A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
ثلاث خطوات حاسمة في هذا البروتوكول هي ط) تطوير التكوين الصحيح والمسام اتساق الحبر المائية السليلوز، ثانيا) 3D الطباعة من السقالات في مختلف الهياكل مع الإخلاص جيدة الشكل والأبعاد والثالث) مظاهرة الخواص الميكانيكية في ظروف محاكاة الجسم لتجديد الغضاريف.
يوضح هذا العمل استخدام الطباعة ثلاثية الأبعاد (3D) لإنتاج السقالات مكعب مسامية استخدام السليلوز نانوي المائية الحبر، مع هيكل المسام التي تسيطر عليها والخصائص الميكانيكية. نانوكريستالس السليلوز (مركزا، 69.62 wt %) وقد وضع المائية استناداً إلى الحبر مع مصفوفة (الجينات الصوديوم والجيلاتين) 3D طباعتها إلى السقالات مع هيكل مسام موحد والتدرج (110-1,100 ميكرومتر). أظهرت السقالات معامل ضغط في النطاق من 0.20-0.45 الآلام والكروب الذهنية عند اختباره في محاكاة ظروف المجراة في (في الماء المقطر عند 37 درجة مئوية). في أحجام المسام ومعامل ضغط من السقالات 3D المتطابقة مع المتطلبات اللازمة لتطبيقات تجديد الغضاريف. يوضح هذا العمل أن اتساق الحبر يمكن التحكم بتركيز على السلائف والمساميه يمكن التحكم بواسطة عملية الطباعة ثلاثية الأبعاد وكل من هذه العوامل في المقابل يعرف الميكانيكية خصائص 3D الطباعة المسامية سقالة المائية. ولذلك يمكن استخدام هذا الأسلوب عملية اختﻻق السقالات هيكلياً وشكل تركيبي مخصصة وفقا للاحتياجات المحددة للمرضى.
السليولوز هو السكاريد تتكون من سلاسل خطية من β وحدات د-الجلوكوز المرتبط (1-4). وهو البوليمر الطبيعية الأكثر وفرة على الأرض ويستخرج من مجموعة متنوعة من المصادر، بما في ذلك الحيوانات البحرية (مثلاً، تونيكاتيس) والنباتات (مثل الخشب والقطن وقش القمح) ومصادر البكتيرية، مثل الطحالب (فالونيا مثلاً)، والفطريات، وحتى أميبا (البروتوزوا )1،2. الحصول على السليلوز النانو (CNF) ونانوكريستالس السليلوز (الحاسب الآلي) مع البعد واحد على الأقل في النانو من خلال المعالجات الميكانيكية والتحلل المائي الحمضي من السليولوز. ليس فقط لديهم خصائص السليلوز، مثل إمكانية تعديل المواد الكيميائية، والمنخفضة السمية، وتوافق مع الحياة، القابلة للتحلل، والمتجددة، ولكن لها أيضا خصائص النانو مثل ارتفاع مساحة محددة، الخصائص الميكانيكية العالية ، الخصائص الضوئية وانسيابية. هذه خصائص جذابة جعلت كنفس ومركزا مناسباً للتطبيقات الطبية الحيوية، أساسا في شكل ثلاثي الأبعاد (3D) السقالات المائية3. وتتطلب هذه السقالات الأبعاد المخصصة مع هيكل المسام التي تسيطر عليها والمترابطة المسامية. وأفادت مجموعتنا وآخرون نانومترى السليلوز مسامية 3D أعدت عن طريق الصب، واليكتروسبينينج، والتجميد4،،من56،،من78. غير أن السيطرة على هيكل المسام وتلفيق هندسة معقدة لا يتحقق من خلال هذه التقنيات التقليدية.
3D الطباعة هو أسلوب تصنيع مضافة، التي يتم إنشاء الكائنات 3D طبقة بطبقة من خلال ترسب الحبر9الكمبيوتر التي تسيطر عليها. مزايا الطباعة 3D على التقنيات التقليدية ليشمل حرية تصميم، الماكرو التي تسيطر عليها والأبعاد الدقيقة، تلفيق أبنية معقدة والتخصيص وإمكانية تكرار نتائج. وبالإضافة إلى ذلك، يوفر 3D الطباعة كنفس ومركزا أيضا التحالفات التي يسببها القص من جسيمات نانوية، يفضل اتجاهية، مسامية متدرجة ويمكن أن تمتد بسهولة إلى، بيوبرينتينج 3D10،،من1112 13 , 14 , 15-في الآونة الأخيرة، أفادت ديناميات مركزا تم محاذاة أثناء الطباعة 3D16،17. وقد تمكن التقدم في ميدان بيوبرينتينج 3D مطبوعة الأنسجة والأعضاء على الرغم من التحدي الذي ينطوي عليها مثل الاختيار وتركيز الخلايا الحية وعوامل النمو، تكوين الحبر الناقل، طباعة الضغوط وأقطار فوهة18 ،،من1920.
المسامية وقوة ضاغطة للسقالات التجدد الغضروف هي الخصائص الهامة التي تملي على الكفاءة والأداء. حجم المسام دوراً هاما للالتصاق والتمايز، وتكاثر الخلايا، وكذلك فيما يتعلق بتبادل المواد الغذائية و النفايات الأيضية21. ومع ذلك، هناك لا حجم المسام محددة التي يمكن أن تعتبر كقيمة مثالية، بعض الدراسات أظهرت بيواكتيفيتي أعلى مع مسام أصغر حجماً بينما الآخرين تبين أفضل تجديد الغضاريف مع المسام الكبيرة. ماكروبوريس (< 500 ميكرومتر) تيسير التمعدن النسيج، والإمداد بالمواد الغذائية والتخلص من النفايات في حين ميكروبوريس (150-250 ميكرومتر) تيسير مرفق خلية وأفضل الخصائص الميكانيكية،من2223. يجب أن يكون مزروع سقالة السلامة الميكانيكية كافية من الوقت للتعامل مع غرس وحتى انتهاء الغرض المنشود منه. معامل الضغط الكلي الغضروف المفصلي الطبيعي يقال في النطاق من 0.1-2 الآلام والكروب الذهنية حسب السن والجنس ومكان اختبار4،24،،من2526،27 ،،من2829.
في لدينا العمل السابقة11، استخدمت 3D الطباعة باختلاق بيوسكافولدس المسامية من كروسلينكيد مزدوجة إينتيربينيتراتينج البوليمر الشبكة (IPN) من حبر المائية التي تتضمن مركزا معززة في مصفوفة من الجينات الصوديوم والجيلاتين. مسار الطباعة 3D الأمثل لتحقيق السقالات 3D مع هياكل المسام موحدة والتدرج (80-2,125 ميكرومتر) حيث يفضل توجيه نانوكريستالس في اتجاه الطباعة (درجة التوجه بين 61-76%). وهنا، نحن هذا استمرار هذا العمل ويوضح تأثير المسامية على الخواص الميكانيكية ل 3D طباعة السقالات المائية في ظروف محاكاة الجسم. في وقت سابق أبلغ مركزا يستخدم هنا، لنا أن تكون سيتوكومباتيبلي وغير سامة (أي نمو الخلايا بعد 15 يوما حضانة كان أكد30). وعلاوة على ذلك، أعدت السقالات عن طريق التجفيف استخدام نفس مركزا، وأظهرت الجينات الصوديوم والجيلاتين المسامية عالية، وامتصاص عالية المالحة العازلة الفوسفات وسيتوكومباتيبيليتي تجاه الخلايا الجذعية الوسيطة5. والهدف من هذا العمل لإثبات تجهيز الحبر المائية والطباعة 3D من السقالات المليئة بالثغرات واختبار ضغط. ويرد في الشكل 1الخطط لتجهيز الطريق.
1-إعداد السلائف
2-إعداد الحبر المائية
3-قياس خصائص انسيابية المائية
الخبير: إجراء خصائص انسيابية باستخدام هندسة مخروط في لوحة سلس، CP25-2-SN7617، قطرها 25 مم، 2 ° زاوية الاسمية وارتفاع الفجوة 0.05 ملم عند 25 درجة مئوية.
4-ملف التحضير للطباعة ثلاثية الأبعاد
ملاحظة: يتم استخدام البرمجيات Cura 2.4.0 لتصميم 3D السقالات (20 ملم3) وجود ثلاثة أنواع من المسام. 1-زي مسام 0.6 مم، 2-الزي المسام من 1.0 مم والمسام 3-التدرج من نطاق 0.5-1 ملم.
5-3D الطباعة المسامية السقالات
6-Crosslinking 3D طباعة السقالات
7-ضغط الاختبار
ملاحظة: إجراء اختبارات الضغط مع 100 N تحميل الخلية في الماء عند 37 درجة مئوية.
ويظهر الحبر المائية نانوي مركزا على أساس إمالة غير نيوتن قوي رقيق السلوك (الشكل 2). الظاهر لزوجة 1.55 × 105 Pa.s بمعدل قص منخفض (0.001 s-1) يسقط خمسة أوامر للحجم إلى قيمة Pa.s 22.60 50 s-1 (إيتش فايف زيرو s-1 يجري بمعدل قص نموذجي ذوي خبرة أثناء الطباعة 3D) بمعدل قص<...
الطباعة ثلاثية الأبعاد تتطلب خصائص انسيابية ملائمة الحبر المائية. الحبر عالية اللزوجة سيتطلب الضغوط القصوى لقذف به حين الحبر منخفضة اللزوجة لا سوف تحافظ على شكلها بعد البثق. يمكن التحكم في لزوجة الحبر المائية من خلال تركيز المكونات. بالمقارنة مع لدينا العمل السابقة11، يتم زي?...
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
هذه الدراسة يدعمه ماليا كنوت واليس والنبرغ مؤسسة (مركز العلوم الخشب والنبرغ)، "مجلس البحوث السويدية"، VR (بيويال، DNR 2016-05709 و DNR 2017-04254).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
60 mL syringe | Structur3D Printing | ||
Alginic acid sodium salt | Sigma-Aldrich | 9005-38-3 | |
Anhydrous calcium chloride | Sigma-Aldrich | 10043-52-4 | |
Clamps, three pronged, Talon | VWR | 241-0404 | 102 mm, Dual adjustment clamp, large, clamp extension 127 mm |
Cura 2.4.0 | Ultimaker | Free slicing software | |
Discov3ry Complete | Structur3D Printing | Ultimaker 2+ 3D printer integrated with Discov3ry paste extruder | |
Gelatin from bovine skin | Sigma-Aldrich | 9000-70-8 | |
Glutaraldehyde solution 50 wt. % in H2O | Sigma-Aldrich | 111-30-8 | |
homogenizer | SPX | APV-2000 | |
Instron 5960 | Instron | Instron 5960, Biopuls Bath, 100 N load cell, 37 °C, | |
Physica MCR 301 rheometer | Anton Paar | CP25-2-SN7617, gap height 0.05 mm, 25 °C | |
Sorvall Lynx 6000 centrifuge | AB Ninolab | s/n 41881692 | F12-rotor (6x500 ml) |
stainless steel nozzle | Structur3D Printing | 800, 600 and 400 µm | |
thingsinverse | MakerBot's | sharing and downloading 3D printable things in form of stl files | |
ultra sonication | Qsonica, LLC | Q500 | |
Unbarked wood chips | Norway spruce(Picea abies) | dry matter content of 50–55% |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved