لتحضير العينة لثقافة التروية باستخدام المفاعل الحيوي المطبوع 3D. في خزانة التدفق الصفحي ، ضع عينات الشريان السباتي الخنازير المعزولة في وسائط النقل الباردة. باستخدام شفرة مشرط ، قم بإزالة النسيج الضام الزائد وتقليم نهايات الأنسجة.
ثم اغسل المنديل مرتين في وسائط النقل الباردة. بعد ذلك ، ضع المنديل في وسائط النقل على شاكر مداري لمدة لا تقل عن 30 دقيقة لغسل نهائي شامل. بعد ذلك ، قم بتوصيل جزء غير متفرع من الشريان المغسول بنظام المفاعل الحيوي المصنع باستخدام وصلتين شائكتين.
وقم بتثبيته باستخدام رابطة وعاء مصنوعة من روابط السيليكون الوعائية. باستخدام حقنة صغيرة متصلة بوصلة الإغراء الأولى ، قم بتدفق الوسائط برفق عبر الشريان لضمان سالكها. بعد تثبيت الشريان بالملحق المصنع ، املأ مساحة التفاعل بوسائط التروية.
بعد ذلك ، املأ حلقة الدوران اللمعية بعناية بالوسائط ، وقم بإزالة أي هواء متبقي من النظام. أخيرا ، قم بتوصيل مساحة التفاعل بنظام التروية المجمع ، واستكمال الدورة الدموية. لأداء ثقافة التروية ، ضع نظام التروية في حاضنة.
بعد توصيله بمضخة تمعجية ، قم بتوصيل أي أنظمة اكتساب إضافية ، مثل مستشعرات الضغط. اسمح للنظام بالتوازن بين عشية وضحاها بمعدل تدفق وسائط منخفض يبلغ حوالي 10 إلى 15 ملليلتر في الدقيقة. في اليوم التالي ، قم بزيادة التدفق بشكل تدريجي حتى يتم تحقيق معدل تدفق نهائي يبلغ 35 ملليلتر في الدقيقة.
كل ثلاثة أيام ، استبدل 50٪ من الوسائط عن طريق توصيل حقنة واحدة بوسائط جديدة بمنفذ تبادل الوسائط الأقرب إلى المضخة ومحقنة فارغة بالميناء الأقرب إلى الخزان لجمع الوسيط المستهلك. بعد التجربة ، باستخدام مقص جراحي معقم ، قم بحصاد الأنسجة من غرفة التفاعل عن طريق تقليم نهايات الأنسجة المتصلة بالمفاعل الحيوي. كشف التصوير البؤري باستخدام علامات خاصة بالعضلات البطانية والملساء أن البنية الطبيعية للشريان تم الحفاظ عليها جيدا والحفاظ عليها طوال الوقت ، بدءا من وقت الحصاد ، إلى التنظيف والمعالجة ، وحتى بعد ثقافة التروية.
ومع ذلك ، أدت المعالجة غير الصحيحة أثناء المعالجة إلى فقدان البطانة قبل المزرعة ، وأظهر تطبيق ظروف الاستزراع غير الفسيولوجية مثل البدء المفاجئ للتدفق العالي تلفا في اللمعة. كشف التقييم النسيجي للأنسجة باستخدام تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوزين وتلطيخ التألق المناعي في وقت الحصاد وبعد سبعة أيام من زراعة التروية أن التشكل والتوزيع العام للخلايا في جدار الوعاء الدموي قد تم الحفاظ عليهما طوال الوقت.
