JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

وهنا يصف لنا جهاز مختبر القابلة لبرمجة التي يمكن استخدامها لإنشاء مقتطفات من الهباء الجوي السجائر الإلكترونية ودخان السجائر التقليدية. هذا الأسلوب يوفر أداة مفيدة لإجراء مقارنات مباشرة بين السجائر التقليدية والسجائر الإلكترونية، وهي نقطة إدخال موجوداً في البحوث السجائر الإلكترونية.

Abstract

السجائر الإلكترونية هي نتاج التبغ الأكثر شعبية بين الأوسط والمدرسة العالية ومنتجات التبغ البديلة الأكثر شعبية بين الكبار. عالية الجودة، البحوث استنساخه على عواقب استخدام السجائر الإلكترونية أمر أساسي لفهم الناشئة من شواغل الصحة العامة وصياغة الأدلة القائمة على السياسة التنظيمية. في حين أن عددا متزايداً من ورقات مناقشة السجائر الإلكترونية، يوجد اتساق قليلاً في أساليب عبر المجموعات والقليل جداً توافق الآراء بشأن النتائج. وهنا يصف لنا جهاز مختبر القابلة لبرمجة التي يمكن استخدامها لإنشاء مقتطفات من الهباء الجوي السجائر الإلكترونية ودخان السجائر التقليدية. هذا البروتوكول تفاصيل تعليمات للجمعية وتشغيل الجهاز المذكور، ويوضح استخدام المقتطف الذي تم إنشاؤه في التطبيقين عينة: في المختبر خلية بقاء المقايسة واللوني للغاز-قياس الطيف الكتلي. هذا الأسلوب يوفر أداة لإجراء مقارنات مباشرة بين السجائر التقليدية والسجائر الإلكترونية، وهي نقطة إدخال موجوداً في البحوث السجائر الإلكترونية.

Introduction

على الرغم من جهد مركز من منظمات الصحة، يظل استخدام منتجات التبغ السبب الرئيسي للوفاة التي يمكن توقيها في جميع أنحاء العالم، مع معظم هذه الوفيات التي تعزى إلى التدخين السجائر1. منذ دخولها إلى السوق في عام 2003، نمت السجائر الإلكترونية شعبية بين مستخدمي منتجات التبغ. في الوقت الراهن، السجائر الإلكترونية هي البديل الأكثر شعبية للسجائر التقليدية بين البالغين الأمريكيين (~ 5%)2 ونظام تقديم النيكوتين الأكثر شعبية بين الأوسط (~ 5.3 في المائة) والمدرسة العالية (~ 16%)3. وإذا استمرت الاتجاهات الحالية، يمكن توقع السجائر الإلكترونية لتحل محل السجائر التقليدية للأجيال المقبلة. بيد أن العواقب الصحية المترتبة على استخدام السجائر الإلكترونية لا تزال غير واضحة.

البحوث المتعلقة بالسجائر الإلكترونية لم تبدأ بشكل جدي حتى السجائر الإلكترونية شعبية زادت بسرعة في عام 20133،4. ومنذ ذلك الحين، استخدمت عددا من النماذج المختلفة لمعالجة مسألة سميتها. ولكن نتائج دراسات كثيرة متضاربة، وبينما يبدو أن السجائر الإلكترونية عموما أقل سمية من السجائر التقليدية هناك أي توافق في الآراء الحالية على العواقب الصحية للسجائر الإلكترونية استخدام5، 6 , 7-ابحاثنا السابقة تشير إلى أن السجائر الإلكترونية إلى حد كبير أقل سمية للبطانة الوعائية من السجائر التقليدية، على الرغم من قدرتها على إلحاق ضرر الحمض النووي، وإدخال عنصر مؤكسد الإجهاد وخلية الموت8 . ومع ذلك، إجراء مزيد من البحوث ضروري قبل أننا يمكن استخلاص استنتاجات ثابتة حول الآثار الصحية لاستخدام السجائر الإلكترونية.

