بعد تشغيل LCMS لمستخلصات جذور النبات ، افحص إجمالي كروماتوجرام الأيونات لعمليات المسح Q1 و Q3 ، بما في ذلك المسح الأيوني للمنتج المعتمد على البيانات. لاحظ الكتلة الأم للأيونات الوفيرة ذات السمات الشبيهة بقلويدات التروبان ، بما في ذلك كتلة أقل من 500 دالتون للأيون الموجب الشحنة ، عادة ما يكون عددا زوجيا. أوقات الاحتفاظ بين دقيقتين إلى 22 دقيقة ، والشظايا مطابقة قيم الشحن الرئيسية المتوافقة مع قلويدات التروبان.
افحص مخطط كروماتوجرام أو قناة المسح الأيوني السلائف خصيصا للشحنة الرئيسية 124 ، وحدد القمم أو الأيونات التي تنتج عندها أوقات الاحتفاظ هذا الجزء المحدد. انقر فوق المسح الضوئي عن طريق المسح الضوئي ، من خلال مخطط الكروماتوجرام ومراجعة أطياف MS-MS الكاملة من المسح الأيوني للمنتج المعتمد على البيانات ، خاصة بالنسبة للأنواع الأقل وفرة. بعد ذلك ، قم بتحليل كروماتوجرام المسح الأيوني السلائف معا للشحنة الرئيسية 122 و 140 ، والتي تشير إلى قلويدات التروبان ثنائية الاستبدال ، والشحنة الرئيسية 138 و 156 ، مما يدل على قلويدات التروبان ثلاثية الاستبدال.
افحص كروماتوجرام المسح الضوئي المحايد للخسارة أو القنوات للشحن الرئيسي 160 و 166. حدد القمم أو الأيونات التي تنتج خسائر محايدة ولاحظ أوقات الاحتفاظ بها. انقر فوق المسح الضوئي عن طريق المسح الضوئي من خلال الكروماتوجرام وقارن مع تجزئة المسح الأيوني للمنتج المعتمد على البيانات ، خاصة بالنسبة للأنواع الأقل وفرة.
استخدم مزيجا من مسح أيون السلائف وبيانات مسح الخسارة المحايدة ، مدعومة بنتائج المسح الأيوني للمنتج المعتمد على البيانات ، لعمل تعليقات توضيحية مفترضة للقلويدات المرصودة. ابدأ بأصغر كتلة تروبان ، ثم أضف الخسارة المحايدة ، واحسب أي كتلة متبقية. قارن التعليقات التوضيحية القلوية بتلك المبلغ عنها في الأدبيات لتحديد نمط استبدال قلويد التروبان.
بالإضافة إلى ذلك ، استخدم المعايير المتاحة تجاريا لقلويدات التروبان الشائعة للتأكيد. كشف كروماتوجرام المسح الكامل Q1 لمستخلص جذر الداتورة ميتيل عن قلويدات تروبان متنوعة بوفرة متفاوتة. تشير ميزات الشحن الرئيسي 124 و 122 و 140 و 138 و 156 إلى وجود قلويدات التروبان.
كانت العديد من قلويدات التروبان هذه عبارة عن أسيتيل أو تيغلولات أو مشتقة من حمض الفينولاكتيك أو حمض تروبيك ، كما يتضح من الإشارات الموجودة في كروماتوجرام مسح الخسارة المحايدة. مكن استخدام البيانات الطيفية من شرح قلويدات محددة ، ولا سيما تحديد مركب بكتلة ظاهرية من الشحنة الرئيسية 224. سمحت الطريقة بخصم بنية مركبة من خلال نمط التجزئة والخسارة المحايدة ، مما يؤكد وجود مجموعات tigloyl كبدائل.
أسفر فحص مستخلص ماء الميثانول من بذور الداتورة سترامونيوم عن كروماتوجرام ذروة قاعدة مسح Q1 كامل ، وتحديد قلويد تروبان أحادي الاستبدال وفير للغاية ، من المحتمل أن يكون هيوسيامين. يسمح طيف MS-MS عالي الدقة أيضا بتحديد قلويدات جديدة من بذور الداتورة سترامونيوم.
