وقد أيد هذا المشروع من المنح المقدمة من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث كندا (355881)، ومؤسسة الكندي للابتكار.

* أهم الخطوات. 1. المعدات والبرمجيات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم التدريب والاختبار في غرف الماوس استثابي مجهزة مع اثنين من العتلات، خفيفة للغاية قابل للسحب 1 المتمركزة على جانبي وعاء طعام (انظر الجدول 1). يقع ضوء التحفيز فوق كل ذراع، وهناك ضوء منزل في الجزء العلوي من القفص. يقع موزع بيليه خارج الدائرة. وتقع كل غرفة داخل حجرة الصوت مخففة مع مروحة التهوية. وترتبط الغرف لأجهزة الكمبيوتر الشخصية مع البرمجيات الرابع MedPC عبر مجلس الوزراء &quot;التحكم الذكية&quot; واجهة. </li></ol> ملاحظة: عندما خفيفة للغاية العتلات لا تتوفر فمن المستحسن أن يتم استخدام الأنف كزة باعتبارها استجابة استثابي للدراسات الماوس. ومع ذلك، مع كل من الخيارات المتاحة نقترح اختيار خفيفة للغاية العتلات كإجراء أكثر موثوقية من التحفيز نظرا إلى أن الأنف كزة الردود يمكن أن بأثار ه بواسطة استكشافية استنشاق. <ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم كتابة هذه البرامج MedPC المستخدمة لتشغيل المهام استثابي في تدوين رمز Medstate التي يمكن للمستخدم معرفة بمساعدة دليل البرمجة المتوفرة. برمجة يوفر مرونة للمستخدم لتعديل القوانين القائمة أو إنشاء المعلمات تجريبي فريد. ويمكن الحصول على رموز معينة مجانا من شركاء المتوسطي &quot;Medstate الترقيم مستودع&quot; <a href="http://www.mednr.com" target="_blank">http://www.mednr.com</a> . ويمكن شراء رموز إضافية من شركاء البحر المتوسط. </li></ol> 2. التأقلم الماوس وتقييد الغذاء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند وصول الفئران هي المجموعة يضم ما لا يقل عن 10 أيام للتأقلم على عكس 12 دورة الضوء / الظلام ساعة وقدم مع وصول libitum الإعلانية على مستوى تشاو والمياه. في حالتنا نحن نستخدم الكبار C57BL / 6 الفئران التي تم شراؤها من نهر تشارلز (سانت ثابت، QC). يتم تنفيذ جميع التلاعب الماوس والتجارب السلوكية خلال دورة الظلام. جميع الموالينوقد وافق cedures التي تنطوي على استخدام الحيوانات من قبل لجنة رعاية CRCHUM الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبعد ذلك الفئران منفردة تسكينهم وفرضت قيودا على المواد الغذائية (70٪ من كمية غذائهم اليومي) حتى تصل إلى 90-95٪ خالية من تغذية. وزن الجسم من أجل تسهيل الحصول على رافعة الصحافة الاستجابة وقدمت الفئران حصتها اليومية من الغذاء في قفص المنزل بعد انتهاء الدورة. عند الوصول إلى 5-10٪ وفقدان الوزن، يتم ضبط الغذائية اليومية المخصصة لتحقيق الاستقرار في انخفاض وزن الجسم للفترة المتبقية من فترة التدريب. مرة واحدة ولقد حققت معايير اكتساب الفئران (أنظر أدناه) وضعوا مرة أخرى على الجدول الزمني للتغذية libitum الإعلانية. الفئران على استعادة فقدت وزن الجسم في حوالي 3-4 أيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم التعامل مع الفئران في غرفة اختبار لمدة 3 أيام متتالية قبل انعقاد الدورة التدريبية الأولى. في