o IIB, fue detectada en gr&aacute;nulos cromafines aisladas de m&eacute;dula bovina y encontr&oacute; a asociarse estrechamente con la superficie apical del gr&aacute;nulo. MVI tambi&eacute;n localizado a gr&aacute;nulos secretores dentro de feocromocitoma rata c&eacute;lulas PC12 as&iacute; en cuanto al aparato de Golgi, ret&iacute;culo endopl&aacute;smico y hoyos recubiertos de clatrina. En particular, se encontr&oacute; tambi&eacute;n en el n&uacute;cleo. RT-PCR revel&oacute; que MVI empalme variantes con una gran inserci&oacute;n (LI), caracter&iacute;stica de las c&eacute;lulas polarizadas, eran apenas perceptible en las c&eacute;lulas PC12, mientras que las variantes con un inserto peque&ntilde;o (SI) eran las principales isoformas. Los datos presentados indican que MVI en las c&eacute;lulas de la m&eacute;dula suprarrenal est&aacute; enfrascada en ves&iacute;culas secretoras tr&aacute;fico dentro del citoplasma y posiblemente tambi&eacute;n participa en el transporte dentro del n&uacute;cleo.

Miosina VI se asocia con gr&aacute;nulos secretores y est&aacute; presente en el n&uacute;cleo de las c&eacute;lulas cromafines de la m&eacute;dula suprarrenal.

Amebin [&#x4EE5;&#x524D;&#x79F0;&#x4E3A; ApABP-FI &#xFF1B;&#x8D1D;&#x514B;&#x6C99;&#x5E03;&#x624E;&#x514B;&#x4E2D;&#x5357;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5927;&#x5B66; &#xFF08;2007 &#x5E74;&#xFF09;&#x3002;&#x7531;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#xFF0C;2672 nt &#x548C; 1125 nt &#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC;&#x7F16;&#x7801;&#x7EC6;&#x80DE; Biol.85]&#x3002;&#x8C08;&#x8BDD;&#x8F83;&#x77ED;&#x8BB0;&#x5F55; &#xFF08;&#x79F0;&#x4E3A; C amebin)&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x4EA7;&#x54C1;&#x8868;&#x793A; 375 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x9178;&#x6E23;&#x7247;&#x6BB5;&#x7684; amebin&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x5176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x91CD;&#x7EC4; GST &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7EAF;&#x5316;&#x3002;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;-C-amebin &#x7ED1;&#x5B9A;&#x90FD;&#x5230;&#x5355;&#x4F53;&#x548C;&#x4E1D;&#x72B6;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x662F; Ca(2+) &#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E1D;&#x6346;&#x7ED1;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;&#x3002;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;-C-amebin &#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x5154;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x96C5;&#x56FE;-S1 MgATPase &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5220;&#x9664; endoproteinase ArgC &#xFF08;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B63;&#x7535;&#x8377; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;-amebin &#x5305;&#x542B;&#x5E8F;&#x5217;&#x5E9F;&#x9664;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408; KLASMWEQ &#x548C; C amebin&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x6B64;&#x86CB;&#x767D;&#x533A;&#x57DF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E86;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; ATPase &#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6346;&#x7ED1;&#x9500;&#x552E;&#x3002;&#x6709;&#x58F3;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B; C &#x603B;&#x7AD9; amebin &#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x4E0E;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5927;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x6709;&#x58F3;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x5E72;&#x6270;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x5316;&#x548C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x9897;&#x7C92;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x963B;&#x6B62;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;amebin A.&#x53D8;&#x5F62;&#x6746;&#x83CC;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;

Amebin C &#x672B;&#x7AEF;&#x7247;&#x6BB5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x6346;&#x7ED1;&#x3001; &#x6291;&#x5236;&#x96C5;&#x56FE;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; ATPase &#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x662F;&#x53D8;&#x5F62;&#x866B;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Amebin [formerly termed as ApABP-FI; Sobczak et al. (2007) Biochem. Cell Biol. 85] is encoded in Amoeba proteus by two transcripts, 2672-nt and 1125-nt. A product of the shorter transcript (termed as C-amebin), comprising C-terminal 375 amino-acid-residue fragment of amebin, has been expressed and purified as the recombinant GST-fusion protein. GST-C-amebin bound both to monomeric and filamentous actin. The binding was Ca(2+)-independent and promoted filament bundling, as revealed with the transmission electron microscopy. GST-C-amebin significantly decreased MgATPase activity of rabbit skeletal muscle acto-S1. Removal with endoproteinase ArgC of a positively charged C-terminal region of GST-amebin containing KLASMWEQ sequence abolished actin-binding and bundling as well as the ATPase-inhibitory effect of C-amebin, indicating that this protein region was involved in the interaction with actin. Microinjection of amoebae with antibody against C-terminus of amebin significantly affected amoebae morphology, disturbed cell polarization and transport of cytoplasmic granules as well as blocked migration. These data indicate that amebin may be one of key regulators of the actin-cytoskeleton dynamics and actin-dependent motility in A. proteus.

C-terminal fragment of amebin promotes actin filament bundling, inhibits acto-myosin ATPase activity and is essential for amoeba migration.

Amebin [anciennement appel&eacute;e ApABP-FI ; Biochem Sobczak et coll. (2007). Cell Biol. 85] est cod&eacute;e chez Amoeba proteus par deux transcrits, 2672-nt et 1125-nt. Un produit de la transcription plus courte (qualifi&eacute; de C-amebin), compos&eacute;e de C-terminal 375 r&eacute;sidu d&#39;acide amin&eacute; fragment d&#39;amebin, a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; et purifi&eacute; la prot&eacute;ine recombinante de GST-fusion. GST-C-amebin li&eacute; aussi bien &agrave; l&#39;actine monom&eacute;rique et filamenteuse. La liaison &eacute;tait ind&eacute;pendant du Ca(2+) et promu filament groupement, telle que r&eacute;v&eacute;l&eacute;e par la microscopie &eacute;lectronique &agrave; transmission. GST-C-amebin a diminu&eacute; significativement l&#39;activit&eacute; du muscle squelettique de lapin acto-S1 MgATPase. Retrait avec endoprot&eacute;inase ArgC d&#39;une r&eacute;gion C-terminale charg&eacute;e positivement de GST-amebin contenant KLASMWEQ s&eacute;quence aboli liaison de l&#39;actine et de groupement ainsi que l&#39;effet inhibiteur-ATPase de C-amebin, indiquant que cette r&eacute;gion de la prot&eacute;ine a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e dans l&#39;interaction avec l&#39;actine. Microinjection d&#39;amibes avec anticorps dirig&eacute; contre l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale du amebin affect&eacute;e de fa&ccedil;on significative la morphologie amibes, disturbed cellulaire polarisation et le transport des granules cytoplasmiques comme migration bloqu&eacute;e. Ces donn&eacute;es indiquent qu&#39;amebin peut &ecirc;tre l&#39;un des r&eacute;gulateurs cl&eacute;s de la dynamique du cytosquelette d&#39;actine et de la motilit&eacute; de l&#39;actine-d&eacute;pendante chez a. proteus.

Fragment C-terminal d&#39;amebin favorise relatives au groupement du filament d&#39;actine, inhibe l&#39;activit&eacute; d&#39;acto-myosine ATPase et est essentiel pour les migrations de l&#39;amibe.

Amebin [fr&uuml;her bezeichnet als ApABP-FI; Sobczak Et Al. (2007) Biochem. Cell Biol. 85] wird von zwei Abschriften, 2672-nt und 1125-nt in Amoeba Proteus kodiert. Ein Produkt der k&uuml;rzeren Niederschrift (bezeichnet als C-Amebin), bestehend aus C-terminalen 375 amino-S&auml;ure-R&uuml;ckstand-Fragment der Amebin, ausgedr&uuml;ckt und als das rekombinante GST-Schmelzverfahren Protein gereinigt wurde. GST-C-Amebin gebunden, beide gegen Monomer und filament&ouml;sen Actin. Die Bindung war Ca(2+)-unabh&auml;ngige und f&ouml;rderte Filament B&uuml;ndelung, wie mit der Transmissionselektronenmikroskopie offenbart. GST-C-Amebin sank deutlich MgATPase Aktivit&auml;t von Kaninchen Skelettmuskulatur Acto-S1. Entfernung mit Endoproteinase ArgC einer positiv geladenen C-terminalen Region der GST-Amebin, enth&auml;lt KLASMWEQ Sequenz abgeschafft Aktin-Bindung und b&uuml;ndeln sowie die ATPase-hemmenden Wirkung von C-Amebin, darauf hinweist, dass dieser Protein-Region in der Interaktion mit Aktin beteiligt war. Microinjection der Am&ouml;ben-Antik&ouml;rper gegen C-Terminus der Amebin nennenswert Amoeben Morphologie, gest&ouml;rte Handy-Polarisation und Transport der zytoplasmatischen Granulat sowie blockierte Migration. Diese Daten zeigen, dass diese Amebin m&ouml;glicherweise einer der wichtigsten Regulatoren des Aktin-Zytoskelett Dynamik und Aktin-abh&auml;ngige Motilit&auml;t in A. Proteus.

C-terminale Fragment des Amebin f&ouml;rdert Aktin Filamenten B&uuml;ndelung, Acto-Myosin-ATPase-Aktivit&auml;t hemmt und ist wesentlich f&uuml;r die Am&ouml;be Migration.

Amebin [precedentemente definito come ApABP-FI; Biochem Sobczak et al (2007). Cell Biol 85] &egrave; codificato in Amoeba proteus da due trascrizioni, 2672-nt e nt-1125. Un prodotto della pi&ugrave; breve trascrizione (definito come C-amebin), composto da C-terminale 375 frammento amino-acido-residuo di amebin, &egrave; stato espresso e purificato come la proteina di GST-fusione ricombinante. GST-C-amebin legato sia all&#39;actina monomerica e filamentosa. L&#39;associazione era Ca(2+) indipendente e promosso il filamento impacchettare, come ha rivelato con la microscopia elettronica della trasmissione. GST-C-amebin ridotto significativamente l&#39;attivit&agrave; MgATPase del coniglio muscolo scheletrico acto-S1. Rimozione con endoproteinase ArgC una carica positiva regione C-terminale del GST-amebin contenenti KLASMWEQ sequenza abolito actina-associazione e impacchettare cos&igrave; come l&#39;effetto inibitorio dell&#39;atpasi di C-amebin, che indica che questa regione della proteina &egrave; stato coinvolto nell&#39;interazione con l&#39;actina. Microiniezione di amebe con anticorpo contro C-terminale di amebin significativamente influenzato morfologia amebe, disturbato cellula polarizzazione e il trasporto di granuli citoplasmatici, come pure la migrazione bloccati. Questi dati indicano che amebin pu&ograve; essere uno dei regolatori chiave della dinamica del citoscheletro di actina e motilit&agrave; actina-dipendente in a. proteus.

