لتحضير محلول الحبر الحيوي ، امزج كمية مناسبة من تعليق الخلايا C3A مع محلول gelMA المعقم. قم بتلطيخ كرويات الخلايا C3A بمحلول تعقب الخلايا الدقيقة عند 37 درجة لمدة 20 دقيقة. لغسل الخلايا ، أولا ، قم بإزالة supernatin عن طريق الطرد المركزي ثم إضافة وسط زراعة الخلايا الطازجة.
أضف ما لا يقل عن مليلتر من الحبر الحيوي إلى حجرة الجهاز الصوتي المعقم. قم بتشغيل مولد الوظائف ومضخم الطاقة لبدء تشغيل كل محول طاقة PZT لتوليد مجموعة 3D من مجاميع الخلايا. قم بربط الحبر الحيوي باستخدام الضوء الأزرق لمدة 30 ثانية لإنشاء سقالات هيدروجيل ثلاثية الأبعاد ، مغلفة مجاميع الخلايا المجمعة صوتيا.
بعد ذلك ، قم بنقل سقالة هيدروجيل 3D بعناية من الغرفة إلى طبق بتري. قطعها إلى قطع صغيرة باستخدام ماكينة حلاقة نظيفة ، ثم أضف وسط زراعة الخلايا إلى طبق بتري. احتضان كرويات الخلايا C3A في نقاط زمنية مختلفة في ملليلتر واحد من PBS يحتوي على ميكرولتر واحد من الكالسيوم صباحا وميكرولتر من يوديد البروبيديوم لمدة 15 دقيقة عند 37 درجة مئوية.
شطف العينة المضمنة في سقالات هيدروجيل مرتين مع برنامج تلفزيوني. بالنسبة للكرويات المسترجعة ، قم بإجراء الطرد المركزي عند 200 جرام لمدة خمس دقائق واغسله مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني. باستخدام مجهر مضان ، راقب الأجسام الكروية والتقط الصور.
تم ترتيب مجاميع الخلايا في نمط صفيف النقاط 3D العادي مع إشارة الفلورسنت الخضراء. تم دمج مجاميع C3A gelMA المجمعة تدريجيا وشكلت كرويات ضيقة بحلول اليوم الثالث ، مصحوبة بزيادة في قطر الكرة الأرضية. ظلت صلاحية كرويات الخلية جيدة قبل اليوم الثالث ، لكنها انخفضت قليلا بعد أسبوع من الثقافة.
حافظت الأجسام الكروية التي تم إطلاقها على مورفولوجيا كروية جيدة مع توزيع ضيق الحجم جنبا إلى جنب مع الجدوى المرغوبة والتعبير عن الألبومين.