اليوم قبل بدء التدريب يتم وضعها 10-15 عالية من الدهون وارتفاع السكر (HFHS) الكريات في قفص المنزل لمنع التأثير المحتمل للneophobia الطعام على performan استثابيم. نحن نستخدم HFHS 20 ملغ، خالية من الغبار، الغذاء الكريات دقة (14 ملغ تتوفر أيضا) التي تحتوي على سعرة حرارية (48.9٪) والدهون (سيرف بيو، Frenchtown، ونيو جيرسي). </li></ol> 3. استثابي التدريب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في البداية يتم تدريب الفئران للضغط على رافعة على نسبة ثابتة (FR) -1 الجدول الزمني لتعزيز بموجبه الصحافة رافعة واحدة يتسبب في تسليم بيليه الغذائية إلى وعاء. يتم تعيين واحد فقط رافعة بأنه &quot;نشط&quot; (اثار تسليم مكافأة الغذاء)، ويقابله تخصيص العتلات اليمين واليسار بين الفئران. من المهم أن تضيف ما لا يقل عن مهلة 5 2 (TO) للجدول الزمني FR1 (FR1/TO-5)، وخلالها رافعة ضغط إضافية لا يؤدي في تسليم المواد الغذائية بيليه. هذه الفترة ليتيح الوقت للفئران لاستهلاك الغذاء بيليه، ويمكن استخدام عموميات وقتا أطول ولكن إذا كان يشعر مجرب من الضروري للنموذج الفئران. كل دورة تدريبية تستمر FR 1 ساعة أو عندما تم تسليم 50 الكريات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معايير اكتساب *: &lt;/ strong&gt; والمعايير المستخدمة لتحديد اكتساب الغذاء حافظت استثابي الاستجابة ما يلي: (1) الحد الأدنى لعدد الاستجابات الفعالة والمكافآت المكتسبة، (2) على قدر من التمييز بين دعامتين النشطة وغير النشطة، و (3) بين الدورة أداء استقرار. وتعتبر الفئران واظهار التمييز ≥ 03:01 لذراع نشط مقابل نشط والحصول على مكافآت ≥ 20 في كل دورة على مدى ثلاث جلسات متتالية من أجل تحقيق معايير اكتساب 10. وقد لاحظنا أن الغالبية (~ 75٪) من C57BL6 الفئران تتطلب حوالي 7-10 أيام من التدريب لتحقيق معايير اكتساب. الفئران التي لا تصل إلى معايير اكتساب هذا الوقت الخضوع لمزيد من التدريب لعدة أيام إضافية 1 5-7. استثنينا من فئران التجارب (~ 5٪ من الحالات) عندما لا يكون هناك تقدم كل يوم 5 تدريب اضافي. من المهم أن نضع في اعتبارنا أن اكتساب استثابي ضعف قد يكون نتيجة لبعض التدخلات الدوائية والوراثية، وينبغي بالتالي أن وثقت. &lt;/ لى&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد ثلاث جلسات متتالية للحصول على ≥ 20 الكريات، ويتم زيادة جدول زمني لFR5/TO-5 ثانية في 5 الذي يضغط رافعة نشطة تؤدي الى تسليم الغذاء بيليه. تدريب على الجدول الزمني للFR5 يستمر ثلاثة ايام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> * ثم يتم تدريب الفئران في نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني لتعزيز موقفها. ويمكن حساب الجدول الزمني نسبة الاستجابة خلال اختبار للعلاقات العامة وفقا للريتشاردسون وروبرتس (1996) 11 باستخدام الصيغة التالية (مقربة إلى أقرب عدد صحيح): = [5 ه (R * 0.2)] - 5 حيث R هو مساو لعدد من المواد الغذائية المكافآت حصل بالفعل زائد 1 (أي معزز المقبل). وهكذا، فإن عددا من الاستجابات المطلوبة لكسب مكافأة الغذاء يتبع الترتيب: 1، 2، 4، 6، 9، 12، 15، 20، 25، 32، 40، 50، 62، 77، 95 