للبدء ، خذ الضفدع الذي تم غمره في محلول القتل الرحيم لمدة ساعة واحدة ، واضغط على قدمه للتحقق من عدم وجود استجابة للألم. قم بوزن Xenopus ، وقم بإجراء قياسات إضافية مثل الطول من الخطم إلى التهوية. ضع الضفدع على ظهره ، وقم بتأمين أطرافه بالقرب من الجسم.
باستخدام مقص التشريح ، قم بعمل شق عبر الجلد على طول خط الوسط ، ثم قم بتمديده بشكل جانبي لإنشاء سديلتين جلديتين. ثم حدد موقع الخط ألبا وأمسكه بالملقط. اسحبه برفق من تجويف coelomic ، وباستخدام المقص ، قطع العضلات الأساسية.
إنشاء اثنين من اللوحات من جدار التجويف. حدد القلب الذي لا يزال ينبض ، واستخدم مقص التشريح لتقليم عظام الغرابي للوصول بشكل أفضل. الآن استخدم ملقط الأنسجة لتحديد التامور الرقيق وتمديده.
باستخدام طرف مقص استئصال القزحية ، قم بثقب التامور بعناية. ثم قم بإزالة التأمور بعيدا عن حجرات القلب الثلاث. في هذا البروتوكول ، يتم عرض أخذ عينات من بطين القلب والفص الأيسر من الكبد والبنكرياس والجسم الدهني والكلى المقترنة.
لأخذ عينة من بطين القلب ، أمسك البطين عند القمة بالملقط ، وحدد اتصاله بالأذن والجذع الشرياني ، واقطعه أسفل هذه النقاط. بعد ذلك ، لاحظ الفصوص الثلاثة للكبد. ارفع الفص الأيسر برفق لكشف القنوات الكبدية والكيسية ، وأخذ عينة من ثلث هذا الفص أسفل القنوات.
إذا كان الضفدع أنثى ، فحدد موقع المبيض المغطى بالظهارة الجرثومية. أعد وضع الفصوص برفق على كل جانب للكشف عن منطقة التعلق. استخدم المقص لاستئصال المبايض بالقرب من الكلى قدر الإمكان دون إتلافها.
ثم فحص الفص الإنسي للكبد وصلاته بالمعدة والاثني عشر من خلال المساريق والقناة الكبدية. باستخدام مقص استئصال القزحية ، قم بقطع المساريق والرباط الكبدي الاثني عشر والقناة الكبدية بالقرب من الاثني عشر. افصل البنكرياس والقناة عن الفص الإنسي للكبد دون ترك أنسجة الكبد الداكنة متصلة.
بعد ذلك ، امسك المعدة بمساعدة ملقط مسنن ، ثم استخدم ملقط الأنسجة لتثبيت نهاية البنكرياس العليا. تحت تكبير 5X ، افصل البنكرياس بعناية عن المعدة. الآن حدد موقع المثانة البولية واستئصالها ، وقطع أقرب ما يمكن إلى العباءة ، ثم تخلص من الأنسجة.
بعد ذلك ، حدد الأمعاء الغليظة وقم بتمديدها ، وقطعها بالقرب من العباءة. بعد ذلك ، افصل الأجسام الدهنية عن كل جانب ، وأمسك قاعدة الجسم الدهني الأيسر ، واقطعه عن الصفاق. في حالات الضفادع الإناث أو الذكور مع قنوات البيض الأثرية المرئية ، أمسك قناة البيض وافصلها عن الكلى والعباءة.
قطع عند تقاطع العباءة والاستمرار في فصلها عن الكلى ، وإزالة أي مرفقات الصفاق واضحة. الآن استخدام ملقط لعقد الكلى ، وقطع الصفاق في نهايتها السفلى. رفع الكلى من تجويف coelomic باستخدام مقص.
افصل الصفاق بالقرب من الكليتين قدر الإمكان دون التسبب في ضرر. تحت تكبير 5X ، قم بإزالة أي بريتوني زائد والأنسجة المتبقية مثل الخصية أو الأجسام الدهنية أو الطحال. بعد إطلاق ، ضعه على بطنه ، وقم بتأمين أطرافه.
اختر طرفا خلفيا واحدا لأخذ العينات ، وقم بتأمين قدمه. استئصال رفرف جلدي على شكل لوز من فوق منطقة الساق أو الظنبوبوبية. بعد ذلك ، اشطف جميع العينات في برنامج تلفزيوني ، وتحقق من وجود أنسجة زائدة ، وقم بقصها قبل الاستخدام إذا لزم الأمر.
تم استئصال البطين القلبي والفص الأيسر من الكبد والبنكرياس والأجسام الدهنية اليسرى والكلى المقترنة وسديلة من الجلد بشكل نظيف في غضون ساعة من القتل الرحيم.
