JoVE Journal

Cancer Research

This content is Free Access.

01:51

live

تحضير الوسائط المكيفة للخلايا السحائية البشرية (HMC) وجمع السائل النخاعي لثقافة الخلايا السرطانية المنتشرة

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

47 Views

•

01:51 min

•

March 29th, 2024

DOI :

10.3791/201628-v

March 29th, 2024

•

Vincent Law¹^,², Inna Smalley³, Brittany R. Evernden², Margaret Baldwin⁴, Keiran S. M. Smalley¹, Peter A. Forsyth¹^,²

¹Department of Tumor Biology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ²Department of Neuro-Oncology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ³Department of Cancer Physiology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ⁴Department of Comparative Medicine, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute

Transcript

للبدء ، قم بطلاء قارورة T175 ب Poly-L-Lysine. ضع القارورة في حاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة. الآن استخدم ماصة مصلية معقمة لاستنشاق محلول اللايسين.

ماصة 30 ملليلتر وسط استزراع سحائي كامل يحتوي على خلايا سحائية بشرية في القارورة. احتضان الخلايا عند 37 درجة مئوية تحت مكملات ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪. عندما تصل الخلايا إلى ما يقرب من 75٪ إلى 80٪ من الالتقاء ، قم بجمع وحفظ الوسائط المستزرعة HMC في أنبوب مخروطي 50 ملليلتر.

ثم أضف وسط استزراع سحائي كامل إلى الأنبوب بنسبة واحد إلى واحد. أخيرا ، ماصة عوامل النمو في الأنبوب لإنشاء وسائط HMC المكيفة. لمعالجة السائل الشوكي الدماغي ، ضعه أولا في أنبوب مخروطي سعة 15 ملليلتر على الجليد لتبريده.

أجهزة الطرد المركزي السائل في جهاز طرد مركزي مبرد مسبقا عند 257 جم لمدة خمس دقائق عند أربع درجات مئوية. ماصة من طاف دون إزعاج بيليه الخلية وجعل حصص منه في أنابيب مختلفة. أضف الآن ملليلتر واحد من PBS إلى بيليه الخلية لتعليقه.

أجهزة الطرد المركزي الخلايا في 1،500 غرام لمدة خمس دقائق عند أربع درجات مئوية. نضح طاف PBS مع ترك حوالي 50 ميكرولتر منه في قاع الأنبوب. قم بإجراء عدد الخلايا مع تعليق الخلية قبل زراعة الخلايا.

تم تنظيم العديد من عوامل النمو في وسائل الإعلام المزروعة بالخلايا السحائية البشرية.

Explore More Videos

Human Meningeal Cells

HMC Conditioned Media

Cerebrospinal Fluid

T175 Flask Preparation

Cell Suspension

PBS Supernatant

From the series

نموذج الفئران لدراسة مرض Leptomeningeal باستخدام الخلايا السرطانية المنتشرة

article

تسليط الضوء على المؤلف: تقييم إمكانات الخلايا السرطانية المنتشرة في أبحاث مرض Leptomeningeal

In this series

455 Views

article

تحضير الوسائط المكيفة للخلايا السحائية البشرية (HMC) وجمع السائل النخاعي لثقافة الخلايا السرطانية المنتشرة

In this series

47 Views

article

في المختبر زراعة وتوسيع السائل الدماغي الشوكي (CSF) - الخلايا السرطانية المنتشرة (CTCs) لدراسة مرض Leptomeningeal

In this series

44 Views

article

جمع السائل الدماغي الشوكي من الفئران المصابة بمرض Leptomeningeal لتوسيع الاستنساخ اللاحق

In this series

114 Views

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved

We use cookies to enhance your experience on our website.

By continuing to use our website or clicking “Continue”, you are agreeing to accept our cookies.

Learn More