Frammento C-terminale di amebin favorisce i filamenti di actina che impacchetta, inibisce l&#39;attivit&agrave; dell&#39;ATPasi acto-miosina ed &egrave; essenziale per la migrazione di ameba.

[&#x65E7; ApABP-FI &#x3068;&#x3057;&#x3066;; &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; AmebinSobczak et al. (2007) Biochem.&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269; 85] &#x306F; 2 &#x3064;&#x8B70;&#x4E8B;&#x9332;&#x3001;2672 nt &#x304A;&#x3088;&#x3073; 1125 nt &#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0; &#x30FB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080; (C-amebin &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09; &#x304C;&#x77ED;&#x3044;&#x5199;&#x3057;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1; 375 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E; amebin&#x3001;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E; GST &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;GST C amebin &#x4E21;&#x65B9;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x3068;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;Ca(2+) &#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3001;&#x900F;&#x904E;&#x578B;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x6607;&#x683C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GST C amebin MgATPase &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;-s1 &#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;.Endoproteinase ArgC GST amebin &#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408; KLASMWEQ &#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3068; C-amebin &#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5730;&#x57DF;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306E; ATPase &#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x6B63;&#x8377;&#x96FB;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x3002;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; amebin &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3001;&#x90AA;&#x9B54;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x6975;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x9846;&#x7C92;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E; amebin &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x4E3B;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067; A. &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Amebin &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x675F;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C8;-&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; ATPase &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Amebin ApABP-FI;&#xB85C; [&#xC774;&#xC804; &#xBD88;&#xB9AC; Biochem Sobczak &#xADF8; &#xC678; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xBD84; (2007)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; Biol. 85] &#xB450; &#xC0AC;&#xBCF8;, 2672-nt &#xBC0F; 1125 nt&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; proteus&#xC5D0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9E7;&#xC740; &#xC0AC;&#xBCF8; (C amebin &#xB418; &#xB098;), C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xC81C;&#xD488; amebin, 375 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC131; &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30; &#xC870;&#xAC01;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; GST &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC21C;&#xD654;. GST-C-amebin &#xB450; monomeric filamentous &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Ca(2+) &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xACE0;, &#xC804;&#xC1A1; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4;&#xB85C; &#xC2B9;&#xC9C4;. GST-C-amebin&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD1A0;&#xB07C; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; acto-s 1&#xC758; MgATPase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. GST-amebin KLASMWEQ &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB9D0;&#xB77C;-&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3EC;&#xD568;&#xACFC; &#xBC88;&#xB4E4; C-amebin,&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; ATPase &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCDA9;&#xC804; &#xB2E8;&#xC790; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; endoproteinase Argc&#xC640; &#xC81C;&#xAC70;. Amebin&#xC758; C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB85C; amoebae&#xC758; microinjection&#xB294; amoebae &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;, &#xBC29;&#xD574; &#xC140; &#xC591;&#xADF9; &#xD654;&#xC640; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; amebin A. &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC6B0; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC5ED;&#xD559;&#xACFC; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC885;&#xC18D;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Amebin&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC870;&#xAC01; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; acto myosin ATPase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC544;&#xBA54;&#xBC14; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Amebin [anteriormente denominado como ApABP-FI; Biochem Sobczak et al (2007). Cell Biol 85] est&aacute; codificada en Ameba por dos transcripciones, 2672-nt y nt-1125. Un producto de la transcripci&oacute;n m&aacute;s corto (denominada C-amebin), que comprende c-terminal 375 fragmento de amino-&aacute;cido-residuos de amebin, ha sido expresado y purificado como la prote&iacute;na recombinante de fusi&oacute;n GST. GST-C-amebin hab&iacute;a obligado a actina monom&eacute;rica y filamentoso. El enlace fue independiente de la Ca(2+) y hab&iacute;a promovido filamento liar, seg&uacute;n lo revelado con la microscop&iacute;a electr&oacute;nica de transmisi&oacute;n. GST-C-amebin disminuy&oacute; significativamente la actividad de la MgATPase del acto de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico de conejo-S1. Eliminaci&oacute;n con Endoproteinasa ArgC de una regi&oacute;n c-terminal positivamente cargada de GST-amebin que contiene KLASMWEQ secuencia suprimido Uni&oacute;n a actina y agrupaci&oacute;n as&iacute; como el efecto ATPasa-inhibidor de C-amebin, que indica que esta regi&oacute;n de la prote&iacute;na estuvo implicada en la interacci&oacute;n con la actina. Microinyecci&oacute;n de amebas con anticuerpo contra c-terminal de amebin hab&iacute;a afectado significativamente la morfolog&iacute;a de amebas, disturbado polarizaci&oacute;n y transporte de gr&aacute;nulos citoplasm&aacute;ticos como migraci&oacute;n bloqueada de la c&eacute;lula. Estos datos indican que amebin puede ser uno de los reguladores claves de la din&aacute;mica del citoesqueleto de actina y motilidad de actina dependiente en a. proteus.

