التوسع ثنائي الأبعاد ، والتحفيز ثنائي الأبعاد ، والنضج العضوي ثلاثي الأبعاد للخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية للبالغين لأبحاث وهندسة الأوتار

للبدء ، أجهزة الطرد المركزي trypsinized الخلايا الليفية الجلدية البشرية العادية. قم بإزالة المادة الطافية من أنبوب الطرد المركزي. أضف وسط الجلوكوز المنخفض DMEM المكمل مسبقا إلى الحبيبات ، واخلطه جيدا لإعادة تعليقه.

طبق الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية في طبق زراعة الخلايا الملتصقة 10 سم. هز الطبق برفق بطريقة عرضية. بعد 14 يوما من التحفيز ثنائي الأبعاد ، عندما تصبح الخلايا متقاربة ، قم بشفط الوسط ، واستخدم مكشطة الخلايا لفصل ورقة الخلية المشكلة بلطف وسرعة عن الطبق.

في نفس الوقت ، لفة ورقة الخلية في عضوي يشبه قضيب 3D. انقل عضويات الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية إلى طبق بتري غير ملتصق بعرض 10 سم. قياس استطالة مع المسطرة.

ثم أمسك جانبا واحدا من العضو العضوي بملقط ، وقم بتمديد العضو العضوي برفق حتى يتم استطالته محوريا بنسبة 10٪ تقريباباستخدام ملقط ، اضغط يدويا على المسامير المعدنية من خلال حافتي العضو العضوي في الطبق البلاستيكي لإصلاحه. أخيرا ، بالنسبة للنضج ثلاثي الأبعاد ، أضف 10 ملليلتر من وسط الجلوكوز عالي DMEM المكمل مسبقا قبل الحضانة. أظهر التشكل الإجمالي للعضويات ثلاثية الأبعاد في اليومين صفر و 14 من خطوة النضج ثلاثية الأبعاد مظهرا أبيض لامعا.

بمرور الوقت ، تقلصت المواد العضوية وبدت أكثر كثافة. تم تقييم مورفولوجيا الكائنات العضوية باستخدام تلطيخ H E. في اليوم الأول ، أظهرت الكائنات العضوية طبقات منفصلة ، تتكون بشكل أساسي من خلايا محاطة بكميات منخفضة من المصفوفة.

أظهرت الخلايا داخل الطبقات نوى ذات شكل دائري وأحجام مختلفة. في اليوم 14 ، لوحظت زيادة ملحوظة في إشارة eosin ، والتي أشارت إلى ترسب المصفوفة والطبقات المنصهرة. علاوة على ذلك ، أظهرت المواد العضوية وجود مناطق تحتوي على خلايا محاذاة.

كان لغالبية النوى أحجام متشابهة ، وأحيانا كانت ممدودة.