عزل الدماغ عن يرقات ذبابة الفاكهة وحصاد خلايا شنايدر S2

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

69 Views

•

01:43 min

•

January 12th, 2024

DOI :

10.3791/201251-v

January 12th, 2024

•

Monika Singh¹, Jung Hwan Kim¹

¹Department of Biology, University of Nevada, Reno

Transcript

للبدء ، ضع يرقات ذبابة الفاكهة في طبق بتري فارغ 35 ملم واستخدم ملقط لغسلها مرتين بماء الصنبور لإزالة أي طعام متبقي. ضع 10 يرقات على طبق تشريح يحتوي على برنامج تلفزيوني بارد. ضع الجانب الظهري لليرقة لأعلى وقم بتثبيت كل طرف في الطبق.

قم بعمل شق صغير على جدار الجسم للطرف الخلفي. باستخدام مقص التشريح المجهري ، قم بقطع جدار الجسم على طول خط الوسط الظهري باتجاه الطرف الأمامي. اغسل الجزء الداخلي من اليرقة ثلاث مرات باستخدام PBS باستخدام ماصة باستور لكشف الدماغ.

حدد موقع الدماغ وارفعه باستخدام الملقط ، واعزل الدماغ بمقص التشريح المجهري. نقل الأدمغة تشريح إلى أنبوب الطرد المركزي الصغيرة المليئة ب PBS الجليد الباردة وجمع كل العقول على الجليد. قم بإجراء استخراج الحمض النووي الريبي باستخدام مجموعة microprep من الحمض النووي الريبي.

لعزل خلايا شنايدر S2 ، أضف خمسة ملليلتر من برنامج تلفزيوني مثلج إلى مزرعة خلايا شنايدر. نقل الخلايا إلى أنبوب 15 ملليلتر ، ثم أجهزة الطرد المركزي عند 1000 غرام لمدة خمس دقائق عند أربع درجات مئوية لحبيبات الخلايا. باستخدام ماصة ، شطف الخلايا مرتين مع برنامج تلفزيوني بارد الجليد وأجهزة الطرد المركزي مرة أخرى.

قم بإجراء استخراج الحمض النووي الريبي باستخدام مجموعة أدوات تحضير الحمض النووي الريبي.

Explore More Videos

From the series

تحديد طول بولي (أ) للجينات من الجهاز العصبي ذبابة الفاكهة