Fragmento c-terminal de amebin promueve la agrupaci&oacute;n de filamentos de actina, inhibe la actividad de la ATPasa de acto-miosina y es esencial para la migraci&oacute;n de la ameba.

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 2 (VEGFR2) &#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs) &#x884C;&#x4E8B;&#x662F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;Rap1a &#x548C; Rap1b&#xFF0C;2 &#x9AD8;&#x5EA6;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x5C0F; G &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E24;&#x8005;&#x548C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684; VEGF EC &#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BE5; Rap1 &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6CBF;&#x88AD;&#x9650;&#x5236; Rap1 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A; Rap1 &#x865A;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F3A;&#x9677;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; ECs Rap1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7D22;&#x53D6;&#x8BC1;&#x660E; Rap1b &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF VEGFR2 &#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Rap1b &#x7684; VEGF-VEGFR2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(3) &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x662F; Rap1b &#x662F;&#x53D1;&#x82BD; intersomitic &#x8239;&#x53EA;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; 2 &#x72EC;&#x7279;&#x836F;&#x7406; VEGFR2 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x663E;&#x793A; Rap1b &#x548C; VEGFR2 &#x52A0;&#x884C;&#x52A8;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; Rap1b &#x4FC3;&#x8FDB; VEGF &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x901A;&#x8FC7;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;(v)&beta;(3) ECs VEGFR2 &#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x6D1E;&#x5BDF; Rap1 &#x5728; ECs VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Rap1 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x673A;&#x5236;&#x6D89;&#x53CA;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;v&beta;&#x2083; VEGFR2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Vascular endothelial growth factor (VEGF) acting through VEGF receptor 2 (VEGFR2) on endothelial cells (ECs) is a key regulator of angiogenesis, a process essential for wound healing and tumor metastasis. Rap1a and Rap1b, 2 highly homologous small G proteins, are both required for angiogenesis in vivo and for normal EC responses to VEGF. Here we sought to determine the mechanism through which Rap1 promotes VEGF-mediated angiogenesis. Using lineage-restricted Rap1-knockout mice we show that Rap1-deficiency in endothelium leads to defective angiogenesis in vivo, in a dose-dependent manner. Using ECs obtained from Rap1-deficient mice we demonstrate that Rap1b promotes VEGF-VEGFR2 kinase activation and regulates integrin activation. Importantly, the Rap1b-dependent VEGF-VEGFR2 activation is in part mediated via integrin Î±(v)Î²(3). Furthermore, in an in vivo model of zebrafish angiogenesis, we demonstrate that Rap1b is essential for the sprouting of intersomitic vessels, a process known to be dependent on VEGF signaling. Using 2 distinct pharmacologic VEGFR2 inhibitors we show that Rap1b and VEGFR2 act additively to control angiogenesis in vivo. We conclude that Rap1b promotes VEGF-mediated angiogenesis by promoting VEGFR2 activation in ECs via integrin Î±(v)Î²(3). These results provide a novel insight into the role of Rap1 in VEGF signaling in ECs.

Rap1 promotes VEGFR2 activation and angiogenesis by a mechanism involving integrin Î±vÎ²â‚ƒ.

Facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale (VEGF) agissant par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du r&#xE9;cepteur VEGF 2 (VEGFR2) sur les cellules endoth&#xE9;liales (CE) est un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se, un processus essentiel pour la gu&#xE9;rison des plaies et des m&#xE9;tastases tumorales. Rap1a et Rap1b, 2 hautement homologue petites prot&#xE9;ines G, sont tous deux n&#xE9;cessaires pour l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo et des r&#xE9;ponses communautaires normales &#xE0; VEGF. Ici nous avons cherch&#xE9; &#xE0; d&#xE9;terminer le m&#xE9;canisme par lequel Rap1 favorise VEGF-angiogen&#xE8;se induite. Utilisation de la lign&#xE9;e restreints Rap1-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine, nous montrons que Rap1 carence dans l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium conduit &#xE0; un d&#xE9;faut de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo, d&#x26;#39;une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante. Reposant sur ECS obtenu &#xE0; partir de Rap1-souris d&#xE9;ficientes en nous d&#xE9;montrant que Rap1b favorise activation de la kinase du VEGF-VEGFR2 et r&#xE9;gule l&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine. Important, l&#x26;#39;Rap1b-d&#xE9;pendante du VEGF VEGFR2-activation est en partie m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). En outre, dans un mod&#xE8;le in vivo de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se poisson z&#xE8;bre, nous d&#xE9;montrons que Rap1b est essentielle pour la germination des navires intersomitic, un processus connu pour &#xEA;tre d&#xE9;pendant de signalisation du VEGF. Utilisation de 2 distinctes pharmacologiques VEGFR2 inhibiteurs nous montrons que Rap1b et VEGFR2 agissent additivement pour contr&#xF4;ler l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo. Nous concluons que Rap1b favorise VEGF-angiogen&#xE8;se induite par la promotion activation du VEGFR2 dans ECS par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Ces r&#xE9;sultats donnent un aper&#xE7;u roman dans le r&#xF4;le de Rap1 dans signalisation du VEGF dans ECS.