وهلم جرا. النسبة النهائية الانتهاء هو نقطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دورة العلاقات العامة تستمر مدة أقصاها 1 ساعة. فشل في الضغط على رافعة في أية نتائج دقيقة في الفترة من 10 ختام الدورة. ادائهاويعتبر مانس على الجدول الزمني للعلاقات العامة لتعزيز الاستقرار عندما يكون عدد من الجوائز حصل في الدورة 1 ساعة ينحرف عن 10٪ ≤ مدة لا تقل عن 3 أيام متتالية. </li></ol> 4. تقدمية اختبار والتحقق من صحة نسبة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتحقق من صحة الغذاء حافظت استثابي الاستجابة في مهمة العلاقات العامة، يمكن للمرء أن يقيم نقطة التلاعب التالية الاستجابة معروف لتعديل مكافأة الغذاء. اختبار سهل نسبيا للاضطلاع هو الحرمان من الطعام والتي سوف تزيد من حالة تحفيزية للفأرة على الغذاء، وبالتالي زيادة نقاط. يجب أولا أن الفئران التي يتم اختبارها في مهمة العلاقات العامة خلال فترة الرضاعة libitum الإعلانية حتى يتحقق الاستقرار، والأداء خط الأساس. تتم إزالة في اليوم التالي لمشاركة الطعام &quot;خط الأساس&quot; يوم من قفص المنزل ويتم اختبارها ثم الفئران في مهمة العلاقات العامة بعد 24 ساعة من بدء الصيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن أيضا التحقيق في ما إذا كانت إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي سوف يكون له تأثير عكسي على نقطةالعتبات. وقد حلت ليبتين (AF Parlow، هرمون الوطنية وبرنامج الببتيد، جوائز كبيرة) في برنامج تلفزيوني العقيمة. وأجري اختبار للعلاقات العامة في أعقاب حقنة الملكية الفكرية من برنامج تلفزيوني في يوم واحد ثم بعد حقن هرمون الليبتين يوم (5 ملغ / كلغ) التالية. تم حقن هرمون الليبتين ساعة واحدة قبل الاختبار العلاقات العامة. وتمت مقارنة نقاط التوقف باستخدام الاقتران اختبار t (GraphPad بريزم). </li></ol> 5. ممثل النتائج عند اختبار قدرة الحرمان من الطعام لتعديل نقطة توقف عن الاستجابة على جدول زمني للعلاقات العامة من التعزيز، فإننا نتوقع تحقيق زيادة كبيرة في نقاط التوقف كما هو موضح في الشكل رقم 1. في هذه التجربة أنتجت فترة 24 ساعة من الحرمان من الطعام 1 ~ 3.6 أضعاف الزيادة في نقاط مقارنة مع تلك التي حصلنا عليها في دولة خالية من التغذية الأساسية مما يوحي أن الحرمان من الغذاء يزيد من الآثار مكافأة من المواد الغذائية. في مجال الإدارة، وعلى النقيض هامشية من هرمون اللبتين قهمي (5 مغ / كغ، IP) ساعة واحدة قبل روينبغي أن esting تخفيض نقطة الاستجابة كما هو مبين في الشكل 2. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig1.jpg" /> الشكل 1. الصوم يزيد من الآثار مكافأة من المواد الغذائية. صيام 24 ساعة زيادة كبيرة في نقاط التوقف على نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني للتعزيز في الفئران (ن = 4). يعني ± SEM *؛ ف &lt;.05. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig2.jpg" /> الشكل 2. اللبتين يقلل مكافأة الغذاء في الفئران. انخفضت إدارة يبتين الطرفية (5 ملغ / كلغ) عتبات العلاقات العامة استجابة نقطة توقف في الفئران (ن = 4). يعني ± SEM؛ * P &lt;0.05.

<ol>
	<li>Fulton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appetite+and+reward.">Appetite and reward.</a> Front. Neuroendocrinol. 31, 85-103 (2010).</li><li>Zheng, H., Lenard, N. R., Shin, A. C., Berthoud, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appetite+control+and+energy+balance+regulation+in+the+modern+world:+reward-driven+brain+overrides+repletion+signals.">Appetite control and energy balance regulation in the modern world: reward-driven brain overrides repletion signals.</a> International journal of Obesity. 33, S8-S13 (2009).</li><li>Skinner, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Behavior of Organisms: An Experimental Analysis. , (1938).</li><li>Hodos, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+ratio+as+a+measure+of+reward+strength.">Progressive ratio as a measure of reward strength.</a> Science. 134, 943-944 (1961).</li><li>Hodos, W., Kalman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increment+size+and+reinforcer+volume+on+progressive+ratio+performance.">Effects of increment size and reinforcer volume on progressive ratio performance.</a> J. Exp. Anal. Behav. 6, 387-392 (1963).</li><li>Stafford, D., LeSage, M. G., Glowa, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive-ratio+schedules+of+drug+delivery+in+the+analysis+of+drug+self-administration:+a+review.">Progressive-ratio schedules of drug delivery in the analysis of drug self-administration: a review.</a> Psychopharmacology. , 139-169 (1998).</li><li>Glass, M. J., O'Hare, E., Cleary, J. P., Billington, C. J., Levine, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+naloxone+on+food-motivated+behavior+in+the+obese+Zucker+rat.">The effect of naloxone on food-motivated behavior in the obese Zucker rat.</a> Psychopharmacology (Berl). 141, 378-384 (1999).</li><li>Brennan, K., Roberts, D. C., Anisman, H., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+differences+in+sucrose+consumption+in+the+rat:+motivational+and+neurochemical+correlates+of+hedonia.">Individual differences in sucrose consumption in the rat: motivational and neurochemical correlates of hedonia.</a> Psychopharmacology (Berl). 157, 269-276 (2001).</li><li>Vaughan, C., Moore, M., Haskell-Luevano, C., Rowland, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+motivated+behavior+of+melanocortin-4+receptor+knockout+mice+under+a+progressive+ratio+schedule.">Food motivated behavior of melanocortin-4 receptor knockout mice under a progressive ratio schedule.</a> Peptides. 27, 2829-2835 (2006).</li><li>Haluk, D. M., Wickman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+study+design+variables+and+their+impact+on+food-maintained+operant+responding+in+mice.">Evaluation of study design variables and their impact on food-maintained operant responding in mice.</a> Behav. Brain Res. 207, 394-401 (2010).</li><li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats:+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy.">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li><li>Jewett, D. C., Cleary, J., Levine, A. S., Schaal, D. W., Thompson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neuropeptide+Y,+insulin,+2-deoxyglucose,+and+food+deprivation+on+food-motivated+behavior.">Effects of neuropeptide Y, insulin, 2-deoxyglucose, and food deprivation on food-motivated behavior.</a> Psychopharmacology (Berl). 120, 267-271 (1995).</li><li>Fulton, S., Woodside, B., Shizgal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+brain+reward+circuitry+by+leptin.">Modulation of brain reward circuitry by leptin.</a> Science. 287, 125-128 (2000).</li><li>Figlewicz, D. P., Bennett, J. L., Naleid, A. M., Davis, C., Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraventricular+insulin+and+leptin+decrease+sucrose+self-administration+in+rats.">Intraventricular insulin and leptin decrease sucrose self-administration in rats.</a> Physiol. Behav. 89, 611-616 (2006).</li></ol>

وترعى الإنتاج وحرية الوصول من هذه المادة عن طريق الفيديو من قبل شركة ميد، أسوشيتس

المهام تكييف هواء فعال توفر وسيلة فعالة لتقييم التغييرات في خصائص تحفيزية من المواد الغذائية. الإجراءات التجريبية تفصيلا في الوقت الحاضر الفئران مادة التدريب تصريح إلى الصحافة رافعة للحصول على مكافآت الغذاء وستابلي الرد على جدول زمني للعلاقات العامة لتعزيز موقفها. قياس كمية الغذاء المستهلكة لا يوفر قراءات نفس تدابير الاستجابة جهد المستندة منذ ليست كل العوامل التي تؤثر على الاستهلاك الغذائي تعدل الآثار مكافأة من المواد الغذائية. على سبيل المثال، استنزاف للاستعمال الجلوكوز من قبل الإدارة 2-deoxyglucose الطرفية في الفئران يزيد من كمية الطعام المستهلكة متاحة بحرية ولكن فشل في تغيير نقاط لكسر الارسال في مهمة العلاقات العامة للغذاء 12. ويمكن للعلاقات العامة نقطة توقف عن الاستجابة تعكس أيضا التغييرات في نوعية المكافآت الغذاء. على سبيل المثال، ترتبط بشكل إيجابي نقاط لكسر الارسال مع تركيز السكروز مما يدل على أن الدافع وراء الزيادة السكروز بطريقة يلي الطعم الحلو 8 </sيصل&gt;. هنا علينا أن نبرهن على 24H الحرمان من الغذاء يزيد إلى حد كبير نقاط التوقف العلاقات العامة للغذاء HFHS في الفئران. في المقابل، وجدنا أن إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي انخفاضات كبيرة في نقاط التوقف عن الطعام HFHS في الفئران. هذه النتائج تتفق مع الإجراءات المبلغ عنها سابقا من الحرمان من الطعام واللبتين على عتبات مكافأة في الفئران 12-14. عند استخدام هذا البروتوكول من المهم أن نأخذ في الاعتبار أن الحصول على الغذاء حافظت تتعزز بشكل كبير استثابي الاستجابة من قبل تدريبية منتظمة (كل أيام 1-2)، وزيادة حالة تحفيزية من الفأرة عن طريق تطبيق نظام تقييد المواد الغذائية. وبالإضافة إلى ذلك، وضمان أن الفئران تبدي مستقرة نسبيا عن الاستجابة على الجدول الزمني لتعزيز واحد قبل الانتقال الى جداول أكثر تعقيدا (على سبيل المثال، إلى FR1 FR5) هو المفتاح لتقليل أداء متغير خلال الاختبار. على الرغم من تطبيق هذه الخطوات، ليس من غير المألوف للحصول على بعض التباينخصوصا بين الفئران مختلفة. لهذا السبب، ينصح بشدة لاستخدام داخل المواضيع (التدابير المتكررة) تصميم عندما يكون ذلك ممكنا لإزالة التباين عبر الموضوع. ويمكن على الرغم من داخل موضوع الاختبار ليس من الممكن للتحقيق في التعديلات الجينية مستقر (أي خروج المغلوب في مقابل السيطرة على الفئران) يمكن استخدامها لدراسة تأثير المخدرات، أو آفات حاد التلاعب الجيني (على سبيل المثال، optogenetic). السمنة والبدانة والأمراض ذات الصلة مشكلة متنامية والتي زادت على الحاجة الملحة لتحديد الجزيئات والممرات العصبية المعنية. تراكم الأدلة يسلط الضوء على الدور الهام الذي تؤديه دائرة الإثابة في الدماغ في شغف الغذائي، وزيادة السعرات الحرارية وزيادة الوزن. مهمة العلاقات العامة هي أداة قيمة لقياس أثر التلاعب العصبية أو وراثية أو الدوائية على آثار مكافأة من المواد الغذائية.

<html><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> بند </td><td> فهرس العدد </td><td> شركة </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> غرف الماوس استثابي </td><td> ENV-009A </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td> ميد شركاه المحدودة ص 319 سانت ألبانز، فيرمونت 05478، الولايات المتحدة الأمريكية الهاتف: (802) 527-2343 </td></tr><tr><td> 8 inputs/16 المدخلات الذكية لوحة التحكم اتصال </td><td> SG-716B </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> خفيفة للغاية قابل للسحب فأر رافعة </td><td> ENV-312 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> بيليه الصيدلي </td><td> ENV-203 </td><td>. MED-associates.com / &quot;الهدف =&quot; _blank &quot;&gt; ميد شركاه، وشركة </td><td></td></tr><tr><td> بيت الضوء </td><td> ENV-215 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> التحفيز الضوء </td><td> ENV-221 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> خالية من الغبار الدقيقة 20 مغ عالية الدهون وارتفاع السكر الكريات </td><td> F-06649 </td><td> الحيوي سيرف </td><td> الحيوي سيرف 8 شارع واحد، جناح 1 Frenchtown، ونيو جيرسي 08825، الولايات المتحدة الأمريكية الهاتف: (800) -996-9908 </td></tr></tbody></table> الجدول رقم 1. معدات ومواد محددة.

