للبدء ، قم بإصلاح أنسجة الرئة الخنازير في 4٪ بارافورمالدهيد في درجة حرارة الغرفة لمدة 48 ساعة. ثم انقل أنسجة الرئة إلى أنبوب مخروطي سعة 50 ملليلتر يحتوي على 30 ملليلتر من PBS مع 0.01٪ أزيد الصوديوم. احتفظ بكوب بلاستيكي ناعم ومقص معقم جاهزا.
سخني الأغاروز في الميكروويف حتى يصل إلى نقطة الغليان. ثم قم بتبريده إلى 42 درجة مئوية في حمام مائي. قم بتخزينه في حمام مائي حتى يصبح جاهزا للاستخدام.
قم بإزالة خزعة الرئة من محلول PBS Azide . استخدم ملقط ناعم ومقص معقم لتشريح فصوص الرئة بعناية إلى كتل أصغر. بعد ذلك ، قم بقطع منتصف كوب بلاستيكي.
صب كمية صغيرة من الأغاروز في قاع الكوب. ضع غطاء أنبوب مخروطي سعة 50 ملليلتر مع إزالة حافته على سطح أغارو. قم بتخزين هذا الإعداد عند أربع درجات مئوية لمدة خمس دقائق للسماح للأغاروز بالتصلب.
بمجرد أن يصلب الأغاروز ، أخرج الكوب البلاستيكي من الثلاجة. الآن صب حوالي ملليلتر واحد من الأغاروز السائل على الغطاء. ثم ضع كتلة أنسجة الرئة برفق على الغطاء.
بمجرد أن يصلب الأغاروز ، يغمر أنسجة الرئة ببطء في الأغاروز السائل. قم بتبريد الإعداد على حرارة أربع درجات مئوية لمدة 15 دقيقة تقريبا حتى يصبح الأغاروز صلبا. استخدم شفرة حادة لإزالة أي أغاروز زائد يحيط بأنسجة الرئة بعناية.