وأيد هذا العمل من خلال منحة من الوزارة الاتحادية الألمانية للتعليم والبحوث (BMBF) داخل التركيز بيرنشتاين : أسس التعلم الخلايا العصبية (BFNL) لDE نشكر راندولف منزل للتعليق على قيمة إصدار سابق من المخطوطة.

1. اصطياد النحل من الخلية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل يوم واحد تبدأ التجربة ، ما بين 2 و 4 مساء ، واشتعلت النحل يترك الخلية. للقيام بذلك ، والأشعة فوق البنفسجية الهرم شبكي منفذة للضوء (ارتفاع = 30 سم ، وقمة 3،5 × 3 ، 5 سم ، وقاعدة 18 × 18 سم) هو عقد ، وهو في ذروة محكمة السد والقاعدة ، في 20 -- أغلقت مسافة 30 سم امام مدخل الخلية مع فتح قاعدة وقمة والنحل بحيث يترك خلية إدخال قاعدة الهرم. ثم يتم إغلاق القاعدة ويتم إحضارها إلى القبض على النحل في المختبر لمزيد من المعالجة. </li></ol> 2. نقل النحل من الهرم في قوارير الزجاج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في المختبر ، ويتم وضع الهرم على قاعدته. هي مظلمة جدران الهرم (على سبيل المثال مع منشفة) ، ولكن يتم ترك كشفت قمة. بسبب انجذاب ضوئي الإيجابية ، وسوف يغادر النحل من خلال قمة الهرم عند فتحه. واحدا تلو الآخر ، يتم نقل النحل من الهرم في قوارير الزجاج من خلال عقد قارورة خلال قمة مفتوحة. ويستخدم واحد لكل قنينة النحل. لذلك ، يتم إغلاق قمة عند واحد يدخل النحل القارورة. </li></ol> 3. النحل في تسخير أنابيب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويجمد النحل عن طريق التبريد لهم في قارورة زجاجية على الجليد ل2،5-3،5 دقيقة. فمن المستحسن لمشاهدة النحل وإزالته من الجليد حالما تتوقف عن التحرك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هو تسخير نحلة واحدة ثبتوا في أنبوب بلاستيكي صغير مع شريط لاصق ، بحيث أنها قادرة على التحرك بحرية في خرطوم ولكن ليس في الرأس ، الصدر أو الساقين. من المهم أن لا يتم ضغطها الرقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع كل نحلة ثابتة في أنبوب بلاستيكي في حفرة البئر مرقمة على رف من أجل تحسين المناولة وتحديد الهوية. بعد أن تم إزالته من أجل استردادها أو تكييف الذاكرة دائما يتم إرجاع أنبوب إلى بئر نفسه بالضبط. </li></ol> 4. تغذية النحل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الليلة الأولى (4-6 مساء) ، بعد أن اشتعلت ، ويتم تغذية النحل على محلول السكروز مع شبع (0،88 م ، والسكر الأبيض المكرر المنزلية الذائبة في مياه الصنبور). لتغذية النحل ، يتم استخلاصها من خلال لمس PER هوائيات مع حل السكروز ويسمح هذا الحيوان للاستهلاك one الحبرية (4 ميكرولتر) من محلول السكروز. ويتم تغذية النحل واحدا تلو الآخر بشكل متكرر حتى أنها لم تعد تظهر PER سريعة وموثوق بها عندما يتم لمسها هوائيات مع حل السكروز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في كل مساء لاحقة (4-6 مساء) من التجربة ويتم تغذية النحل واحدا تلو الآخر أربع مرات مع 1 قطرة من محلول السكروز (4 ميكرولتر ، 0،88 م ، والسكر الأبيض المكرر حلها في مياه الصنبور). من المهم أن لا يشوش على هوائيات حل السكروز النحلة أو خرطوم في أثناء الرضاعة ، وأنه ليست ملوثة أنابيب بمحلول السكروز. لا ينبغي أن يكون الطعام النحل في أو بالقرب من موقع لتكييف يستبعد إمكانية ربط سياق التدريب مع التحفيز السكروز. </li></ol> 5. حفظ النحل مسخر ليلة وضحاها <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم الاحتفاظ النحل بين عشية وضحاها في وعاء بلاستيكي في درجة حرارة الغرفة. يتم تعبئة مياه الصنبور في وعاء (حوالي 0،5-1 سم). رفوف توضع مع النحل تسخيرها في وعاء فوق سطح الماء باستخدام لوحات ELISA كمنبر. أخيرا ، يتم تغطية وعاء مع الكرتون. </li></ol> 6. شمي هواء في صباح الأول (10:00) من التجربة ويتم تكييف الشمية بها. الحافز مكيفة (CS) هو رائحة ، ودون شروط التحفيز (الولايات المتحدة) هو الحل السكروز. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وpipetted 4 ميكرولتر من رائحة (زيت القرنفل على سبيل المثال) على الورق مرشح الجولة (1،3 سم القطر) التي يتم إدراجها بعد ذلك في 20 مل حقنة. هو pipetted رائحة تحت غطاء محرك السيارة وتستخدم تصفية نصائح لمنع التلوث من ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضعت على الرف مع النحل بالقرب من تسخيرها 30 دقيقة تكييف الموقع قبل إجراء تكييف يبدأ ، ولكن على مسافة من مكان في الجبهة من ماسورة العادم حيث يتم تكييف النحل واحدة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكييف يتكون من ثلاثة أزواج من رائحة (الحافز مكيفة ، CS) والحل السكروز (الحافز دون شروط ، الولايات المتحدة ، 1،25 م) مع فاصل بين المحاكمة (ITI) من 10 دقيقة. إشارة صوتية تسليمها الى المجرب عبر لاعب السمعية يضمن التوقيت الدقيق لبدء التحفيز ، يقابلها التحفيز ، ووضع مدة التحفيز. محاكمة اقتناء يبدأ طرح 10 ثانية من هذا الحيوان في الجبهة من العادم. قبل وقت قصير من نهاية 10 ثانية يتم وضع الحقنة التي تحتوي على رائحة 3 سم امام النحل تستهدف هوائيات النحلة. بعد ذلك ، يتم تقديم الرائحة لمدة 5 ثانية ، عن طريق دفع الهواء 20 مليلتر من خلال حقنة. بعد 3 ثوانى الأولى هي لمست سياط البعيدة كل من هوائيات مع السكروز حل رطب مسموح مسواك والحيوانات للعق مسواك moistend لمدة 4 ثوانى. 13 ثانية بعد النحل التحفيز CS ، وينتهي تؤخذ خارج السياق والتدريب ووضع مرة أخرى في الرف. تماما تجربة واحدة للتدريب يدوم 28 ثانية. من المهم أن لا يتم تغطية النحلة هوائيات للخرطوم ولا مع السكروز بعد تكييف. ولذلك لابد من التأكد من أن ليست سوى مسواك مبلل بمحلول سكروز وأنه لا يوجد شكل قطرات من محلول السكروز على المسواك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تكييف رفوف توضع في وعاء مرة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سلوك الحيوانات خلال التجربة ، أي وقوع الواحد خلال التنسيب وCS الولايات المتحدة وعرضها ، وأشار إلى رصد وبنسبة المجرب. </li></ol> 7. ذاكرة الاستبقاء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يمكن إجراء الاختبارات في أي الاحتفاظ الفاصل الزمني (دقيقة إلى أيام). وضعت على الرف مع النحل بالقرب من تكييف 30 دقيقة الموقع قبل بدء اختبار الذاكرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختبار الذاكرة يتكون من 5 ثوانى CS العرض التقديمي دون الولايات المتحدة. الاختبار يبدأ طرح 10 ثانية من هذا الحيوان في الجبهة من العادم. بعد ذلك ، يتم تقديم الرائحة لمدة 5 ثوانى على النحو المبين أعلاه. سلوك الحيوان ، أي وقوع الواحد خلال التنسيب ويلاحظ العرض CS أسفل أثناء التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نهاية التجربة مرة أخرى استجابة داخلي خرطوم التي تسببها هوائيات لمس بمحلول سكروز للتأكد من أن الحيوان لا يزال قادرا على مد خرطوم به. </li></ol> 8. حقن النظامية النقطة النظامية وقت الحقن يعتمد على التصميم التجريبي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إجراء ثقب صغير في جليدة للجزء الخلفي من الترس بجانب الشق scutal فوق 17 رحلة العضلات باستخدام إبرة تحت الجلد القابل للتصرف (21 م). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام أنبوب زجاجي الشعري ، يتم حقن محلول 1 ميكرولتر من خلال ثقب في جليدة في عضلة الرحلة. المجربون مدربة قادرة على ضخ كل نحلة 30 ثانية ، مما يسمح للتوقيت الدقيق للحقن وتكييف. </li></ol> 9. تغذية النحل خلال التجربة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في مساء يوم (4-6 مساء) بعد تكييف ، ويتم تغذية النحل واحدا تلو الآخر أربع مرات مع 1 قطرة من محلول السكروز (4 ميكرولتر ، 0،88 م ، والسكر الأبيض المكرر الذائبة في مياه الصنبور). من المهم أن لا يشوش على هوائيات حل السكروز النحلة أو خرطوم في أثناء الرضاعة ، وأنه ليست ملوثة أنابيب بمحلول السكروز. لا ينبغي أن يكون الطعام النحل في أو بالقرب من موقع لتكييف يستبعد إمكانية ربط سياق التدريب مع التحفيز السكروز. </li></ol> 10. جمع البيانات وتحليل البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم رصد حدوث استجابة ملحق خرطوم خلال التجربة. وسجل نحلة إيجابية إذا كان خرطوم يمتد في الفترة ما بين بداية CS وعرض في الولايات المتحدة (أثناء التدريب) أو أثناء العرض CS (خلال مرحلة الاختبار) ، عبور خط الظاهري بين mandibles مفتوحا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن تكون مدرجة في تحليل الحيوانات الوفاء معيارين : يجب أن تنجو من التجربة بأكملها ويجب أن تظهر على تمديد خرطوم دون شروط الاستجابة (PER) السكروز إلى حل في نهاية التجربة. يتم رسم النسبة المئوية من النحل تبين الواحد خلال اقتناء واختبارات الاحتفاظ لكل عرض CS. </li></ol> 11. ممثل النتائج : يتم تقديم تجربتين هنا. في التجربة الأولى أن ننظر في أثر حقن النظامية من الفوسفات مخزنة في برنامج تلفزيوني (المالحة ، وفي ملي : 137 كلوريد الصوديوم ، 2،7 بوكل ، 10،1 نا 2 هبو 4 ، 1،8 KH 2 PO 4 ، ودرجة الحموضة 7 ، 2) على التعلم وعلى المدى الطويل تكوين الذاكرة. تعامل مجموعة غير المعالجة ، وهي المجموعة التي تم حقنه مع 1 ميكرولتر 30 دقيقة برنامج تلفزيوني قبل التدريب ، ومجموعة الشام حقن : تم تدريب ثلاث مجموعات من النحل مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة مع فاصل بين محاكمة 10 دقيقة بنفس طريقة حقن مجموعة PBS ولكن من دون حقن PBS. تم اختبار الذاكرة بعد 24 ساعة تدريبية مع تقديم خدمات العملاء واحد في جميع الفئات الثلاث. النسبة المئوية للحيوانات التي تبين استجابة مشروطة خلال تكييف يزيد بشكل كبير عبر محاكمات تدريبية لمدة ثلاثة (Fig.1 ، ANOVA لقياس المتكرر للمرة عامل F 2378 = 340456 ، ف &lt;0،05). ويمكن ملاحظة أي اختلاف في PER بين المجموعات الثلاث خلال تكييف (ANOVA لقياس المتكررة لعامل الجماعات F2 ، 189 = 1299 ، P&gt; 0،05). هذا ينطبق على 24 اختبارا الاحتفاظ ح (F2 ، 187 = 0752 ، P&gt; 0،05) عند المقارنة بين الحيوانات غير المعالجة مع PBS حقن حقن الحيوانات وزائفة. في التجربة الثانية نبدي تثبيط للاحتفاظ الذاكرة الثلاثة وبعد أربعة أيام من التدريب عندما تم حقن مجموعيا المانع التوليف anisomycin البروتين (10 ملم) و 30 دقيقة بعد التزاوج CS - الامريكية الثلاثة. المقارنة بين جماعة anisomycin حقن مع مجموعة PBS حقن يكشف عن فارق كبير بين المجموعات خلال الاحتفاظ ربتوقيت شرق الولايات المتحدة (Fig.2 ، ANOVA لقياس المتكرر للعامل المجموعة F1 ، 94 = 8،86 ، ف &lt;0،05). ويمكن ملاحظة اختلاف كبير في اختبار الذاكرة في يوم 3 و 4 ايام. هذا يشبه نتائج Wüstenberg آخرون 18 ، الذي اشترط أيضا النحل مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة ، ولكن مع بروتوكول آخر. <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1. آفة جليدة أو حقن PBS لا يغير اقتناء والاحتفاظ الذاكرة. تم تدريب الحيوانات مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة (اكتساب). بعد 24 ساعة ، واختبار الذاكرة (الاحتفاظ الذاكرة). ثلاثين دقيقة قبل التدريب ، وأدلى حفرة في جليدة للمجموعتين (الآفة ، PBS) وحقن واحدة من هذه المجموعات مع 1 ميكرولتر PBS (PBS). وقد غادرت المجموعة الثالثة سليمة (أي علاج). قدم هو النسبة المئوية للحيوانات لكل مجموعة الاستجابة للعرض مع رائحة PER. وANOVA لا يكشف عن أية فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعتين في مرحلة اكتساب (F2 ، 189 = 1.299 ، P&gt; 0.05) أو في الاحتفاظ الذاكرة (F2 ، 187 = 0.752 ، P&gt; 0.05) <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. حقن 40 دقيقة anisomycin بعد الاقتران CS - الولايات المتحدة مشاركة يقلل الاحتفاظ الذاكرة ثلاثة ايام وبعد أربعة أيام من التدريب. الحيوانات وتدرب مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة (شراء) وحقنه مع 1 ميكرولتر anisomycin 10 ملم (التفاوت) أو 1 PBS ميكرولتر 1 ح بعد المحاكمة التدريبية الأولى. وكان اختبار الذاكرة (ذاكرة للاحتفاظ) 24 ساعة ، 48 ساعة و 72 ساعة و 96 ساعة في وقت لاحق. قدم هو النسبة المئوية لكل مجموعة من الحيوانات الاستجابة للعرض مع رائحة PER. حقن anisomycin يؤدي إلى خفض كبير في الذاكرة 72 ح ح 96 استبقاء وبعد التدريب (F1 ، 94 = 8.86 ، P &lt;0.05) كما كشفت من قبل ANOVA.

<ol>
	<li>Menzel, R., Giurfa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+architecture+of+a+mini-brain:+the+honeybee.">Cognitive architecture of a mini-brain: the honeybee.</a> Trends Cogn Sci. 5, 62-71 (2001).</li><li>Menzel, R., Leboulle, G., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+brains,+bright+minds.">Small brains, bright minds.</a> Cell. 124, 237-239 (2006).</li><li>Menzel, R., Kesner, R. P., Olton, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neurobiology of comparative cognition. , (1990).</li><li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical-Conditioning+of+Proboscis+Extension+in+Honeybees+(Apis-Mellifera).">Classical-Conditioning of Proboscis Extension in Honeybees (Apis-Mellifera).</a> J. Comp. Psyc. 97, 107-119 (1983).</li><li>Menzel, R., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+in+honeybees:+from+behavior+to+neural+substrates.">Learning and memory in honeybees: from behavior to neural substrates.</a> Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).</li><li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+dynamics+in+the+honeybee.">Memory dynamics in the honeybee.</a> Journal of Comparative Physiology A-Neuroethology Sensory Neural and Behavioral Physiology. 185, 323-340 (1999).</li><li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+the+memory+trace+in+a+mini-brain,+the+honeybee.">Searching for the memory trace in a mini-brain, the honeybee.</a> Learn. Mem. 8, 53-62 (2001).</li><li>Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+formation+in+the+honeybee+(Apis+mellifera)+and+its+dependency+on+the+cAMP-protein+kinase+A+pathway.">Learning and memory formation in the honeybee (Apis mellifera) and its dependency on the cAMP-protein kinase A pathway.</a> Animal Biology. 56, 259-278 (2006).</li><li>Hourcade, B., Muenz, T. S., Sandoz, J. C., Rossler, W., Devaud, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+memory+leads+to+synaptic+reorganization+in+the+mushroom+bodies:+a+memory+trace+in+the+insect+brain.">Long-term memory leads to synaptic reorganization in the mushroom bodies: a memory trace in the insect brain.</a> J. Neurosci. 30, 6461-6465 (2010).</li><li>Denker, M., Finke, R., Schaupp, F., Grun, S., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+odor+learning+in+the+honeybee+antennal+lobe.">Neural correlates of odor learning in the honeybee antennal lobe.</a> Eur. J. Neurosci. 31, 119-133 (2010).</li><li>Szyszka, P., Galkin, A., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Associative+and+non-associative+plasticity+in+kenyon+cells+of+the+honeybee+mushroom+body.">Associative and non-associative plasticity in kenyon cells of the honeybee mushroom body.</a> Front Syst. Neurosci. 2, 3-3 (2008).</li><li>Okada, R., Rybak, J., Manz, G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning-related+plasticity+in+PE1+and+other+mushroom+body-extrinsic+neurons+in+the+honeybee+brain.">Learning-related plasticity in PE1 and other mushroom body-extrinsic neurons in the honeybee brain.</a> J. Neurosci. 27, 11736-11747 (2007).</li><li>Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+activation+of+cAMP-dependent+protein+kinase+during+conditioning+induces+long-term+memory+in+honeybees.">Prolonged activation of cAMP-dependent protein kinase during conditioning induces long-term memory in honeybees.</a> Neuron. 27, 159-168 (2000).</li><li>Locatelli, F., Bundrock, G., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+and+temporal+release+of+glutamate+in+the+mushroom+bodies+improves+olfactory+memory+in+Apis+mellifera.">Focal and temporal release of glutamate in the mushroom bodies improves olfactory memory in Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 11614-11618 (2005).</li><li>Stollhoff, N., Menzel, R., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+recovery+from+extinction+depends+on+the+reconsolidation+of+the+acquisition+memory+in+an+appetitive+learning+paradigm+in+the+honeybee+(Apis+mellifera.">Spontaneous recovery from extinction depends on the reconsolidation of the acquisition memory in an appetitive learning paradigm in the honeybee (Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 4485-4492 (2005).</li><li>Stollhoff, N., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consolidation+of+an+extinction+memory+depends+on+the+unconditioned+stimulus+magnitude+previously+experienced+during+training.">Consolidation of an extinction memory depends on the unconditioned stimulus magnitude previously experienced during training.</a> J. Neurosci. 29, 9644-9650 (2009).</li><li>Snodgrass, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anatomy of the honeybee. , (1956).</li><li>Wustenberg, D., Gerber, B., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+communication:+long-+but+not+medium-term+retention+of+olfactory+memories+in+honeybees+is+impaired+by+actinomycin+D+and+anisomycin.">Short communication: long- but not medium-term retention of olfactory memories in honeybees is impaired by actinomycin D and anisomycin.</a> Eur. J. Neurosci. 10, 2742-2745 (1998).</li><li>Vollbehr, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zur+Orientierung+junger+Honigbienen+bei+ihrem+1.">Zur Orientierung junger Honigbienen bei ihrem 1.</a> Orientierungsflug. Zool. Jb. Physiol. 79, 33-69 (1975).</li><li>Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tactile+learning+and+the+individual+evaluation+of+the+reward+in+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.).</a> J. Comp Physiol [A]. 185, 1-10 (1999).</li><li>Sanchez, B. r. i. t. o., G, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+studies+on+tarsal+gustation+in+honeybees:+sucrose+responsiveness+and+sucrose-mediated+olfactory+conditioning.">Behavioral studies on tarsal gustation in honeybees: sucrose responsiveness and sucrose-mediated olfactory conditioning.</a> J. Comp Physiol A Neuroethol. Sens. Neural Behav. Physiol. 194, 861-869 (2008).</li><li>Menzel, R., Manz, G., Menzel, R., Greggers, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massed+and+spaced+learning+in+honeybees:+the+role+of+CS,+US,+the+intertrial+interval,+and+the+test+interval.">Massed and spaced learning in honeybees: the role of CS, US, the intertrial interval, and the test interval.</a> Learn. Mem. , 198-208 (2001).</li><li>Friedrich, A., Thomas, U., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+at+different+satiation+levels+reveals+parallel+functions+for+the+cAMP-protein+kinase+A+cascade+in+formation+of+long-term+memory.">Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory.</a> J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اصطياد النحل : النحل لجمع العلف ذوي الخبرة ، ويتم القبض النحل إما في الصباح أو في فترة بعد الظهر ، وتجنب وقت النحل الشباب على الطيران التوجه 19. العلافون جمع حبوب اللقاح إما أو الرحيق. وقد لوحظت اختلافات بين حبوب اللقاح والرحيق العلافون وفقا لاستجابة السكر وقدراتهم على التعلم 20. يمكن جمعها من أجل اللحاق العلافون الرحيق فقط ، يمكن تثبيت مصدر الغذاء الاصطناعي مليئة بمحلول سكروز بالقرب من خلية والحيوانات هناك. ويمكن تحديد العلافون اللقاح يعود الى خلية من سلال الطلع على أرجلها الخلفية 20. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد ومعالجة : يجب تجنب التبريد الممتدة من النحل على الجليد لأنها قد تؤثر على قدرتهم على التعلم والبقاء على قيد الحياة حتى نهاية التجربة. الرصغي يجب أن تكون ثابتة بعناية داخل أنبوب لتفادي التحفيز عرضي بمحلول السكروز. هذا هو المهم ، لأن النحل وقد ثبت أن التعلم عن طريق تحفيز الرصغي مع الحل succrose 3،21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكييف الشمية : عدد المحاكمات هواء ، ويمكن تغيير الفاصل الزمني بين المحاكمة ، ونقطة اختبار الوقت اعتمادا على التركيز في الدراسة 3،22. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التغذية : من المعروف أن مستوى شبع من النحل يؤثر على أدائها التعلم والذاكرة الاحتفاظ 3،23. هذا يجب أن يؤخذ في الاعتبار عند التخطيط للتجارب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحقن : توجد الحويصلات الهوائية في الصدر 17 النحل. هذه الأجزاء الحيوية في الجهاز التنفسي ضرورية للبقاء على قيد الحياة. وبالتالي يجب أن الحرص على عدم الاضرار الحويصلات الهوائية خلال الحقن. الافراج عن فقاعات الهواء إلى الأضرار التي لحقت الحويصلات الهوائية. </li></ol>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Syringe Omnifix 20 ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>B.Braun, Melsungen, Germany </td>
<td>4616200 V</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>White refined household sugar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kaisers Supermarket, Berlin, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Clove oil</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bombastus, Freital, Germany </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multipette plus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf, Hamburg, Germany</td>
<td>4981 000.019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rack for 30 bee tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plastic tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>UV light-permeable plexiglass pyramid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>height = 30cm, 
apex 3.5 x 3.5cm, 
base 18x18cm</td>
</tr>
<tr>
<td>Sticky tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tesa, Hamburg, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillator sticks 1-5&mu;l</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Selzer, Driedorf-Roth, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillator tips 1-5&mu;l</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Selzer, Driedorf-Roth, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Filter paper 0.16-0.2 mm thick</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Macherey-Nagel, D&uuml;ren, Germany</td>
<td>MN 616 or MN615</td>
<td>Adjusted to circular pieces with a 1.3 cm diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Disposable hypodermic needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>B. Braun, Melsungen, Germany</td>
<td>4657683</td>
<td>0.45 mm diameter</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

behavioural pharmacology in classical conditioning of the proboscis extension response in honeybees (apis mellifera)

ومن المعروف جيدا نحل العسل (أبيس mellifera) للاتصالات ومهاراتهم والتوجه لعروضه الرائعة التعلم 1،2 القدرة. لأن بقاء مستعمرة نحل العسل تعتمد على استغلال مصادر الغذاء ، والنحل ، تعلم وحفظ المؤن مواقع زهرة متغير فضلا عن ربحيتها. ويمكن بسهولة تدريب النحل المؤن في البيئات الطبيعية حيث العلف في موقع التغذية وتعلم الإشارات ذات الصلة مثل رائحة أو لون. ويمكن أيضا التعلم النقابي مشهي دراستها في ظل ظروف متحكم بها في المعمل عن طريق تكييف الاستجابة ملحق خرطوم (PER) من نحل العسل تسخيرها بشكل فردي 3،4. هذا النموذج يمكن تعلم ودراسة الآليات الجزيئية والخلايا العصبية التي تكمن وراء التعلم والذاكرة في تشكيل وسيلة بسيطة وموثوق بها للغاية 12/05. ويستخدم نهج الصيدلة السلوكية لدراسة الآليات الجزيئية. يتم حقن المخدرات بشكل منتظم في التدخل مع وظيفة جزيئات محددة أثناء أو بعد التعلم وتكوين الذاكرة 13-16. نحن هنا لشرح كيفية تسخيرها في تدريب النحل على تكييف الواحد وكيفية تطبيق الأدوية بشكل منتظم عن طريق الحقن في عضلة طيران النحل.

Watch this Scientific Journal Video about Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera at JoVE.com

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera

نحن لشرح كيفية تنفيذ أسلوب الصيدلة السلوكية في تكييف نموذج الشمية ترغبي في نحل العسل (أبيس mellifera) عن طريق التطبيق المنهجي للمخدرات. هذا الأسلوب يسمح التحقيق في آليات التعلم وتكوين الذاكرة الكامنة في طريقة بسيطة وموثوق بها.

السلوكي الصيدلة في الإشراط الكلاسيكي للاستجابة ملحق خرطوم في نحل العسل ( أبيس mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the ...

behavioural-pharmacology-classical-conditioning-proboscis-extension

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees (Apis mellifera)

19.2K Views.  Freie Universität Berlin. نحن لشرح كيفية تنفيذ أسلوب الصيدلة السلوكية في تكييف نموذج الشمية ترغبي في نحل العسل (أبيس mellifera) عن طريق التطبيق المنهجي للمخدرات. هذا الأسلوب يسمح التحقيق في آليات التعلم وتكوين الذاكرة الكامنة في طريقة بسيطة وموثوق بها.

Video: Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera

Recording Large-scale Neuronal Ensembles with Silicon Probes in the Anesthetized Rat

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of behaviors from the spiking activity of its neurons. One of the most effective methods to monitor spiking activity from a large number of neurons in multiple local neuronal circuits simultaneously is by using silicon electrode arrays1-3.
Action potentials produce large transmembrane voltage changes in the vicinity of cell somata. These output signals can be measured by placing a conductor in close proximity of a neuron. If there are many active (spiking) neurons in the vicinity of the tip, the electrode records combined signal from all of them, where contribution of a single neuron is weighted by its 'electrical distance'. Silicon probes are ideal recording electrodes to monitor multiple neurons because of a large number of recording sites (+64) and a small volume. Furthermore, multiple sites can be arranged over a distance of millimeters, thus allowing for the simultaneous recordings of neuronal activity in the various cortical layers or in multiple cortical columns (Fig. 1). Importantly, the geometrically precise distribution of the recording sites also allows for the determination of the spatial relationship of the isolated single neurons4. Here, we describe an acute, large-scale neuronal recording from the left and right forelimb somatosensory cortex simultaneously in an anesthetized rat with silicon probes (Fig. 2).

Extracellular recordings of neuronal activity using silicon probes in the anesthetized rat will be described. This technique allows information to be obtained across multiple brain areas from more than 100 neurons simultaneously. It provides information with single cell resolution about neuronal ensembles dynamics in multiple local circuits.

تسجيل على نطاق واسع اطقم متعلق بالخلايا العصبية مع مجسات للسيليكون في الجرذ خدر

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of ...

Behavioral Determination of Stimulus Pair Discrimination of Auditory Acoustic and Electrical Stimuli Using a Classical Conditioning and Heart-rate Approach

Acute animal preparations have been used in research prospectively investigating electrode designs and stimulation techniques for integration into neural auditory prostheses, such as auditory brainstem implants1-3 and auditory midbrain implants4,5. While acute experiments can give initial insight to the effectiveness of the implant, testing the chronically implanted and awake animals provides the advantage of examining the psychophysical properties of the sensations induced using implanted devices6,7.
Several techniques such as reward-based operant conditioning6-8, conditioned avoidance9-11, or classical fear conditioning12 have been used to provide behavioral confirmation of detection of a relevant stimulus attribute. Selection of a technique involves balancing aspects including time efficiency (often poor in reward-based approaches), the ability to test a plurality of stimulus attributes simultaneously (limited in conditioned avoidance), and measure reliability of repeated stimuli (a potential constraint when physiological measures are employed).
Here, a classical fear conditioning behavioral method is presented which may be used to simultaneously test both detection of a stimulus, and discrimination between two stimuli. Heart-rate is used as a measure of fear response, which reduces or eliminates the requirement for time-consuming video coding for freeze behaviour or other such measures (although such measures could be included to provide convergent evidence). Animals were conditioned using these techniques in three 2-hour conditioning sessions, each providing 48 stimulus trials. Subsequent 48-trial testing sessions were then used to test for detection of each stimulus in presented pairs, and test discrimination between the member stimuli of each pair. 
This behavioral method is presented in the context of its utilisation in auditory prosthetic research. The implantation of electrocardiogram telemetry devices is shown. Subsequent implantation of brain electrodes into the Cochlear Nucleus, guided by the monitoring of neural responses to acoustic stimuli, and the fixation of the electrode into place for chronic use is likewise shown.

The application of a classical fear conditioning behavioral paradigm for auditory prosthetic research in rats is described. This paradigm provides a mechanism for identifying both detection of, and discrimination between, distinct acoustic and electrical stimuli using heart-rate as an outcome measure.

السلوكية تحديد التمييز زوج من التحفيز السمعية الصوتية والمحفزات الكهربائية باستخدام تكييف الكلاسيكية والنهج ضربات القلب

Acute animal preparations have been used in research prospectively investigating electrode designs and stimulation techniques for integration into neural ...

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

اختبار ماوس القسري السباحة

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Tail Suspension Test

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that are expected to affect depression related behaviors. Mice are suspended by their tails with tape, in such a position that it cannot escape or hold on to nearby surfaces. During this test, typically six minutes in duration, the resulting escape oriented behaviors are quantified. The tail-suspension test is a valuable tool in drug discovery for high-throughput screening of prospective antidepressant compounds. Here, we describe the details required for implementation of this test with additional emphasis on potential problems that may occur and how to avoid them. We also offer a solution to the tail climbing behavior, a common problem that renders this test useless in some mouse strains, such as the widely used C57BL/6. Specifically, we prevent tail climbing behaviors by passing mouse tails through a small plastic cylinder prior to suspension. Finally, we detail how to manually score the behaviors that are manifested in this test.

The tail-suspension test is validated as an experimental procedure to assess antidepressant efficacy of drug treatments in mice. Mice are suspended by their tails for six minutes and escape-related behaviors are assessed. We describe procedures used in conducting the tail suspension test.

اختبار الذيل تعليق

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

عن طريق اللمس تكييف وتحليل حركة استراتيجيات أخذ العينات Antennal في نحل العسل (<em&gt; أبيس mellifera</em&gt; L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

This video demonstrates novel techniques of RNA interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees using double-stranded RNA (dsRNA) injections. It also presents a protocol of proboscis extension response (PER) assay for measuring gustatory perception.	
	RNAi-mediated gene knockdown is an effective technique downregulating target gene expression. This technique is usually used for single gene manipulation, but it has limitations to detect interactions and joint effects between genes. In the first part of this video, we present two strategies to simultaneously knock down two genes (called double gene knockdown). We show both strategies are able to effectively suppress two genes, vitellogenin (vg) and ultraspiracle (usp), which are in a regulatory feedback loop. This double gene knockdown approach can be used to dissect interrelationships between genes and can be readily applied in different insect species.	
	The second part of this video is a demonstration of proboscis extension response (PER) assay in honey bees after the treatment of double gene knockdown. The PER assay is a standard test for measuring gustatory perception in honey bees, which is a key predictor for how fast a honey bee's behavioral maturation is. Greater gustatory perception of nest bees indicates increased behavioral development which is often associated with an earlier age at onset of foraging and foraging specialization in pollen. In addition, PER assay can be applied to identify metabolic states of satiation or hunger in honey bees. Finally, PER assay combined with pairing different odor stimuli for conditioning the bees is also widely used for learning and memory studies in honey bees.

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

In this protocol, we describe two strategies that simultaneously suppress two genes (double gene knockdown) in honey bees. Then we present how to use the proboscis extension response (PER) assay to study the effect of double gene knockdown on honey bee gustatory perception.

رني بوساطة ضربة قاضية جين مزدوجة وذوقي قياس مدركات في عسل النحل (<em&gt; mellifera أبيس</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

بروتوكول الاستجابة ململة الإرشاد للتحقيق اللدونة السلوكية في الحشرات: تطبيق لالأساسية، الطبية الحيوية، والبحوث الزراعية

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Simultaneous Long-term Recordings at Two Neuronal Processing Stages in Behaving Honeybees

In both mammals and insects neuronal information is processed in different higher and lower order brain centers. These centers are coupled via convergent and divergent anatomical connections including feed forward and feedback wiring. Furthermore, information of the same origin is partially sent via parallel pathways to different and sometimes into the same brain areas. To understand the evolutionary benefits as well as the computational advantages of these wiring strategies and especially their temporal dependencies on each other, it is necessary to have simultaneous access to single neurons of different tracts or neuropiles in the same preparation at high temporal resolution. Here we concentrate on honeybees by demonstrating a unique extracellular long term access to record multi unit activity at two subsequent neuropiles1, the antennal lobe (AL), the first olfactory processing stage and the mushroom body (MB), a higher order integration center involved in learning and memory formation, or two parallel neuronal tracts2 connecting the AL with the MB.&#160;The latter was chosen as an example and will be described in full. In the supporting video the construction and permanent insertion of flexible multi&#160;channel wire electrodes is demonstrated. Pairwise differential amplification of the micro&#160;wire electrode channels drastically reduces the noise and verifies that the source of the signal is closely related to the position of the electrode tip. The mechanical flexibility of the used wire electrodes allows stable invasive long&#160;term recordings over many hours up to days, which is a clear advantage compared to conventional extra&#160;and intracellular in vivo recording techniques.

Simultaneous extracellular long term recordings from two different brain neuropiles or two different anatomical tracts were established in honeybees. These recordings allow the investigation of temporal aspects of neuronal processing across different brain areas at the single neuron as well as at the ensemble level in a behaving animal.

تسجيلات في وقت واحد على المدى الطويل في مرحلتين العصبية في معالجة يتصرفون نحل العسل

In both mammals and insects neuronal information is processed in different higher and lower order brain centers. These centers are coupled via convergent ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the surface of the cornea, electrical activity generated in response to light can be measured and used to assess the activity of retinal cells in vivo. This manuscript describes the use of the ERG to measure visual function in zebrafish. Zebrafish have long been utilized as a model for vertebrate development due to the ease of gene suppression by morpholino oligonucleotides and pharmacological manipulation. At 5-10 dpf, only cones are functional in the larval retina. Therefore, the zebrafish, unlike other animals, is a powerful model system for the study of cone visual function in vivo. This protocol uses standard anesthesia, micromanipulation and stereomicroscopy protocols that are common in laboratories that perform zebrafish research. The outlined methods make use of standard electrophysiology equipment and a low light camera to guide the placement of the recording microelectrode onto the larval cornea. Finally, we demonstrate how a commercially available ERG stimulator/recorder originally designed for use with mice can easily be adapted for use with zebrafish. ERG of larval zebrafish provides an excellent method of assaying cone visual function in animals that have been modified by morpholino oligonucleotide injection as well as newer genome engineering techniques such as Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucleases (TALENs), and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/Cas9, all of which have greatly increased the efficiency and efficacy of gene targeting in zebrafish. In addition, we take advantage of the ability of pharmacological agents to penetrate zebrafish larvae to evaluate the molecular components that contribute to the photoresponse. This protocol outlines a setup that can be modified and used by researchers with various experimental goals.

We present a method for the electroretinographic (ERG) analysis of zebrafish larvae utilizing micromanipulation and electroretinography techniques. This is a simple and straightforward method for assaying visual function of zebrafish larvae in vivo.

تحليل مخطط كهربية الشبكية من الاستجابة البصرية في الزرد اليرقات

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize and to study. Therefore, bees have long been a favored model amongst neurobiologists and neuroethologists for studying the neural basis of social and natural behavior. It is important, however, that the experimental techniques used to study bees do not interfere with the behaviors being studied. Because of this, it has been necessary to develop a range of techniques for pharmacological manipulation of honey bees. In this paper we demonstrate methods for treating restrained or free-flying honey bees with a wide range of pharmacological agents. These include both noninvasive methods such as oral and topical treatments, as well as more invasive methods that allow for precise drug delivery in either systemic or localized fashion. Finally, we discuss the advantages and disadvantages of each method and&#160;describe common hurdles and how to best overcome them. We conclude with a discussion on the importance of adapting the experimental method to the biological questions rather than the other way around.

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

This manuscript describes several protocols for administering pharmacological agents to honey bees, including simple noninvasive methods for free-flying bees, as well as more invasive variants that allow precise localized treatment of restrained bees.

التلاعب Neuropharmacological من ضبط النفس وتحلق خالية من عسل النحل،<em&gt; mellifera أبيس</em

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize ...