لبدء التقييم الخلوي لتأكيد تزامن دورة استرا ، اجمع الخلايا المهبلية برفق من فأر CD1 عن طريق لف المسحة على جدار المهبل باستخدام مسحة صغيرة مبللة مسبقا لطاخة الخلايا المهبلية المجمعة في قطرة 20 ميكرولتر من الماء المعقم على شريحة مجهرية وجففها في الهواء. تحت المجهر ، استخدم التكبير 100X مع إضاءة المجال الساطع لتقييم وجود الخلايا الظهارية المتقرنة. للتلاعب بعنق الرحم ، ضع أنثى متلقية على الجزء العلوي من القفص مع رف سلكي قبل حوالي 0.5 ساعة من التلقيح مما يسمح للفأر بإمساك سطح قضيب القفص بالقرب من قاعدة ذيل الفأر باستخدام الإبهام والسبابة وزاوية الذيل لأعلى أثناء تثبيت الحيوان.
أدخل الطرف الحاد لقضيب بلاستيكي صغير عن طريق المهبل للاتصال بعنق الرحم واهتز لمدة 30 ثانية عن طريق ملامسة أداة التشذيب. لإجراء نقل الحيوانات المنوية غير الجراحي للتلقيح الاصطناعي ، ضع جهاز التلقيح على ماصة P200 مضبوطة على 40 ميكرولتر وقم بإزالة الغطاء الواقي. قم بإزالة حصة من عينة الحيوانات المنوية السعوية من الطبق الموضوعة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون ونقلها إلى طبق زراعة الأنسجة 35 ملم بدون زيت عند 37 درجة مئوية ، اضغط على مكبس الماصة إلى المحطة الأولى.
اخفض طرف القسطرة في عينة الحيوانات المنوية وقم بتحميل 40 ميكرولترا من العينة ببطء في جهاز النقل. قم بإزالة الزيت المتبقي من الجزء الخارجي لجهاز التلقيح باستخدام نسيج ماص قبل وضع الماصة جانبا. بعد ذلك ضع الأنثى المتلقية على أعلى قفص رف الأسلاك.
امسك الفأرة الأنثوية في موضعها عن طريق الإمساك بالقرب من قاعدة الذيل ، باستخدام الإبهام والسبابة وزاوية الذيل لأعلى مع تثبيت الحيوان. ضع المنظار الصغير في المهبل وأدخل قسطرة جهاز التلقيح في المنظار عبر عنق الرحم وفي الرحم. بمجرد اتصال محور الجهاز بالمنظار ، قم بتوزيع الحيوانات المنوية عن طريق الضغط على مكبس الماصة إلى المحطة الأولى.
بمجرد الانتهاء من ذلك ، قم بإزالة الجهاز والمنظار.