كما السجائر التقليدية من أسباب الرئيسية لأمراض الأوعية الدموية9، هناك اهتمام متزايد بالمخاطر الصحية والأوعية الدموية من السجائر الإلكترونية استخدام10،،من1112. ومن أجل دراسة آثار السجائر الإلكترونية على نظام الأوعية الدموية، وضعت لدينا مختبر متحكم دقيق تشغيل جهاز التدخين/فابينج (الشكل 1)8. هذا الجهاز غير قادرة على توليد السائل مقتطفات من الهباء الجوي السجائر الإلكترونية أو دخان السجائر التقليدية أما في المذيبات العضوية أو مائي. كما يتم التحكم في تدفق الهواء بالجمع بين منظم تدفق هواء قابل لتعديل وبرنامج توقيت PBASIC، يمكن استخدام الجهاز لتوليد المستخلصات وفقا لأي عدد من بروتوكولات المعرفة من قبل المستخدم. ونحن هنا بالتفصيل بالجمعية وتشغيل هذا الجهاز، فضلا عن اثنين من التطبيقات المحتملة: في المختبر خلية استمرارية التقييم واللوني للغاز الكتلي.

figure-introduction-2668
رقم 1: جهاز التدخين/فابينج- التخطيطي للجمعية المادية للجهاز التدخين/فابينج في السجائر/السجائر مثل السجائر الإلكترونية (e-cig) التكوين (A) وتكوين السجائر الإلكترونية للدبابات (ب). المكونات الرئيسية: 1) ميناء الاستنشاق؛ 2) مرطام جمع الأولية؛ 3) تجاوز مرطام؛ 4) بوخنر قارورة فخ الفراغ؛ 5) عادة فتح صمام الملف اللولبي؛ 6) BS1 متحكم دقيق؛ 7) منظم تدفق الهواء؛ 8) 510 ترابط الدبابات السجائر الإلكترونية الأساسية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Protocol

1-الجمعية العامة للجهاز

  1. تأمين 100 مل دورق بوخنر (الشكل 1، #4) إلى عصابة الصلب الوقوف وإنشاء مصيدة فراغ بملئه مع 50 جرام كلوريد الكالسيوم لتكون بمثابة ديسيككانت. ختم قارورة مع سداده مطاط من خلال ثقب والتفاف تقاطع سداده مع الفيلم البارافين وتشغيل ماصة من خلال الثقب.
  2. استخدام أنابيب الفينيل، الاتصال ماصة تمتد من السدادة إلى موصل خرطوم تقاطع تي.
  3. استخدام أنابيب الفينيل، الاتصال مرطام اثنين (الشكل 1، #2 & #3) ببعضها البعض والاتصال إخراج مرطام الثاني موصل خرطوم تقاطع تي.
  4. استخدام أنابيب الفينيل، قم بتوصيل منفذ الإدخال من مرطام الأولى بمثابة منفذ استنشاق (الشكل 1، #1).
  5. استخدام أنابيب الفينيل، توصيل ذراع الجانب دورق بوخنر إلى منفذ الإدخال من منظم تدفق الهواء (الشكل 1، #7) وميناء الخروج من الجهة المنظمة لتدفق الهواء إلى فراغ مضخة.
  6. قم بتجميع الدائرة حسب التخطيطي في الشكل 2A.
  7. تحميل برنامج PBASIC SVL.bs1 (الشكل 2B، متاح أيضا في https://github.com/ChastainAnderson/SVL) إلى متحكم BS1 (الشكل 1، #6) عن طريق محول تسلسلي والبرنامج الخاص بالشركة المصنعة.
  8. المكان 510 قاعدة الخيوط (الشكل 1 #8) في عصابة تقف المشبك.
  9. استخدام أنابيب الفينيل، الاتصال صمام الملف اللولبي (الشكل 1، #5) إلى نهاية الموصل خرطوم تي-تقاطع مجاناً.
    ملاحظة: يجب أن تكون كاملة وجاهزة للتشغيل الجهاز، تحقق جميع المفاصل للتأكد من أن الهواء ضيقة ويطبق خرطوم المشابك والشحوم الفراغ حسب الحاجة.

figure-protocol-1704
رقم 2: مدونة PBASIC والتخطيطي الكهربائية- يعرض الشكل 2A التخطيطي الكهربائية لتجميع الدوائر الكهربائية اللازمة لتنشيط كل صمام الملف اللولبي عادة مفتوحة واللولب تدفئة زر تنشيط السجائر الإلكترونية (من خلال 510 الخيوط الإلكترونية السجائر الدبابات قاعدة). المعلمات كهربائية لتدفئة اللولب (p: السلطة؛ R: المقاومة؛ والأول: الحالية) المتوقع وينبغي التحقق منها تجريبيا مع إنشاء جمعية متعدد الوظائف. يعرض الشكل 2B PBASIC توقيت البرنامج المطلوب للتحكم في الدائرة في الشكل 2 أ (متاحة أيضا في https://github.com/ChastainAnderson/SVL). الثوابت توقيت سفت & العلاج الوقائي المتقطع (#5 و #6) في وحدات من مرض التصلب العصبي المتعدد، ويتم تعيين إلى توفير وقت تنشيط من 2 ثانية وتوقف من 28 س. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

2-عينة من تخزين وإعداد

  1. تخزين جميع العينات التي لم فتحها السجائر التقليدية والإلكترونية في الظلام في أكياس بلاستيكية محكمة الإغلاق في درجة حرارة الغرفة.
  2. بمجرد فتح، تخزين العينات في أكياس بلاستيك محكم في 4 درجة مئوية، مع منشفة ورقية لامتصاص الرطوبة الزائدة.
  3. قبل حجته جميع العينات في humidor درجة حرارة الغرفة في الرطوبة ~ 60% على الأقل 30 دقيقة قبل استخدامها.

3-العامة العملية للسجائر الإلكترونية/دخان السجائر الهباء الجوي استخراج الجهاز

  1. تحديد الكتلة من كل السجائر الإلكترونية-كارتوميزير/خزان ما قبل-فابينج استخدام رصيد التحليلي. الفرق في الوزن فابينج قبل/بعد ما سيستخدم لتحديد الجرعات المناسبة.
    ملاحظة: 3R4F مرجع السجائر ومن المفترض أن يحتوي على 0.7 ملغ نيكوتين، ويمكن تحديد محتوى النيكوتين ماركات السجائر التجارية والأساليب التحليلية التقليدية13.
  2. لتطبيق نموذج 1، ملء خزان مرطام الأولية مع 4.3 مل من خلايا غشائي الثقافة المتوسطة. لتطبيق نموذج 2، ملء الخزان مع 5 مل الأسيتون.
  3. الإعدادية بالسجائر الإلكترونية أو السجائر التقليدية للاستخراج:
    1. إذا كان استخدام سجائر تقليدية، تطبيق قطعة من الشريط واضحة حول عامل التصفية ووضع علامة مرئية بسهولة حيث ينضم ورق السجائر عامل التصفية.
    2. في حالة استخدام سجائر مثل السجائر الإلكترونية، تأكد من البطارية مشحونة بشكل جيد ومحكم مشدود كارتوميزير للبطارية.
    3. في حالة استخدام دبابة سجائر إلكترونية، تأكد من أن يتم تحميل وحدة تخزين مناسبة للسجائر الإلكترونية السائل في الخزان والمسمار الدبابة على قاعدة الخيوط 510.
  4. إدراج غيض السجائر التقليدية أو الإلكترونية إلى استنشاق الميناء (الشكل 1، #1) وآمنة مع المشبك خرطوم.
  5. قم بتشغيل مضخة فراغ.
  6. ضبط مقياس تدفق سحب ل 1.65 للدقيقة لضمان نفخة 55 مل أكثر من 2 ثانية.
  7. قم بتشغيل متحكم دقيق. إذا كان استخدام سجائر تقليدية، الضوء السجائر على نفخة الأولى.
  8. تشغيل حتى المسقط المطلوب تركيز (في أجزاء لكل مليون أو % وزن/حجم) ويتحقق.
  9. تحديد الكتلة من كل السجائر الإلكترونية-كارتوميزير/الدبابات بعد التبخير باستخدام رصيد التحليلي. مقارنة هذا القياس بالقياس أخذ في الخطوة 3، 1 لتحديد مجموع كتلة المستهلكة. حساب تركيز الكتلة/حجم المذيبات المستهلكة. استخدام التركيز المولى للنيكوتين المستهلكة لتطبيع بين المنتجات.
    1. إذا تم استهلاك كتلة غير كافية، العودة السجائر الإلكترونية للجهاز وتستهلك المزيد.
    2. إذا تم استهلاك كتلة كافية أو زائدة، المضي قدما.

4-الترشيح والتخزين

  1. إذا كان يتم استخراج لاستخدامها لزراعة الخلايا، تصفية من خلال عامل تصفية حقنه الدائرة العامة 0.22 ميكرومتر.
  2. استخدام المقتطفات مباشرة أو تخزينها في-80 درجة مئوية. كجزء من التحضير لاندرسون, et al. 8، الأيروسول السجائر الإلكترونية اتضح أن تكون مستقرة لمدة أسبوعين على الأقل، وقد أنشئت استقرار السجائر دخان لمدة تصل إلى عامين من المحتالين، et al. 13.

5-تنظيف الجهاز

  1. بعد كل الاستخراج، شطف الأنابيب وخزانات الجهاز مع الإيثانول 70% والمياه للحيلولة دون تحمل أكثر من بين العينات.
  2. وبعد الشطف، تشغيل الجهاز فارغة للسماح بتدفق الهواء مساعدة تجفيف الخطوط بإيجاز.

6-نموذج التطبيق 1: امتصاص الأحمر محايدة خلية صلاحية الفحص

  1. القيام باستخراج كما هو مذكور أعلاه إلى 4.3 مل متوسط نمو الخلايا البطانية.
  2. يوم واحد من قبل، البذور الخلايا البطانية البشرية الوريد السري إلى 96 لوحات جيدا في كثافة 1 × 104 خلايا/فلين 100 ميليلتر من متوسط نمو الخلايا البطانية.
  3. علاج الخلايا بالاستعاضة عن المتوسط الثقافة غشائي الخلايا القديمة مع أما 100 ميليلتر من مستنبت خلايا بطانية جديدة ليكون بمثابة عنصر تحكم أو ميليلتر 75 خلية غشائي نمو متوسطة مختلطة مع 25 ميليلتر من خلاصة تركيز النيكوتين 2 مم المستهلكة (1.4 ملغ استهلاك النيكوتين إلى 4.3 مل غشائي خلية النمو المتوسطة) لتركيز 500 ميكرومتر بمثابة العلاج نهائي.
  4. كما أن العديد من مكونات الأيروسول السجائر الإلكترونية ودخان السجائر على حد سواء متقلبة، استخدام ختم إحباط للحفاظ على الآبار محكم.
  5. احتضان لوحة ح 18 – 24 في 37 درجة مئوية و 5% CO2.
  6. إعداد الأحمر محايدة تلطيخ الحل:
    1. إنشاء حل أسهم حمراء محايدة 100 x بتذويب 33 ملغ صبغة الحمراء محايدة في 10 مل من محلول الملح مخزنة بشكل مؤقت.
    2. قبل وقت قصير من استخدامها، يؤدي إلى تمييع 100 × 1: 100 حل الأسهم في خلية ثقافة المتوسط وإنشاء 1 x الأحمر محايدة تلطيخ الحل.
    3. احتضان الأحمر محايدة تلطيخ الحل عند 37 درجة مئوية مدة 30 دقيقة على الأقل قبل الاستخدام والاستخدام فورا.
      ملاحظة: من الطبيعي بالنسبة لبعض بلورات تعمد أثناء الحضانة إلى. وينبغي الحرص على تجنب تطبيق هذه البلورات إلى الآبار ثقافة الخلية. إذا لزم الأمر، يمكن استخدام عامل تصفية ميكرومتر.22 لتصفية الأسهم الحمراء محايدة وحلول المصبوغة.
  7. إزالة استخراج وإضافة 100 ميليلتر من الأحمر محايدة تلطيخ الحل الواحد جيدا، الاستخدام الزائد لإنشاء على الأقل ثلاثة آبار فارغة للقياس الكمي المناسب.
  8. احتضان اللوحة في ح 2 – 4 في شركة 37 درجة مئوية و 5%2.
  9. إزالة الأحمر محايدة تلطيخ الحل وتغسل 3 x بغمر في برنامج تلفزيوني.
  10. تطبيق الأحمر محايدة إزالة وصمة عار الحل (50% منزوع الماء، الإيثانول 49%، وحمض الخليك 1%).
  11. احتضان مالا يقل عن 10 دقيقة في درجة حرارة الغرفة مع الهز.
  12. قراءة امتصاص في 540 نانومتر.
  13. تحليل البيانات بطرح قيمة متوسط الآبار فارغة وتطبيع لمتوسط قيمة فارغة الرقابة المعدلة جيدا.

7-نموذج التطبيق 2: الفصل اللوني للغاز الكتلي

  1. القيام باستخراج أعلاه إلى 5 مل من الأسيتون.
  2. تشغيل الجهاز لتحقيق تركيز نهائي لأجزاء ~ 100 لكل مليون (وزن ه والسائلة المستهلكة/حجم الأسيتون) للنموذج الخاص بك.
  3. استخدام المحاقن زجاجية دقة، حقن 1 ميليلتر في محقن جهاز GC-MS. حقن في 250 درجة مئوية مع 01:20 تقسيم نسبة إلى نظام مطياف يزوج كروماتوجرافيا الغاز/الرباعي مزودة بعمود ZB-5 مع البروتوكول الفرن التالية: 1 دقيقة عند 50 درجة مئوية؛ منحدر 10 درجة مئوية/دقيقة إلى 140 درجة مئوية؛ منحدر 20 درجة مئوية/دقيقة إلى 300 درجة مئوية وعقد لمدة 10 دقائق.
  4. تتطابق مع أطياف الجماعية الناتجة إلى مكتبة المستهدفة لتحديد مكونات الأيروسول.

النتائج

خلال 24 ساعة التعرض للبشرية الوريد السري استخراج خلايا بطانية لاستخراج دخان السجائر التقليدية (CSE) أو السجائر الإلكترونية الهباء الجوي (ع)، وهناك كبيرة (التحكم مقابل CSE ف < 0.001؛ ومراقبة مقابل ع ف < 0.01؛ n = 6) تخفيض في بقاء الخلية (الشكل 3A). مقتطفات تم إنش...

Discussion

العناصر الأكثر أهمية لهذا البروتوكول هي ضمان الجهاز نظيفة في البداية وإنهاء كل استخراج، وضمان أن جميع الأختام الحفاظ على ذلك تدفق الهواء أن تظل متسقة. إذا لم يتم تنظيف الجهاز بشكل صحيح، هناك خطر تحمل أكثر بين العينات. بالإضافة إلى ذلك، إذا كان الجهاز هو ترك غير نظيفة لفترة ممتدة من الوقت ا?...

Disclosures

وتمول البرنامج "التبغ المنتج زمالة بحثية العلوم التنظيمية" تديرها جامعة تولين "التريا عميل خدمات الشؤون التنظيمية".

Acknowledgements

الكتاب تقر مساعدة الدكتور روبرت دوتسون "إدارة جامعة تولين في الخلية" والبيولوجيا الجزيئية لمساعدته في تحرير المخطوطة والدكتور جيمس باند من "قسم الكيمياء جامعة تولين" للمساعدة التي قدمها مع تصميم بروتوكول الكتلي. أصحاب البلاغ كذلك تقر إدارة جامعة تولين للخلية والبيولوجيا الجزيئية وقسم الكيمياء جامعة تولين لما تقدمه من الدعم واستخدام الفضاء والمعدات. وأيد هذا العمل "زمالة أبحاث العلوم التنظيمية التبغ المنتج" إلى جيم أندرسون من جامعة تولين مدرسة العلوم والهندسة.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
12 V AC/DC Wall Mount AdaptorDigi-KeyT1099-P5P-ND
2.2 Ohm ResistorsDigi-KeyA105635-NDUsed in tandem to generate the 4.4 Ohm resistance in Figure 2A
330 Ohm ResistorsDigi-Key330QBK-ND
510 Threaded BaseNJoyN/ARecovered by dismantalling a second generation NJoy electronic cigarette
Acetic Acid, GlacialSigma-AldritchA6283
Acetone (Chromatography Grade)Sigma-Aldritch34850
Basic Stamp Project BoardDigi-Key27112-NDThis board contains the BS1 Microcontroller, serial adaptor, power switch, and a barrel pin connector for the AC/DC Wall Mount Adaptor
Basic Stamp USB to Serial AdapterDigi-Key28030-NDAn optional component to allow the BS1 serial adaptor to communicate through USB
Buchner Flask (Vacuum Flask) 250 mLVWR10545-854
Clear Tape3MS-9783
Clear Vinyl Tubing, 3/8" IDWatts443064
EGM-2 Endothelial Cell Culture MediumLonzaCC-3162
EthanolPharmco-Aaper111000200
Flow RegulatorDwyerVFA-23-BV
Gas ChromatographVarian450-GC
Glass Syringe, 10 mLSigma-AldritchZ314552
Glass Syringe, 10 µLHamilton80300
High Vacuum Silicon GreaseDow Corning146355D
Hose ClampPrecision Brand35125
Human Umbilical Vein Endothelial CellsATCCPCS-100-013 
Mass SpectrometerVarian300-MS
Midget ImpingerChemglassCG-1820-01
Neutral RedSigma-AldritchN4638
Paraffin Film3MPM-992
Plate Seal RollerBioRadMSR0001
Plate Seal; FoilThermo276014
Ring Stand 20"American Educational Products7-G15-A
Solenoid Valve (normally open)US SolidUSS2-00081
Solid State RelayDigi-KeyCLA279-ND
Stand ClampEiscoCH0688
Syringe Filter, PES, 0.22 umMilliporeSLGP033RS
Syringe, 10 mLBD Syringe309604
Through Hole Stopper, Size 6VWR59581-287
Vacuum PumpKNF NeubergerN86KTP