Rap1 Favorise activation du VEGFR2 et de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se par un m&#xE9;canisme impliquant l&#x26;#39;int&#xE9;grine &#x3B1;v&#x3B2; &#x2083;

Vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) handelnd durch VEGF-Rezeptor 2 (VEGFR2) auf Endothelzellen (ECs) ist ein wichtiger Regulator der Angiogenese, ein Prozess wesentlich f&uuml;r Wunde heilen und Tumor Metastasen. Rap1a und Rap1b, 2 hochgradig homologe kleine G-Proteine, sind beide f&uuml;r Angiogenesis in vivo und normalen EG Antworten zu VEGF erforderlich. Wir wollten hier den Mechanismus zu bestimmen, durch den welche Rap1 VEGF-vermittelten Angiogenese f&ouml;rdert. Mit Linie kalorienarme Rap1-Knockout-M&auml;use zeigen wir, dass Rap1-Mangel im Endothel zu defekten Angiogenesis in vivo eine dosisabh&auml;ngige Weise f&uuml;hrt. Mit ECs gewonnenen Rap1-defizienten M&auml;usen zeigen wir, dass Rap1b VEGF-VEGFR2 Kinase Aktivierung f&ouml;rdert und reguliert die Integrin Aktivierung. Wichtig ist, ist die Aktivierung von Rap1b abh&auml;ngigen VEGF-VEGFR2 teilweise durch Integrin &alpha;(v)&beta;(3) vermittelt. Dar&uuml;ber hinaus in einem in-vivo-Modell von Zebrafish Angiogenesis beweisen wir, dass Rap1b wesentlich f&uuml;r das sprie&szlig;en von intersomitic Schiffen, eines Prozess namens VEGF Signalisierung abh&auml;ngig zu sein. Mit 2 unterschiedliche pharmakologische VEGFR2 Hemmnissen zeigen wir, dass Rap1b und VEGFR2 Additiv handeln, um Angiogenesis in vivo zu steuern. Wir schlie&szlig;en, dass Rap1b VEGF-vermittelten Angiogenese f&ouml;rdert durch die F&ouml;rderung von VEGFR2 Aktivierung in ECs &uuml;ber Integrin &alpha;(v)&beta;(3). Diese Ergebnisse liefern einen neuartigen Einblick in die Rolle von Rap1 bei VEGF signalisieren in ECs.

Rap1 f&ouml;rdert VEGFR2 Aktivierung und Angiogenese durch einen Mechanismus Integrin &alpha;v&beta;&#x2083;.

Vascular endothelial growth factor (VEGF) che agiscono attraverso recettori VEGF 2 (VEGFR2) sulle cellule endoteliali (ECs) &egrave; un regolatore chiave dell&#39;angiogenesi, un processo essenziale per metastasi di tumore e di guarigione ferita. Rap1a e Rap1b, 2 altamente omologhe piccole proteine G, sono che entrambi necessari per l&#39;angiogenesi in vivo e per le normali risposte CE di VEGF. Qui abbiamo cercato di determinare il meccanismo attraverso il quale Rap1 promuove l&#39;angiogenesi VEGF-mediata. Utilizzando topi knockout Rap1 lineage-restricted mostriamo che Rap1-deficit di endotelio conduce a difettoso angiogenesi in vivo, in modo dose-dipendente. Utilizzando ECs ottenuti da topi carenti Rap1 ci dimostrano che Rap1b promuove l&#39;attivazione della chinasi VEGF-VEGFR2 e regola dell&#39;integrina attivazione. Soprattutto, l&#39;attivazione Rap1b-dipendente VEGF-VEGFR2 &egrave; in parte mediato via integrina &alpha;(v)&beta;(3). Inoltre, in un modello in vivo di zebrafish angiogenesi, dimostreremo che Rap1b &egrave; essenziale per la germinazione dei vasi intersomitic, un processo conosciuto per essere dipendente su segnalazione di VEGF. Utilizzando 2 distinti farmacologici inibitori VEGFR2 mostriamo che Rap1b e VEGFR2 agiscono additivamente per controllare l&#39;angiogenesi in vivo. Concludiamo che Rap1b promuove l&#39;angiogenesi VEGF-mediata promuovendo VEGFR2 attivazione in ECs via integrina &alpha;(v)&beta;(3). Questi risultati forniscono una visione romanzo il ruolo di Rap1 nella segnalazione di VEGF in ECs.

Rap1 promuove un meccanismo che coinvolge integrina &alpha;v&beta;&#x2083; VEGFR2 attivazione e l&#39;angiogenesi.

