Releasing Murine Neural Stem Cells by Stereotaxic Intracerebroventricular Injection of Release Cocktail

ابدأ بإعطاء 0.3 ملليغرام لكل ملليلتر من البوبرينورفين تحت الجلد للفأر المخدر. جبل الفئران على الإطار المجسم. بعد ذلك ، استخدم ماكينة حلاقة لحلق الفراء من الرأس.

تطهير الجلد مع ثلاث جولات بالتناوب من 10 ٪ من اليود البوفيدون والكحول ، وذلك باستخدام مسحات القطن معقمة ، وفرك في اتجاهات مختلفة لمدة ثلاث إلى خمس ثوان في كل مرة. ضع مرهم العين لمنع الجفاف. الآن ، قم بعمل شق بطول سنتيمترين على طول خط الوسط للرأس باستخدام مشرط معقم ، ثم نظف الجمجمة بدقة باستخدام مسحات معقمة ومحلول ملحي.

حدد البريجما باستخدام إبرة حقنة هاملتون سعة 10 ميكرولتر مثبتة على جهاز التجسيم واضبطها على 00. حرك إحداثيات الجهاز الأمامية الخلفية والجانبية. قم بإنشاء ثقب لدغ ملليمتر واحد باستخدام مثقاب الأسنان.

قم بتحميل أربعة ميكرولترات من كوكتيل الإطلاق في حقنة هاميلتون سعة 10 ميكرولتر ، ثم اخفض الإبرة بعناية بحافة حادة أو مخروطية للاتصال بالجافية. أدخل الإبرة إلى العمق المطلوب البالغ 3.5 ملم. لبث اثنين ميكرولتر من كوكتيل الإفراج بمعدل ميكرولتر واحد في الدقيقة.

اترك الإبرة في مكانها لمدة دقيقتين إضافيتين ، ثم استركبها ببطء لمنع ظهور كوكتيل الإطلاق. خياطة شق باستخدام 5/0 النايلون وتنظيف المنطقة خياطة مع مطهر. ثم نقل إلى منطقة مراقبة ما بعد العملية.

أدى حقن أكثر من ثلاثة ميكرولتر من كوكتيل الإطلاق إلى إصابات ميكانيكية غير محددة. أدى حقن اثنين من ميكرولتر من الكوكتيل إلى ظهور مجموعات إيجابية مناعية مزدوجة الكورتين كانت مرئية حتى بعد ثمانية أشهر. كشف تلطيخ الدماغ المناعي عن مواقع التعرية على طبقة البطانة العصبية ، بالقرب من مستوى الحقن فقط.

لوحظ انخفاض تدريجي في اضطرابات طبقة البطانة العصبية في المناطق الخلفية والأمامية من المنطقة تحت البطانة العصبية.