异位和原位气管移植小鼠模型研究闭塞性气道疾病的发展

摘要

该视频显示和比较两个实验模型来研究发展的闭塞性气道疾病（OAD），在小鼠体内的异位和原位气管移植模型。

摘要

闭塞性气道疾病（OAD）主要的并发症是肺移植后，限制长期生存（1-7）。

为了研究的病理生理，治疗和预防OAD的不同的动物模型，在啮齿类动物的气管移植已开发（1-7）。在这里，我们使用两个气管移植，异位和原位模型建立的模型，并展示自己的优点和局限性。

对于异位模型，捐赠者的气管进入收件人的大网膜包裹，而捐助者的气管原位模型是在结束对端吻合吻合。

在这两种模式的闭塞性病变的组织学类似临床的OAD的发展已经证明（1-7）。

本视频演示了如何同时执行，异位以及小鼠原位气管移植技术，比较OAD的发展过程中都使用的组织学模型。

研究方案

1. 雄性BALB / C小鼠（8-12周）均购自查尔斯河实验室（德国Sulzfeld，）。这些老鼠被安置在常规条件下，美联储标准小鼠的食物和水自由采食。
2. 2％Isofluran是用于麻醉。

供体的制备

1. 剃腹毛，消毒面积使用betaisodona。
2. 在微观下，执行从喉部水平到胸骨中线的颈椎手术切口。
3. 取出皮下脂肪和肩带肌肉得到一个明确的说法气管。
4. 任何周围组织解剖的气管，像食道，神经，动脉和结缔组织。
5. 删除整个气管分叉喉。
6. 用冷盐水冲洗的移植，移植物储存于4 ° C。
7. 捐赠者是安乐死颈椎脱位以下收获气管。

收件人：异位移植

1. 切口部位周围的大幅度剃腹毛，消毒面积betaisodona（优碘）受酒精使用三次。眼睛应与眼药膏产品润滑，防止角膜干燥。
2. 执行中位数的开腹手术，放入无菌手套moistured肠道。
3. 仔细蔓延的大网膜。进入中心的移植，并注视单一使用8-0（普理灵，爱惜康，德国）缝合。
4. 完全覆盖大网膜移植手术的移植和修复单一缝合8-0（普理灵，爱惜康，德国）。
5. 肠子迁移到腹部，并在关闭之前用温水，无菌生理盐水冲洗。
6. 关闭2层 - 腹壁的肌肉和皮肤7-0薇乔连续使用7-0普理灵的格局和皮肤层。

收件人：原位移植

1. 切口部位周围的大幅度剃腹毛，消毒面积betaisodona（优碘）受酒精使用三次。眼睛应与眼药膏产品润滑，防止角膜干燥。
2. 肩带​​肌肉分开，以可视化的全喉复杂。
3. 仔细解剖气管周围组织，照顾，保护喉返神经神经。
4. 分气管三个环的环状尾鳍。动物通过气管切开保持生理呼吸。
5. 确保清洁的收件人，以及在移植气管的边缘。
6. 嫁接是收件人气管缺陷和导向，以保持解剖极性之间的中间人。
7. 使用8-0（普理灵，爱惜康，德国）吻合的捐助者与远端（纵隔）气管移植。吻合后的执行方面，是在连续运行时装。前方，然后完成中断针的使用。
8. 删除从呼吸道分泌物。
9. 近端吻合，然后在远端一个相同的方式完成。
10. 确保呼吸道的完整性和充足，自主呼吸。
11. 搬迁肩带的肌肉和关闭皮下组织和皮肤层使用6-0缝线连续模式（薇乔，爱惜康，德国）。
12. 收件人使用注射麻醉，因此将保留通过动物生理呼吸的气管。结合75/1/0.2毫克/公斤，异丙酚medetomidine和芬太尼分别，用于IP麻醉的小鼠。

图1：捐助者的气管。
1A：捐助者的气管就地配制后。
1B：删剪捐助气管。
1C：捐助者气管后explantation。

图2：异位模型。
2A：移植是在大网膜的中心位置。
2B：移植是用一个单一的缝合两端固定。
2C：移植到大网膜包裹，并用一个单一的缝合固定。

图3：原位模型。
3A：移植收件人气管缺陷和后壁之间的中间人，是在连续运行时装吻合。
3B：使用单一​​缝合前壁完成。

图4：切片。
4A：回收后28天在H + E站异位移植气​​管ining（15X）。请注意100％管腔闭塞。
4B：恢复原位移植气管后60天在H + E染色（15X）。最大实现管腔闭塞，约45％。

	异位气管移植模型	原位气管移植模型
优势	+容易执行 +完整的气道阻塞的管腔闭塞后28天 +无由OAD的动物的身体感情	+物理通风的嫁接 +吸入药品监督管理局 +强免疫反应，如同种异体IgM抗体生产 +胸椎的生理环境 +气管气管吻合模仿临床
缺点	- 没有移植气管的通风 - 没有评价吸入病原体的可能 - 抑制纤毛清除率和保留分泌物 - 腹膜微环境，而不是胸环境	- 手术必要的培训 - 管腔闭塞管腔闭塞的应用程序。经过60天的45％ - 动物可能发展的OAD的症状

表1：异位和原位气管移植的优点和缺点。

讨论

小鼠可在不同的transgeneic和淘汰赛模式，因此适合研究的OAD（4）有关的机械问题。
在此视频中显示的气管移植两种型号，可作为可靠的模型研究OAD的发展。
然而，每一个模型演示的优势和局限。

异位气管移植是很容易执行，并不需要特殊的手术训练（3，5） 。异位移植后，管腔闭塞将出现快速，完整的气道阻塞出现后28天（3，4，6）。动物身体的影响O...