عالج مرور اثنين من AdMSCs مع وسائط تحتوي على 10 نانوجرام لكل ملليلتر من TNF alpha لمدة 24 ساعة أو بدون TNF alpha للخلايا غير المحفزة. بعد غسل الخلايا وحضنها في وسائط خالية من المصل لمدة أربع ساعات ، أضف 25،000 AdMSCs إلى كل ملحق واحتضانها لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية. نضح محتويات كل من البئر وإدخالها ، ثم اغسلها مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني مع ترك ملليلتر واحد من برنامج تلفزيوني في كل بئر.
باستخدام الملقط ، قم بإزالة الحشوات واحدة تلو الأخرى وامسح الحجرة العلوية برفق ولكن بدقة باستخدام قطعة قطن لإزالة الخلايا غير المهاجرة. نضح ما تبقى من PBS وماصة 500 ميكرولتر من محلول الكريستال البنفسجي إلى البئر والغرفة العلوية للإدخال. نضح محلول البنفسجي البلوري من البئر والغرفة العلوية للإدراج بعد الحضانة لمدة ساعة واحدة.
بعد غسل ومسح الغرفة العلوية ، ضع الملحق في لوحة بئر جديدة مكونة من 24 بئرا تحتوي على ملليلتر واحد من PBS. باستخدام مجهر مقلوب مع كاميرا ، قم بتصوير أربع مناطق عشوائية باتجاه مركز الإدراج تحت هدف 10 مرات. قم بتحميل الصور إلى برنامج معالجة الصور المفضل واضبط الخلفية لتحسين التباين مع الخلايا الملطخة باللون الأرجواني.
أظهر CLIA المصاب ب 22L زيادة في تعبير mRNA للعلامات الالتهابية CCL2 و CCL5 و IL1 beta ، وعلامة الخلايا النجمية S100 beta مقارنة بأولئك الذين عولجوا ب NBH. أدى التثاقف مع AdMSCs إلى تقليل التعبير عن السيتوكينات الالتهابية CCL2 و CCL5 و IL1 beta ، ولكن ليس TNF alpha لكل من الخلايا المصابة MBH و 22L. أظهرت BV2s المزروعة مع AdMSCs انخفاضا في mRNA لعلامات الالتهاب IL1 beta و IL-6 و TNF alpha والبروتين المكمل C1qa في كل من الخلايا المعالجة ب NBH و RML.
بالإضافة إلى ذلك ، خفضت AdMSCs جين الخلايا الدبقية الصغيرة M1 CD16 وزادت من علامة الخلايا الدبقية الصغيرة M2 ARG-1. اقترح اختبار الترحيل في المختبر أن AdMSCs أظهرت هجرة كبيرة نحو الوسائط التي تحتوي على 1٪ RML.