References

  1. World Health Organization. . WHO Report on the Global Tobacco Epidemic, 2011. , (2011).
  2. Weaver, S. R., Majeed, B. A., Pechacek, T. F., Nyman, A. L., Gregory, K. R., Eriksen, M. P. Use of electronic nicotine delivery systems and other tobacco products among USA adults, 2014: results from a national survey. Int. J. Public Health. 61 (2), 177-188 (2016).
  3. Singh, T., et al. Tobacco Use Among Middle and High School Students - United States, 2011–2015. MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 65 (14), 361-367 (2016).
  4. Corey, C. G., Ambrose, B. K., Apelberg, B. J., King, B. A. Flavored Tobacco Product Use Among Middle and High School Students--United States, 2014. MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 64 (38), 1066-1070 (2015).
  5. Pisinger, C., Døssing, M. A systematic review of health effects of electronic cigarettes. Prev. Med. 69, 248-260 (2014).
  6. Callahan-Lyon, P. Electronic cigarettes: human health effects. Tob. Control. 23 (Suppl 2), ii36-ii40 (2014).
  7. Dinakar, C., O'Connor, G. T. The Health Effects of Electronic Cigarettes. N. Engl. J. Med. 375 (14), 1372-1381 (2016).
  8. Anderson, C., Majeste, A., Hanus, J., Wang, S. E-cigarette aerosol exposure induces reactive oxygen species, DNA damage, and cell death in vascular endothelial cells. Toxicol. Sci. Off. J. Soc. Toxicol. , (2016).
  9. U.S. Department of Health and Human Services. . The Health Consequences of Smoking: 50 Years of Progress. A Report of the Surgeon General. , (2014).
  10. Farsalinos, K., et al. Comparison of the Cytotoxic Potential of Cigarette Smoke and Electronic Cigarette Vapour Extract on Cultured Myocardial Cells. Int. J. Environ. Res. Public. Health. 10 (10), 5146-5162 (2013).
  11. Schweitzer, K. S., et al. Endothelial disruptive proinflammatory effects of nicotine and e-cigarette vapor exposures. Am. J. Physiol. - Lung Cell. Mol. Physiol. 309 (2), L175-L187 (2015).
  12. Putzhammer, R., et al. Vapours of US and EU Market Leader Electronic Cigarette Brands and Liquids Are Cytotoxic for Human Vascular Endothelial Cells. PLOS ONE. 11 (6), e0157337 (2016).
  13. Crooks, I., Dillon, D. M., Scott, J. K., Ballantyne, M., Meredith, C. The effect of long term storage on tobacco smoke particulate matter in in vitro genotoxicity and cytotoxicity assays. Regul. Toxicol. Pharmacol. 65 (2), 196-200 (2013).
  14. Roemer, E., et al. Mainstream Smoke Chemistry and in Vitro and In Vivo Toxicity of the Reference Cigarettes 3R4F and 2R4F. Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 25 (1), (2014).
  15. International Organization for Standards. . ISO 3088:2012 Routine analytical cigarette smoking machine – Definitions and standard conditions. , (2012).
  16. World Health Organization. . Standard Operating Procedure for Intense Smoking of Cigarettes. , (2012).
  17. Brown, C. J., Cheng, J. M. Electronic cigarettes: product characterisation and design considerations. Tob. Control. 23 (Suppl 2), ii4-ii10 (2014).
  18. Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco. . CRM No. 81 - Routine Analytical Machine for E-Cigarette Aerosol Generation and Collection - Definitions and Standard Conditions. , (2015).
  19. Thorne, D., Adamson, J. A review of in vitro cigarette smoke exposure systems. Exp. Toxicol. Pathol. 65 (7-8), 1183-1193 (2013).
  20. Klus, H., Boenke-Nimphius, B., Müller, L. Cigarette Mainstream Smoke: The Evolution of Methods and Devices for Generation, Exposure and Collection. Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 27 (4), (2016).
  21. Baker, R. The Development and Significance of Standards for Smoking-Machine Methodology. Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 20 (1), (2014).
  22. Thorne, D., Crooks, I., Hollings, M., Seymour, A., Meredith, C., Gaca, M. The mutagenic assessment of an electronic-cigarette and reference cigarette smoke using the Ames assay in strains TA98 and TA100. Mutat. Res. Toxicol. Environ. Mutagen. 812, 29-38 (2016).
  23. Thorne, D., Larard, S., Baxter, A., Meredith, C., Gaҫa, M. The comparative in vitro assessment of e-cigarette and cigarette smoke aerosols using the γH2AX assay and applied dose measurements. Toxicol. Lett. 265, 170-178 (2017).
  24. Herrington, J. S., Myers, C. Electronic cigarette solutions and resultant aerosol profiles. J. Chromatogr. A. 1418, 192-199 (2015).
  25. Yu, V., et al. Electronic cigarettes induce DNA strand breaks and cell death independently of nicotine in cell lines. Oral Oncol. 52, 58-65 (2016).
  26. Ji, E. H., et al. Characterization of Electronic Cigarette Aerosol and Its Induction of Oxidative Stress Response in Oral Keratinocytes. PLOS ONE. 11 (5), e0154447 (2016).
  27. Morgan, D. L., et al. Chemical Reactivity and Respiratory Toxicity of the -Diketone Flavoring Agents: 2,3-Butanedione, 2,3-Pentanedione, and 2,3-Hexanedione. Toxicol. Pathol. 44 (5), 763-783 (2016).
  28. Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco. . CRM No. 84 - Determination of Glycerin, Propylene Glycol, Water, and Nicotine in the Aerosol of E-Cigarettes by Gas Chromatographic Analysis. , (2017).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

131

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved