ابدأ برش الفأر الرحيم بشكل صحيح بنسبة 75٪كحول لتطهير الجلد. ثم ضع الماوس في وضع ضعيف. ارفع جلد منطقة بطن ، وباستخدام مقص جراحي ، قم بعمل شق صغير فيه.
ثم باستخدام المقص ، افصل بصراحة الجلد وعضلات البطن من الحوض إلى الرقبة ، على طول خط الوسط البطني. كشف القلب والرئتين عن طريق قطع الحجاب الحاجز والأضلاع على طول جانبي خط الوسط. بعد ذلك ، قم بإزالة الكبد والطحال والأمعاء والكلى بعناية ، وتجنب تلف جدار الأمعاء.
بعد ذلك ، قم بإزالة الرئتين والمريء. الآن ارفع القلب برفق باستخدام ملقط مثبت بيد واحدة وافصل الشريان الأورطي عن العمود الفقري بمقص جراحي مثبت في اليد الأخرى. ثم ضع القلب والشريان الأورطي في طبق بتري 60 ملم ، يحتوي على مضادات حيوية مكملة ب PBS.
استرجع ملقط الجراحة المجهرية والمقص المجهري من الكحول ، واشطفها في 25 ملليلتر من برنامج تلفزيوني لإزالة الكحول الزائد. العمل تحت المجهر المجسم، وإزالة الغدة الصعترية والأنسجة الأخرى من القلب والشريان الأورطي. ثم قم بإزالة القلب ، وترك الشريان الأورطي مع الأنسجة الدهنية المحيطة بالأوعية الدموية أو PVATs.
نقل الشريان الأورطي جنبا إلى جنب مع PVATs إلى طبق بتري 60 ملم نظيفة تحتوي على المضادات الحيوية مكملة PBS. باستخدام زوج واحد من ملقط الجراحة المجهرية ، أمسك الشريان الأورطي ، وباستخدام زوج آخر ، اسحب الأنسجة الدهنية المرفقة لفصل PVATs عن الشريان الأورطي. قم بإزالة أكبر قدر ممكن من الأنسجة الوعائية مع التسبب في الحد الأدنى من الضرر ل PVATs.
أخيرا ، قم بنقل PVATs التي تم جمعها إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 2 ملليلتر ، يحتوي على مكملات المضادات الحيوية ، والجلوكوز العالي ، و DMEM ، الموضوعة على الجليد.
