للبدء ، قم بتثبيت حامل الكابول الخاص ب AFM على حامل تغيير الكابول. استخدم ملقط صانع الساعات لتركيب الكابول المحدد على الحامل. شد المسمار الموجود على الحامل لتأمين الكابولي.
ضع حامل الكابول وأغلقه على رأس AFM الموجود على الحامل. استخدم وظيفة المحرك المتدرج في برنامج AFM لسحب رأس AFM إلى أعلى نقطة. وقم بتعيين هذا الموضع على أنه 0.0.
ارفع رأس AFM بحذر من حامله ، ثم قم بتثبيته على مرحلة العينة عن طريق وضع الأرجل في الفتحات الخاصة بها. لمعايرة الكابولي ، استخدم وظيفة المحرك المتدرج لتقريبه من سطح العينة. ثم انقر فوق نهج في نافذة وضع الاتصال للتحليل الطيفي.
قم بإسقاط الكابولي بزيادات صغيرة قدرها 15 ميكرومتر. اضغط على اكتساب لالتقاط منحنى القوة. ثم حدد منحنى القوة ، وافتحه في نافذة إدارة المعايرة وحدد الوضع المستند إلى جهة الاتصال في قسم الطريقة.
استخدم الآن وظيفة تحديد نطاق الملاءمة وحدد منحنى التراجع الكابولي لملاءمة المنحنى الخطي. بعد ذلك ، حدد خانة الاختيار الحساسية لتحويل وحدة القوة من فولت إلى نيوتن. ارفع الكابولي من 100 إلى 200 ميكرومتر في السائل وحدد وظيفة الضوضاء الحرارية مرة أخرى ، انقر فوق تحديد نطاق ملاءمة وقم بتركيب منحنى جرس الضوضاء الحرارية مع منحنى لورانس.
بعد تركيب المنحنى ، اختر مربع Spring Constant K. تأكد من أن ثابت الزنبرك قريب من قيمة الشركة المصنعة وقم بتدوينها للرجوع إليها في المستقبل. بعد ذلك ، ضع العينة المثبتة على الشريحة من أوعية الشبكية أو أوعية الشبكية أو المصفوفة تحت البطانية على مرحلة AFM وتصور أوعية الشبكية.
حدد وضع جهة الاتصال للتحليل الطيفي في قسم التجربة في البرنامج. ثم اضبط قوة نقطة الضبط على 0.5 نانو نيوتن وانقر فوق الاقتراب. استخدم براغي المسرح في مرحلة AFM لوضع مسبار الكابولي بعناية في الموقع المطلوب على العينة.
انقر فوق نهج لوضع الكابول بالقرب من العينة، ثم انقر فوق اكتساب لالتقاط منحنيات القوة. أخيرا ، احفظ جميع منحنيات القوة للتحليل. كانت منحنيات الاقتراب والتراجع التي تم الحصول عليها من الشعيرات الدموية الشبكية المعزولة من الفأر المصاب بالسكري أكثر حدة من تلك التي تم الحصول عليها من فأر غير مصاب بالسكري.
