Setting Up an Acoustic Assembly System and Cell Culture Harvesting for Generating Uniform Cell Spheroids

للبدء ، تعقيم غرفة الجهاز الصوتي بنسبة 75 ٪ الكحول لمدة خمس دقائق. بعد ذلك ، قم بتنظيف الجهاز باستخدام برنامج تلفزيوني معقم وقم بتشعيعها بضوء الأشعة فوق البنفسجية لمدة ساعة واحدة. قم بتركيب الجهاز الصوتي المعقم على منصة المجهر لمراقبة الرؤية العلوية لداخل الغرفة.

ضع مجهرا رقميا على جانب الجهاز خاليا من محولات الطاقة PZT ، مما يتيح مراقبة الرؤية الجانبية للغرفة من الداخل. قم بتوصيل الأسلاك بشكل مستقل من محولات الطاقة الثلاثة PZT في سلسلة بثلاثة مضخمات طاقة وثلاث قنوات إخراج لمولدات الوظائف. برمجة الإعدادات على مولدات الوظائف لكل محول طاقة بناء على معاهدة التعاون بشأن البراءات ، مع تحديد معلمات مثل أشكال الموجات الجيبية والتردد والسعة.

خلايا 3CA المزروعة في DMEM تستكمل مع 10٪ FBS و 1٪ البنسلين الستربتومايسين في قارورة زراعة الخلايا T25. عندما تصبح الخلايا متقاربة بنسبة 80٪ ، اغسل الثقافة مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني. بعد إزالة PBS ، أضف ملليلتر من 0.05٪ trypsin-EDTA إلى القارورة واحتضانها عند 37 درجة مئوية لانفصال الخلايا.

أضف ملليلتر من وسط زراعة الخلايا الكامل إلى الدورق لوقف التربسين. نقل تعليق الخلية إلى أنبوب 15 ملليلتر وأجهزة الطرد المركزي في 200 غرام لمدة خمس دقائق.