للبدء ، قم بتصوير أقسام أنسجة بطانة الرحم بعد تلطيخها بالأجسام المضادة المناسبة. لاستيراد صور متعددة الأطياف، انتقل إلى ملف ثم افتح الصورة في واجهة البرنامج. انقر فوق تحديد الفلوروفورات واختر المكتبة الطيفية المناسبة لفك خلط الفلوروفورات وانقر فوق موافق للتأكيد.
اعزل طيف التألق الذاتي باستخدام أداة قطارة التركيز البؤري التلقائي لأخذ عينات من منطقة الأنسجة التمثيلية من صورة التركيز البؤري التلقائي وتسمية علامات سطح الخلية الأربعة وتعيين ألوان محددة للتعرف عليها. انقر فوق إعداد الصورة أو إعداد الكل لإنهاء التحضير. لتجزئة الأنسجة ، حدد يدويا ثلاث إلى خمس مناطق لكل نوع من أنواع الأنسجة ، بما في ذلك المناطق الظهارية واللحمية والفارغة.
اضبط المناطق والمعلمات حسب الحاجة لتحسين مجموعة بيانات التدريب ، مما يعزز دقة البرنامج في تحديد هياكل الأنسجة. ضمن الخلايا المقطعة، حدد النوى والغشاء. اختر DAPI لتحديد نوى الخلية وضبط إعداد الشدة لاكتشاف جميع نوى الخلية بدون ضوضاء في الخلفية.
حدد إشارات CD16 و CD49A و CD56 للعثور على الغشاء والمساعدة في الانقسام النووي. استخدم ميزة تقسيم المكونات النووية لتمييز النوى عن كثب. في مخطط التنميط الظاهري ، اعتمد علامات CD56 و CD49A و CXCR4 و CD16 للتنميط الظاهري للخلية.
استخدم الزر إضافة لتصنيف الخلايا على أنها تعبر بشكل إيجابي أو سلبي عن كل علامة. قم بتسمية خمس خلايا على الأقل يدويا لكل نمط ظاهري أثناء عملية التدريب. بعد تكوين التنميط الظاهري للخلية ، سيشير البرنامج إلى التعبير عن علامات السطح لكل خلية.
تصدير البيانات إلى جدول بيانات لمزيد من التحليل. حددت استراتيجية التصنيف الجديدة أربعة أنواع فرعية من الخلايا القاتلة الطبيعية بناء على التعبير عن CD49A و CXCR4.