&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;VEGF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;2&#xFF08;VEGFR2&#xFF09;&#xFF08;ECS&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;VEGF&#xFF09;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3001;&#x5275;&#x50B7;&#x6CBB;&#x7652;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x8EE2;&#x79FB;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002; Rap1a&#x3068;Rap1b&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;VEGF&#x3078;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;EC&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;VEGF&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x7D71;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Rap1&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306F;&#x3001;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x306F;&#x3001;VEGF-VEGFR2&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x8A3C;Rap1&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;EC&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;Rap1b&#x4F9D;&#x5B58;VEGF-VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;in vivo&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Rap1b&#x306F;intersomitic&#x8239;&#x8236;&#x3001;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x767A;&#x82BD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;VEGFR2&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7684;Rap1b&#x3068;VEGFR2&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Rap1b&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;ECS&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;VEGF-A&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ECS&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3067;VEGFR2&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3B1;v&#x3B2;&#x2083;

&#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF) VEGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs) 2 (VEGFR2)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xAE30;&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;, &#xC0C1;&#xCC98; &#xCE58;&#xC720; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC804;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC5D0;&#xC13C;&#xC15C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. Rap1a &#xBC0F; Rap1b, 2 &#xB192;&#xC740; &#xB3D9;&#xC885; &#xC791;&#xC740; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xB294; &#xB458; &#xB2E4; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; VEGF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; EC &#xC815;&#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1 VEGF &#xC911;&#xC7AC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Rap1-&#xACB0;&#xD54D; endothelium&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD608;&#xD1B5; &#xC81C;&#xD55C; Rap1 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Rap1 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; Ecs&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; Rap1b VEGF VEGFR2 &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; &#xADDC;&#xC81C; integrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, Rap1b &#xC885;&#xC18D; VEGF VEGFR2 &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; integrin &alpha;(v)&beta;(3)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, zebrafish &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; in vivo &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; Rap1b &#xB3CB; intersomitic &#xC120;&#xBC15;&#xC758; VEGF &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2 &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; pharmacologic VEGFR2 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b &#xBC0F; VEGFR2 &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC81C;&#xC5B4; additively &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Rap1b integrin &alpha;(v)&beta;(3)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Ecs&#xC758; VEGFR2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; VEGF &#xC911;&#xC7AC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xACB0;&#xB860;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; VEGF Ecs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; rap1&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rap1 integrin &alpha;v&beta;&#x2083; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; VEGFR2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), actuando a trav&#xE9;s del receptor 2 de VEGF (VEGFR2) en las c&#xE9;lulas endoteliales (EC) es un regulador clave de la angiog&#xE9;nesis, un proceso esencial para la cicatrizaci&#xF3;n de heridas y la met&#xE1;stasis del tumor. Rap1a y Rap1b, 2 prote&#xED;nas G altamente hom&#xF3;loga peque&#xF1;os, ambos son necesarios para la angiog&#xE9;nesis in vivo y para respuestas normales CE a VEGF. Aqu&#xED; hemos tratado de determinar el mecanismo a trav&#xE9;s del cual Rap1 promueve la angiog&#xE9;nesis mediada por VEGF. Uso de linaje restringido Rap1 ratones knock-out nos muestran que la deficiencia de Rap1 en el endotelio lleva a un defecto en la angiog&#xE9;nesis in vivo, de una manera dosis-dependiente. Uso de EC de obtener Rap1 ratones deficientes que demuestran que Rap1b promueve la activaci&#xF3;n de VEGF-VEGFR2 cinasa y regula la activaci&#xF3;n de la integrina. Es importante destacar que la Rap1b dependiente de VEGF-VEGFR2 activaci&#xF3;n es en parte mediada a trav&#xE9;s de la integrina &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Adem&#xE1;s, en un modelo in vivo de la angiog&#xE9;nesis pez cebra, se demuestra que Rap1b es esencial para el crecimiento de vasos intersomitic, un proceso conocido por ser dependiente de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF. Con 2 diferentes inhibidores farmacol&#xF3;gicos VEGFR2 nos muestran que Rap1b VEGFR2 y actuar de forma aditiva para controlar la angiog&#xE9;nesis in vivo. Se concluye que el VEGF Rap1b promueve la angiog&#xE9;nesis mediada por promover VEGFR2 activaci&#xF3;n en ECs a trav&#xE9;s de la integrina &#x3B1; (v) &#x3B2; (3). Estos resultados proporcionan una visi&#xF3;n novedosa sobre el papel de Rap1 de se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF en EC.

Promueve Rap1 VEGFR2 activaci&#xF3;n y angiog&#xE9;nesis por un mecanismo de participaci&#xF3;n de la integrina &#x3B1;v&#x3B2; &#x2083;

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI (&#x5E02;&#x9762;) &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x5DF2;&#x77E5;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8D70;&#x5411;&#x51CF;&#x53BB;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x7684;&#x7ED3;&#x675F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x626E;&#x6F14;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x8FD9;&#x72EC;&#x7279;&#x7535;&#x673A;&#x5728;&#x5206;&#x6CCC; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5927;&#x9F20;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x9AD3;&#x8D28;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F7F;&#x7528;&#x51CF;&#x5C11;&#x5E02;&#x9762;&#x5408;&#x6210; &#xFF08;siRNA &#x65B9;&#x6CD5;&#x5236;&#x4F5C;) &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x5E02;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7ED3;&#x6784;&#x6DF1;&#x523B;&#x7F3A;&#x9677;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x5206;&#x6790;&#x53D1;&#x73B0;&#x5E02;&#x9762;&#x7F3A;&#x7EC6;&#x80DE; G0/G1 &#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5728;&#x88AB;&#x6355;&#xFF0C;&#x4F46;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x65E2;&#x4E0D;&#x591A;&#x500D;&#x4F53;&#x80B2;&#x79CD;&#x4E5F;&#x975E;&#x6574;&#x500D;&#x4F53;&#x88AB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x5BF9;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5E02;&#x9762;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x513F;&#x8336;&#x915A;&#x80FA;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; VI PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x91CD;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x513F;&#x8336;&#x915A;&#x80FA;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;

