زراعة جلد الدجاج لدراسة تكوين الأعضاء

للبدء ، احتضان بيض الدجاج المخصب في حاضنة رطبة عند 38 درجة مئوية. ثم ضع جنين الدجاج في المرحلة من 28 إلى 32 في طبق بتري 60 ملم مليء ب HBSS. بعد تشريح جلد الجنين الظهري ورأسه ، اسحب براعم الأطراف برفق لإعادة وضع الجانب البطني من الجسم لأسفل.

الآن ، على طول جانبي جسم الجنين ، قم بعمل شق أمامي إلى خلفي. قبضة براعم الأطراف طوليا مع زوج من ملقط لتحقيق الاستقرار في الجسم. استخدم ملقط صانع الساعات لتقشير الجلد بعناية من الرقبة إلى منطقة الذيل.

استخدم مقصا حادا لإزالة أي أنسجة متبقية تحت الجلد لا تزال ملتصقة بالجلد المقشر بدقة وتنعيم حواف الجلد. بعد ذلك ، أضف ملليلتر من DMEM المكمل إلى كل بئر من طبق من ستة آبار. بعد إضافة المضادات الحيوية إلى الآبار ، ضع ملحق زراعة الأنسجة المعقمة داخل البئر ، مع التأكد من أن الوسط يحيط بالجزء الخارجي من ملحق الاستزراع.

ثم حرك الجلد إلى ملعقة أثناء غمره في HBSS لمنع التجعيد والطي. بمجرد الانتهاء من ذلك ، انقل الجلد المستأصل إلى طبق يحتوي على HBSS. حرك الجلد ببطء من الملعقة على ملحق الثقافة دون طي.

باستخدام ماصة 200 ميكرولتر ، قم بإزالة أي HBSS زائد من الملحق. أخيرا ، احتضان مزارع زراعة الجلد عند 37 درجة مئوية بمزيج من 5٪ ثاني أكسيد الكربون و 95٪ هواء. استبدل الوسط كل يومين.

تطورت ريشة البريمورديا إلى براعم ريش قصيرة بعد يومين في الثقافة. وتطورت براعم الريش الطويلة بعد أربعة أيام في الثقافة. كانت اللافتات الجلدية أكثر نضجا في خط الوسط منها على الجانبين.