ابدأ بتشغيل برنامج تشغيل المجهر. ضمن علامة التبويب الإعداد ، اختر نوع اللوحة المحدد مسبقا الصحيح. اضغط على إخراج للوصول إلى مرحلة اللوحة لوضع اللوحة ثم اضغط على تحميل لتحميل اللوحة في المجهر.
بعد ذلك ، اختر الهدف الجوي 20 مرة بفتحة عددية تبلغ 0.4. اضبط طوق التصحيح لهدف الهواء 20x لسمك اللوحة لنوع اللوحة المختار. اضبط تحديد القناة على Hoechst 33342 ، واضبط معلمات التصوير لقناة Hoechst.
اختبر الإعدادات المختارة عن طريق تحديد بئر تمثيلي داخل اللوحة. في التخطيط المحدد ، حدد جميع آبار الألواح والحقول. ثم اختر المجلد المقابل ضمن المهام عبر الإنترنت لنقل البيانات إلى برنامج التحليل عبر الإنترنت.
يتم حفظ إعدادات التجربة. ضمن علامة التبويب تجربة التشغيل ، يتم تسمية اللوحة التي سيتم تصويرها ، وتبدأ عملية التصوير. لبدء تحليل الصور ، قم أولا بتشغيل البرنامج ، واختر الصور المراد تحليلها ، ثم انقر فوق علامة التبويب تحليل الصور لبدء تجزئة الصورة.
بعد ذلك ، انقر فوق علامة الجمع في علامة تبويب صورة الإدخال لإضافة كتلة إنشاء جديدة. من القائمة ، انقر فوق البحث عن النوى. اختر طريقة التجزئة الأنسب بعد فحص الكائنات المجزأة على الصورة.
اضبط معلمات الكشف داخل طريقة التجزئة. انقر فوق تحديد النتائج واختر الإخراج القياسي كطريقة. انقر فوق حفظ التحليل في قاعدة البيانات لحفظ خط أنابيب التحليل.
ضمن علامة التبويب تحليل الدفعات ، انقر فوق خط الأنابيب المحفوظ الذي سيظهر ضمن خيار الطريقة. ثم حدد البيانات المراد تحليلها. ابدأ التحليل بالنقر فوق بدء التحليل لإنشاء مجموعة البيانات لأرقام الخلايا.
يعتمد الفحص المستند إلى الخلية الموصوف على قراءة المراسل التي تعكس بشكل غير مباشر التغييرات في نشاط ATG4B ، مما يتيح اكتشاف كل من مثبطات ومنشطات نشاط ATG4B. يتم استخدام نسبة نشاط ATG4B لكل مركب إلى صلاحية الخلية كقيمة قطع لتحديد مثبطات ATG4B. تشير النسب الأكبر من واحد إلى منشطات ATG4B المحتملة والنسب الأقل من واحد تشير إلى مثبطات ATG4B المحتملة.