Myosin VI (MVI) is the only known myosin walking towards minus end of actin filaments and is believed to play distinct role(s) than other myosins. We addressed a role of this unique motor in secretory PC12 cells, derived from rat adrenal medulla pheochromocytoma using cell lines with reduced MVI synthesis (produced by means of siRNA). Decrease of MVI expression caused severe changes in cell size and morphology, and profound defects in actin cytoskeleton organization and Golgi structure. Also, significant inhibition of cell migration as well as cell proliferation was observed. Flow cytometric analysis revealed that MVI-deficient cells were arrested in G0/G1 phase of the cell cycle but did not undergo increased senescence as compared with control cells. Also, neither polyploidy nor aneuploidy were detected. Surprisingly, no significant effect on noradrenaline secretion was observed. These data indicate that in PC12 cells MVI is involved in cell migration and proliferation but is not crucial for stimulation-dependent catecholamine release.

Myosin VI in PC12 cells plays important roles in cell migration and proliferation but not in catecholamine secretion.

La myosine VI (MVI) est la seule myosine connue marchant vers moins fin des filaments d&#39;actine et est cens&eacute; jouer des r&ocirc;les distincts que les autres myosines. Nous avons abord&eacute; le r&ocirc;le de ce moteur unique dans les cellules PC12 s&eacute;cr&eacute;toires, d&eacute;riv&eacute; d&#39;un ph&eacute;ochromocytome la m&eacute;dullosurr&eacute;nale du rat &agrave; l&#39;aide de lign&eacute;es cellulaires avec la synth&egrave;se r&eacute;duite de MVI (produite par le biais de siRNA). Diminution d&#39;expression MVI caus&eacute;e graves changements dans la taille des cellules et morphologie et d&eacute;fauts profonds dans l&#39;organisation de l&#39;actine du cytosquelette et de la structure de l&#39;appareil de Golgi. En outre, une inhibition significative de la migration cellulaire ainsi que la prolif&eacute;ration cellulaire a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Cytom&eacute;trie a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les cellules d&eacute;ficientes en MVI ont &eacute;t&eacute; arr&ecirc;t&eacute;s en phase G0/G1 du cycle cellulaire mais ne subissent pas de s&eacute;nescence accrue comparativement aux cellules de contr&ocirc;le. En outre, ni polyplo&iuml;die ni aneuplo&iuml;die ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s. &Eacute;tonnamment, aucun effet significatif sur la s&eacute;cr&eacute;tion de noradr&eacute;naline a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Ces donn&eacute;es indiquent que dans les cellules PC12 MVI est impliqu&eacute; dans la migration cellulaire et la prolif&eacute;ration, mais n&#39;est pas crucial pour la lib&eacute;ration de cat&eacute;cholamines d&eacute;pendante de la stimulation.

La myosine VI dans les cellules PC12 joue un r&ocirc;le important dans la migration cellulaire et la prolif&eacute;ration, mais pas dans la s&eacute;cr&eacute;tion de cat&eacute;cholamines.

Myosin VI (MVI) ist die einzige bekannte Myosin zu Fu&szlig; in Richtung minus Ende des Aktin-Filamente und wird geglaubt, um die unterschiedliche Rollen als andere Myosins zu spielen. Wir adressiert eine Rolle von dieser einzigartigen Motor in sekretorischen PC12 Zellen, aus Ratte Nebennierenmark Ph&auml;ochromozytom mit Zelllinien mit reduzierten MVI-Synthese (produziert durch SiRNA). Abnahme der MVI Ausdruck verursacht schwere Ver&auml;nderungen in Zellengr&ouml;&szlig;e und Morphologie und tiefgreifende M&auml;ngel an Aktin-Zytoskelett-Organisation und Golgi-Struktur. Au&szlig;erdem wurde die signifikante Hemmung der Zellmigration sowie Zellproliferation beobachtet. Flow Cytometric Analyse ergab, dass MVI-defizienten Zellen, in G0/G1-Phase des Zellzyklus verhaftet wurden, aber nicht erh&ouml;hte Altern im Vergleich zu Steuerelement Zellen unterziehen. Au&szlig;erdem weder Polyploidie noch Aneuploidie entdeckt wurden. &Uuml;berraschenderweise wurde keine signifikante Auswirkung auf Noradrenalin Sekretion beobachtet. Diese Daten zeigen, dass in PC12 Zellen MVI Zellmigration und Proliferation beteiligt ist, aber nicht entscheidend f&uuml;r Anregung-abh&auml;ngige Katecholamin-Freisetzung ist.

Myosin VI in PC12 Zellen spielt wichtige Rolle in der Zellmigration und Vermehrung aber nicht in Katecholamin-Sekretion.

