زرع القصبة الهوائية ومنتبذ مثلي في الفئران المستخدمة كنماذج لدراسة الأمراض تنمية إيرواي مسد

Summary

هذا الفيديو يبين ويقارن بين نماذج تجريبية لدراسة تطور المرض مجرى الهواء مسد (OAD) في الفئران ، ومنتبذ ومثلي نموذج زرع القصبة الهوائية.

Abstract

مسد مجرى المرض (OAD) هو تعقيد كبير بعد عمليات زرع الرئة التي تحد من البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل (1-7).

لدراسة الفيزيولوجيا المرضية ، وقد وضعت العلاج والوقاية من OAD ، ونماذج حيوانية مختلفة من زرع القصبة الهوائية في القوارض (1-7). هنا ، فإننا نستخدم نموذجين المتبعة في زرع القصبة الهوائية ، ونموذج منتبذ ومثلي وإظهار مزاياها وحدودها.

لنموذج منتبذ ، هو التفاف القصبة الهوائية المانحة الى زيادة الثرب للمتلقي ، بينما anastomosed القصبة الهوائية المانحة قبل نهاية إلى نهاية مفاغرة في النموذج مثلي.

في كلا النموذجين ، وقد تجلى تطور الآفات مسد النسيجية مشابهة OAD السريرية (1-7).

هذا الفيديو يبين كيفية تنفيذ حد سواء ، ومنتبذ فضلا عن تقنية زرع مثلي القصبة الهوائية في الفئران ، ويقارن دوام التنمية OAD في كلا النموذجين استخدام الأنسجة.

Protocol

1. يتم شراؤها من الذكور BALB / C الفئران (8-12 أسابيع) من مختبرات نهر تشارلز (Sulzfeld ، ألمانيا). ويعيش في ظل ظروف الفئران التقليدية ، وتتغذى غذاء الفئران العادية والمياه بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية.
2. يستخدم Isofluran 2 ٪ للتخدير.

التحضير المانحة

1. حلق الشعر في البطن وتطهير المنطقة باستخدام betaisodona.
2. عرض تحت المجهرية ، تنفيذ شق خط الوسط من عنق الرحم على مستوى الحنجرة إلى القص.
3. إزالة الدهون تحت الجلد والعضلات حزم للحصول على رؤية واضحة للالقصبة الهوائية.
4. تشريح القصبة الهوائية من أي الأنسجة المحيطة بها ، مثل سرطان المريء والأعصاب والشرايين والنسيج الضام.
5. إزالة القصبة الهوائية كلها (من الحنجرة إلى التشعب).
6. مع تدفق زرع المالحة الباردة وتخزين الكسب غير المشروع في 4 درجات مئوية.
7. الموت الرحيم هو الجهة المانحة عن طريق الخلع عنق الرحم بعد الحصاد في القصبة الهوائية.

المتلقي : زرع منتبذ

1. حلق الشعر في البطن هامشا واسعا حول موقع شق وتطهير المنطقة ثلاث مرات باستخدام betaisodona (betadine) ، يليه الكحول. وينبغي مشحم العينين مع المنتج مرهم للعين لمنع القرنيات من الجفاف.
2. تنفيذ البطن الوسيط ومكان الأمعاء في قفاز ، moistured العقيمة.
3. نشر مزيد من الثرب بعناية. وضع الطعم في الوسط ويحملق ذلك مع الدرز واحد باستخدام 8-0 (Prolene ، Ethicon ، ألمانيا).
4. تغطي بالكامل مع زرع مزيد من الثرب والإصلاح والكسب غير المشروع مع واحد وحيد خياطة 8-0 (Prolene ، Ethicon ، ألمانيا).
5. نقل الأمعاء مرة أخرى في البطن ، والاحمرار مع المياه المالحة الدافئة والعقيمة قبل الإغلاق.
6. عن قرب في طبقات 2 -- جدار البطن وطبقة الجلد مع نمط مستمر باستخدام 7-0 Prolene للعضلات وVicryl 7-0 للبشرة.

المتلقي : زرع مثلي

1. حلق الشعر في البطن هامشا واسعا حول موقع شق وتطهير المنطقة ثلاث مرات باستخدام betaisodona (betadine) ، يليه الكحول. وينبغي مشحم العينين مع المنتج مرهم للعين لمنع القرنيات من الجفاف.
2. تقسيم عضلات حزام لتصور كامل الحنجرة و معقدة.
3. تشريح بعناية القصبة الهوائية من الأنسجة المحيطة بها ، والحرص على الحفاظ على الأعصاب المتكررة الحنجرة.
4. تقسيم القصبة الهوائية ثلاث حلقات من الذيلية الحلقي. تنفس الحيوان تحتفظ فيزيولوجي عبر القصبة الهوائية.
5. ضمان تنظيف حواف القصبة الهوائية في المتلقي ، وكذلك في الكسب غير المشروع.
6. موسط هو الكسب غير المشروع بين القصبة الهوائية والعيوب المتلقي الموجه للحفاظ على قطبية التشريحية.
7. باستخدام 8-0 (Prolene ، Ethicon ، ألمانيا) يتفاغر الكسب غير المشروع مع الجهات المانحة القصبة الهوائية (المنصفية) البعيدة. يتم تنفيذ الجانب الخلفي من مفاغرة المستمر في الأزياء على التوالي. ثم اكتمال الجانب الأمامي باستخدام غرز توقف.
8. إزالة أي افرازات من مجرى الهواء.
9. اكتمال ثم مفاغرة الداني في الطريق نفسه الذي القاصي.
10. ضمان سلامة مجرى الهواء والكافي ، والتنفس التلقائي.
11. نقل عضلات حزام وإغلاق الأنسجة تحت الجلد وطبقة الجلد باستخدام خيوط 6-0 (Vicryl ، Ethicon والمانيا) مع نمط مستمر.
12. استخدام حقن تخدير للمتلقي ، وبالتالي فإن الحيوان ستحتفظ التنفس الفسيولوجية من خلال القصبة الهوائية. يتم استخدام مزيج من 75/1/0.2 ملغم / كغم من البروبوفول ، medetomidine والفنتانيل ، على التوالي ، للتخدير الملكية الفكرية في الفئران.

الشكل 1 : المانحة القصبة الهوائية.
1A : المانحة القصبة الهوائية في الموقع بعد التحضير.
1B : رفعه القصبة الهوائية المانحة.
1C : القصبة الهوائية بعد explantation المانحة.

الشكل 2 : نموذج منتبذ.
2A : يتم وضع الطعم في وسط الثرب أكبر.
2B : هو ثابت والكسب غير المشروع على طرفي مع خياطة واحدة.
2C : هو التفاف والكسب غير المشروع في الثرب أكبر وثابتة مع خياطة واحدة.

الشكل 3 : نموذج مثلي.
3A : غير موسط والكسب غير المشروع بين العيوب المتلقي القصبة الهوائية والجدار الخلفي هو anastomosed المستمر في الأزياء على التوالي.
3B : تم الانتهاء من الجدار الأمامي باستخدام خياطة واحدة.

الشكل 4 : الأنسجة.
4A : المستردة القصبة الهوائية المزروعة منتبذ بعد 28 يوما في ستا E + Hining (15X). علما محو 100 ٪ اللمعية.
4B : المستردة القصبة الهوائية المزروعة مثلي بعد 60 يوما في تلطيخ H + E (15X). اللمعية القصوى محو حقق ما يقرب من 45 ٪.

	منتبذ النموذجي زرع القصبة الهوائية	مثلي النموذجي زرع القصبة الهوائية
المزايا	+ سهلة لتنفيذ + محو انسداد مجرى الهواء مع اللمعية كاملة بعد 28 يوما + لا العاطفة المادية من الحيوانات التي OAD	+ المادية للتهوية والكسب غير المشروع + الدواء المستنشق ممكن + ردود فعل مناعية قوية مثل alloreactive الغلوبولين المناعي إنتاج الأجسام المضادة + الوسط الصدري الفسيولوجية + القصبة الهوائية الرغامى مفاغرة يقلد الإعداد السريرية
عيوب	-- لا تهوية زرع القصبة الهوائية -- لا يوجد تقييم لاستنشاق الجراثيم ممكن -- تثبيط mucociliary إزالة الإفرازات واحتفظ -- المكروية البريتوني بدلا من الوسط الصدري	-- التدريب الجراحي ضروريا -- محو اللمعية مع التطبيق إطباق اللمعية. 45 ٪ بعد 60 يوما -- قد تتطور لديهم أعراض من الحيوانات OAD

الجدول رقم 1 : مزايا وعيوب زرع القصبة الهوائية ومنتبذ مثلي.

Discussion

الفئران متوفرة في مختلف transgeneic ونموذج خروج المغلوب ، وبالتالي مناسبة لدراسة المسائل المتعلقة OAD الآلي (4).
ويمكن استخدام كلا النموذجين زرع القصبة الهوائية هو مبين في هذا الفيديو كنماذج لدراسة موثوق بها OAD التنمية.
ومع ذلك ، كل نموذج يوضح مزايا وقيود.