تحضير الجسيمات النانوية المغناطيسية الوظيفية للتصوير الفلوري الذي تم حله بمرور الوقت

للبدء ، أضف جسيمات الستربتافيدين النانوية الوظيفية إلى الأنابيب للكشف عن TNF alpha و interleukin-1 beta و interleukin-6. تمييع الستربتافيدين بالإضافة إلى الجسيمات النانوية في أحجام متساوية من PBS. بعد ذلك ، أضف محاليل الأجسام المضادة لالتقاط البيوتينيلات إلى الأنابيب واحتضانها لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.

بعد ذلك ، أضف 0.01٪ من محلول D-Biotin 1 مليمولار إلى كل أنبوب واحتضانه لمدة خمس دقائق. ثم أمسك مغناطيس النيوديميوم بالقرب من الأنبوب لجمع الجزيئات. تخلص من المادة الطافية الصافية وأعد تعليق الجسيمات النانوية على الفور في خليط من Pluronic F-127 و PBS واحتضانها لمدة 30 دقيقة.

بعد احتضان الجسيمات لمدة 30 دقيقة في مخزن التخزين المؤقت ، قم بتحريكها لضمان خليط موحد. مباشرة قبل التغليف ، اجمع بين الجسيمات النانوية المترافقة لإنترلوكين -6 و TNF alpha و interleukin-1 beta. الآن ، اغسل الجسيمات بوسائط كاملة باستخدام المغناطيس كما هو موضح سابقا ، وأعد تعليق الخرز في وسائط كاملة.

بعد ذلك ، أضف الأجسام المضادة للكشف عن interleukin-6 و TNF alpha و interleukin-1 beta لتحقيق التركيز النهائي ل 10 نانومولار.