Miosina VI (MVI) &egrave; la miosina conosciuta sola camminando verso meno fine di filamenti di actina e si crede di giocare ruoli distinti rispetto altri myosins. Abbiamo affrontato un ruolo di questo motore unico in cellule PC12 secretorie, derivato da feocromocitoma midollo surrenale ratto utilizzando linee cellulari con ridotta sintesi MVI (prodotto mediante siRNA). Diminuzione dell&#39;espressione MVI causato gravi alterazioni nella cella dimensioni e morfologia e profondi difetti nell&#39;organizzazione del citoscheletro di actina e struttura di Golgi. Inoltre, &egrave; stato osservato significativo inibizione della migrazione cellulare cos&igrave; come la proliferazione cellulare. Analisi citofluorimetriche ha rivelato che le cellule MVI-carenti sono state arrestate in fase G0/G1 del ciclo cellulare ma non ha fatto subire senescenza maggiore rispetto alle cellule di controllo. Inoltre, n&eacute; poliploidia, n&eacute; sono state rilevate aneuploidia. Sorprendentemente, &egrave; stato osservato alcun effetto significativo sulla secrezione di noradrenalina. Questi dati indicano che in cellule PC12 MVI &egrave; coinvolto nella migrazione cellulare e la proliferazione, ma non &egrave; cruciale per il rilascio delle catecolamine stimolazione-dipendente.

Miosina VI in cellule PC12 svolge ruoli importanti nella migrazione cellulare e la proliferazione, ma non nella secrezione delle catecolamine.

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI (MVI) &#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x6B69;&#x304F;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4ED6;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; MVI &#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B; (siRNA &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x751F;&#x7523;&#xFF09; &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x526F;&#x814E;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x8910;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x7531;&#x6765;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E; PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3002;MVI &#x5F0F;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x91CD;&#x5EA6;&#x5909;&#x66F4;&#x30BB;&#x30EB; &#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; &#x30FB;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x52D5;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x89E3;&#x6790; MVI &#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E; G0/G1 &#x671F;&#x3067;&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x500D;&#x6570;&#x6027;&#x3082;&#x7570;&#x6570;&#x6027;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; MVI &#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x523A;&#x6FC0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3; &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; VI PC12 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Myosin VI (MVI) &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; myosin &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xB05D;&#xC744; &#xBE80; &#xAC78;&#xC5B4;&#xAC00; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; myosins &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC950; &#xBD80; &#xC2E0; &#xBAA8; pheochromocytoma &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC18C; MVI &#xD569;&#xC131; (Sirna&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xC0DD;&#xC0B0;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBD84; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. MVI &#xC2DD;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC140; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xD615;&#xD0DC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; Golgi &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xC624;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC800;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD750;&#xB984; cytometric &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; MVI &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; g 0/g 1 &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xB410;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1B;&#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB458; &#xB2E4; polyploidy &#xC774;&#xC218;&#xC131; &#xAC10;&#xC9C0;&#xB3C4; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB354;&#xC6B1; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC601;&#xD5A5; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; MVI &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC790;&#xADF9; &#xC885;&#xC18D; &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Myosin 6 PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xB294; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCE74; &#xD14C; &#xCF5C; &#xC544;&#xBBFC; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

Miosina VI (MVI) es la miosina conocida s&oacute;lo caminando hacia menos final de filamentos de actina y se cree que jugar distintos roles que otras miosinas. Nos dirigimos a un papel de este &uacute;nico motor en c&eacute;lulas PC12 secretoras, derivado de feocromocitoma de la m&eacute;dula suprarrenal de rata con l&iacute;neas celulares de s&iacute;ntesis reducida de MVI (producido por medio de siRNA). Disminuci&oacute;n de la expresi&oacute;n de MVI hab&iacute;a causado severos cambios en tama&ntilde;o de celda y morfolog&iacute;a y defectos profundos en la organizaci&oacute;n del citoesqueleto de actina y estructura de Golgi. Tambi&eacute;n, se observ&oacute; una inhibici&oacute;n significativa de la migraci&oacute;n celular, as&iacute; como la proliferaci&oacute;n celular. An&aacute;lisis de citometr&iacute;a de flujo revel&oacute; que c&eacute;lulas MVI-deficientes fueron arrestadas en fase G0/G1 del ciclo celular, pero no experimentaron aumentada senescencia en comparaci&oacute;n con las c&eacute;lulas del control. Adem&aacute;s, tampoco poliploid&iacute;a ni aneuploide fueron detectados. Sorprendentemente, no se observ&oacute; ning&uacute;n efecto significativo sobre la secreci&oacute;n de noradrenalina. Estos datos indican que en las c&eacute;lulas PC12 MVI est&aacute; involucrado en la proliferaci&oacute;n y migraci&oacute;n celular pero no es crucial para la liberaci&oacute;n de catecolaminas dependientes de estimulaci&oacute;n.

Miosina VI en c&eacute;lulas PC12 juega un papel importante en la migraci&oacute;n celular y la proliferaci&oacute;n pero no en la secreci&oacute;n de catecolaminas.

Magdalena Sobczak

Blood Research Institute

BloodCenter of Wisconsin

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice