بعد التضحية بالماوس ، ضعه على سطح رغوي وقم بتأمين الأطراف الأمامية بشريط أو دبابيس. استخدم مقص التشغيل لقطع كلا الطرفين الخلفيين على الركبتين. انقل كل طرف خلفي إلى غرفة تشريح منفصلة ، وأضف محلول Tyrode البارد لتغطية الأنسجة.
قم بتثبيت الطرف الخلفي الأول في غرفة التشريح ، مع التأكد من أن الوجه الخلفي للساقين مرئي. تحت التكبير ، قم بإزالة الجلد ، ثم فضح واستئصال عضلة المثني الرقمي أو FDB. قم بتخزين عضلة FDB في قنينة زجاجية موسومة تحتوي على ملليلتر واحد من محلول Tyrode.
باستخدام مقص ناعم ، افصل عضلة الساق ، ثم استأصل العضلة الوحيدة. إزالة الجلد من الوجه الأمامي للساق. بعد ذلك ، حدد الأوتار البعيدة للظنبوب الأمامي والعضلات الباسطة الرقمية الطويلة أو EDL في منطقة الكاحل.
إزالة وتجاهل الظنبوب. بعد ذلك ، قم بقطع الأوتار البعيدة ل EDL واستمر في التشريح لإزالة عضلة EDL تماما. بعد تحديد الهلوسة الطويلة الباسطة أو عضلة EHL ، ابدأ التشريح بعد الوتر إلى الرقم الأول.
بعد ذلك ، حدد واتبع الوتر الخارجي الأكثر من peronei لقطعه وإزالة عضلة peroneus longus أو PL. تحديد وتتبع الوتر إلى الرقم الرابع. ثم قم بقص وإزالة عضلة peroneus digiti quarti أو PDQA.
بعد تشريح الطرف الخلفي الثاني ، اجمع العضلات من نفس النوع في قارورة زجاجية موسومة تحتوي على محلول Tyrode. استبدل محلول Tyrode في غرفة التشريح لإزالة الحطام وفراء الفأر. صب عضلات PL في غرفة التشريح وتحقق من سلامتها وتقلصها.
إجراء جروح طولية أو قطرية على العضلة النعلية بعد الوتر المركزي ، مع قطع حوالي 80٪ من طوله. بالنسبة لعضلة EDL ، اتبع وترا واحدا أو اثنين واقطع نفس طول النعل تقريبا. انقل كل زوج من العضلات إلى قنينة زجاجية جديدة تحتوي على ثلاثة ملليغرام من كولاجيناز النوع 2 في محلول تفكك ، واحتضانها في حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة 65 إلى 90 دقيقة مع رج لطيف.
بعد 65 دقيقة من الحضانة ، تحقق من القارورة تحت مجسمة كل خمس دقائق. بمجرد أن تظهر العضلات متموجة وفضفاضة ، وتبدأ الألياف في الانفصال ، اشطف العضلات باستخدام Tyrode في درجة حرارة الغرفة لإلغاء تنشيط وإزالة الكولاجيناز. باستخدام مجموعة من ماصات باستور المصقولة بالنار ، قم بتحريك المحلول حول العضلات باستخدام ماصة طرف خمسة ملليمترات.
ثم اسحب العضلات برفق داخل وخارج الحافة ثلاث إلى أربع مرات. عندما تبدأ العضلات في إطلاق الألياف وتصبح أرق ، باستخدام طرف أربعة ملليمترات ، كرر الإجراء لفصل المزيد من الألياف.
