لبدء الطباعة 3D من تركيبات هيدروجيل ضوئي ، ضع المحقنة الزجاجية مع الحبر الحيوي هيدروجيل الذي يحتوي على الخلايا الليفية داخل رأس الطباعة وإرفاق مكونات رأس الطباعة مع ضمان تجميع ثابت للطباعة. ثم باستخدام أسهم الاتجاه في برنامج Pronterface ، اضبط موضع إبرة البثق يدويا وبعناية داخل ملاط حمام الدعم في وسط بئر لوحة البئر. اترك ملليمترا واحدا على الأقل من الملاط أسفل طرف الإبرة.
بمجرد وضع طرف الإبرة بشكل صحيح ، اضغط على زر الطباعة في برنامج Pronterface وانتظر حتى تكتمل الطباعة. كرر الخطوات الموضحة مسبقا حتى يتم الحصول على العدد المطلوب من التركيبات المطبوعة بيولوجيا. بعد الطباعة ، اترك لوحة البئر مع تغطية التركيبات في درجة حرارة الغرفة في خزانة السلامة البيولوجية لمدة ساعة واحدة.
وهذا يسمح بحدوث البلمرة المحفزة للقاعدة باستخدام الحبر الحيوي الهيدروجيل القابل للتعديل الضوئي. ثم ضع صفيحة البئر مع التركيبات المطبوعة بيولوجيا ثلاثية الأبعاد في حاضنة معقمة 37 درجة مئوية لمدة 12 إلى 18 ساعة لإذابة ملاط حمام الدعم. بعد ذلك ، داخل خزانة السلامة الحيوية ، قم بتغيير الوسائط المحيطة بالتركيبات المطبوعة بيولوجيا.
للقيام بذلك ، قم بإزالة الوسائط وحمام دعم الجيلاتين المذاب يدويا من الآبار دون إزعاج البنيات. ثم أضف حجما مناسبا من وسائط المصل المنخفض إلى كل بئر. مرة أخرى ، قبل 24 ساعة من النقطة الزمنية المرغوبة للتقوية ، استبدل الوسائط الموجودة في الآبار بوسائط مصل منخفضة مكملة ب 2.2 مللي مولار معقم LAP.
في النقطة الزمنية الإلزامية للتقوية ، قم بإزالة نصف الوسائط من الآبار المراد تقويتها وضع اللوحة بدون غطاء تحت الأشعة فوق البنفسجية أو الأشعة فوق البنفسجية لجهاز OmniCure. قم بتشغيل ضوء الأشعة فوق البنفسجية باستخدام مرشح تمرير النطاق 365 نانومتر لتقوية الهياكل لمدة خمس دقائق. بمجرد تصلبها ، قم بإزالة الوسائط المتبقية من هذه الآبار قبل إضافة وسائط مصل منخفضة جديدة إلى كل بئر.
أعد اللوحة إلى الحاضنة حتى إجراء دراسة تنشيط الخلايا الليفية في النقطة الزمنية المطلوبة ، سهل الجمع بين الحبر الحيوي الحمضي وملاط حمام الدعم الأساسي بلمرة التركيبات المطبوعة بيولوجيا 3D والحفاظ على الهياكل الأسطوانية. أظهر الفحص المجهري للهيدروجيل المسمى بالفلورسنت المسام داخل الهيدروجيل الناجم عن جزيئات الجيلاتين الدقيقة في حمام الدعم. أظهر الفحص المجهري متحد البؤر التحكم المكاني في التصلب الزائد في 3D.
كشفت فحوصات صلاحية الخلايا الليفية أن التركيبات التي يبلغ سمك جدارها 300 ميكرون ، ولديها 4 ملايين خلية لكل ملليلتر تفوقت على جميع الظروف الأخرى في كل نقطة زمنية. بلغت الصلاحية ذروتها في اليوم السابع ، حيث كان حوالي 91٪ من الخلايا ملطخة حية ، وبحلول اليوم 14 ، كانت 85٪ لا تزال قابلة للحياة.
