معايرة مطياف الكتلة لفحص الدهون مع وسم النظائر المستقرة بواسطة LC-TIMS-TOF MS / MS

لبدء مطياف الكتلة ، أو معايرة MS ل LC-TIMS-TOF-MS / MS ، افتح برنامج التحكم TIMS ، وضمن علامة التبويب الفرعية المعايرة ، انقر فوق m / z ، وحدد مزيج الضبط من Dropbox ، وانقر فوق معايرة في الزاوية اليمنى السفلية. استمر في النقر فوق معايرة حتى يتم تحقيق درجة 100٪. الآن حدد علامة تبويب التنقل ، واتبع نفس الخطوات الموضحة حتى يتم الوصول إلى درجة المعايرة بنسبة 100٪.

لإنشاء كل نقطة معايرة في منحنى المعايرة ، قم بزيادة الخليط القياسي الداخلي للدهون ب 10 ميكرولتر من الخليط القياسي الداخلي المخفف. قم بإعداد سبع عينات مسننة من هذا القبيل لسبع نقاط معايرة في النطاق المطلوب. باستخدام برنامج تحليل البيانات ، قم بالتعليق يدويا على سلاسل الأحماض الدهنية بناء على أنماط MS / MS السلبية.

لتحديد وسم النظائر المستقرة، أو كفاءة SIL، احسب نسبة مساحة النظائر المحتوية على SIL إلى مساحة النظائر غير المحتوية على SIL. احسب النمط النظري عن طريق تحديد احتمال العثور على ذرة مسماة في أي موقع. احسب إثراء SIL عن طريق ملاءمة ملفات تعريف النظائر التجريبية مع النمط النظري المحاكي في برنامج تحليل البيانات.

لبدء التشغيل ، قم بتنشيط فرن العمود بالنقر فوق زر مقياس الحرارة ، وقم بتنشيط المضخات بالنقر فوق زر الصمام. قم بتعيين أسلوب MS إلى الطريقة المناسبة المحفوظة مسبقا. تحقق من أن حجم الحقن هو خمسة ميكرولتر ، وقم بتبطين قارورة هدف واحد 20 إلى واحد ، واحفظ قائمة العينات.

ابدأ التسلسل ، وقم بتأكيد الحقن الناجح من خلال الرسالة التي تفيد بالحقن ، المعروضة على النظام. انسخ السطر الأول والصقه أدناه لإنشاء سطر جديد اثنين. املأ الخط الثاني بالعينات حسب التجربة.

تأكد من استخدام الموضع الصحيح في أخذ العينات التلقائي. إذا كانت المراحل المتنقلة جديدة ، فقم أولا بإجراء اختبار شكل الذروة باستخدام معايير خليط الدهون من الشركة المصنعة ، لمقارنتها بالنتائج السابقة. يتم عرض خليط الدهون والمعايير على الشاشة.

تأكد من أن الأسطر الجديدة لها طريقة الفصل الصحيحة ، وليس طريقة التهيئة المسبقة المستخدمة في السطر الأول. تأكد من صحة طريقة MS التي تم إدخالها. تحقق من تحميل طريقة المعالجة الصحيحة، وتمكين العملية التلقائية للتشغيل.

احفظ قائمة العينات لضمان تحليل العينات بعد انتهاء التشغيل الحالي.