progressive-ratio responding for palatable high-fat and high-sugar food in mice

الأطعمة التي هي غنية في الدهون والسكر تساهم بشكل ملحوظ في معدلات الإفراط في الأكل والمتصاعد من السمنة. لا يمكن للاستهلاك الأغذية قبولا إحداث أثر مكافأة يعزز عمل، نتيجة جمعيات ويعزز السلوك في المستقبل تستهدف الحصول على هذه الأطعمة. أدلة متزايدة على أن آثار مكافأة للطاقة الكثيفة الأطعمة تلعب دورا عميقة في الإفراط في تناول الطعام ووضع السمنة وزيادة الاهتمام في دراسة الجينات والجزيئات والدوائر العصبية التي تعدل المواد الغذائية 1،2 الثواب. يمكن دراسة تأثير مكافأة من المحفزات المختلفة عن طريق قياس الرغبة في العمل للحصول عليها، كما هو الحال في المهام تكييف هواء فعال 3. اكتسبت نماذج استثابي القياس مكافأة الغذائية والاستجابات السلوكية الطوعية التي وجهت في الحصول على الغذاء. مقياس استخداما للقوة المكافأة هو إجراء استثابي المعروفة باسم نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني لتعزيز موقفها. 4،5 طن في العلاقات العامةنسأل، ويلزم هذا الموضوع لجعل عددا متزايدا من ردود استثابي لكل مكافأة متتالية. أظهرت دراسة رائدة من Hodos (1961) أن عدد الاجابات للحصول على مكافأة الماضي، ووصف نقطة الإيقاف، بمثابة مؤشر على قوة مكافأة 4. في حين أن الإجراءات استثابي قياس التغييرات في معدل الاستجابة وحدها لا يمكن الفصل بين التغيرات في قوة مكافأة من إحداث تغييرات في قدرة الأداء، ونقطة توقف المستمدة من الجدول الزمني للعلاقات العامة هو مقياس جيد التحقق من آثار مكافأة من المواد الغذائية. وقد استخدمت هذه المهمة العلاقات العامة على نطاق واسع لتقييم تأثير مكافأة تعاطيها والغذاء في الفئران (على سبيل المثال، 6-8)، ولكن إلى حد أقل في الفئران 9. وقد زاد من الاستخدام المتزايد للفئران معدلة وراثيا والنظام الغذائي الناجم عن نماذج الماوس السمنة مطالب باتخاذ تدابير سلوكية من مكافأة الغذاء في الفئران. في هذه المادة ونحن بالتفصيل المواد والإجراءات التي تستخدم لتدريب الفئران على الاستجابة (رافعة الصحافة) للحصول على الدهون عاليةوكريات الغذائية عالية من السكر على جدول زمني للعلاقات العامة لتعزيز موقفها. نظهر أن عتبات استجابة نقطة بعد زيادة الحرمان من الطعام وانخفاض حاد مع إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي والتحقق من صحتها وبالتالي استخدام هذا النموذج الغذائي استثابي في الفئران.

Watch this Scientific Journal Video about Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice at JoVE.com

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

في هذا التقرير تفاصيل عن البروتوكول المستخدمة لقياس آثار مكافأة عالية من الدهون الغذائية في الفئران باستخدام تقدمية مهمة نسبة تكييف هواء فعال.

التقدمي نسبة الاستجابة لاستساغة الغذاء عالي الدهون ونسبة عالية من السكر في الفئران

Foods that are rich in fat and sugar significantly contribute to over-eating and escalating rates of obesity. The consumption of palatable foods can ...

progressive-ratio-responding-for-palatable-high-fat-high-sugar-food

Research

JoVE Journal

Neuroscience

21.9K Views.  University of Montreal. في هذا التقرير تفاصيل عن البروتوكول المستخدمة لقياس آثار مكافأة عالية من الدهون الغذائية في الفئران باستخدام تقدمية مهمة نسبة تكييف هواء فعال.

Video: Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty acid receptors housed on taste cells. Previous research has shown that an individual&#39;s oral sensitivity to fatty acid, specifically oleic acid (C18:1) is associated with body mass index (BMI), dietary fat consumption, and the ability to identify fat in foods. We have developed a reliable and reproducible method to assess oral chemoreception of fatty acids, using a milk and C18:1 emulsion, together with an ascending forced choice triangle procedure. In parallel, a food matrix has been developed to assess an individual&#39;s ability to perceive fat, in addition to a simple method to assess fatty food liking. As an added measure tongue photography is used to assess papillae density, with higher density often being associated with increased taste sensitivity.

Oral chemoreception of fatty acids and the association with diet and fatty food preferences may enable the identification of mechanisms involved with the development of obesity and why dietary changes may be difficult for many individuals.

قياس الأحماض الدهنية عن طريق الفم العتبات، الدهون الإدراك، الأغذية الدهنية الميل، والحليمات الكثافة في البشر

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

طريقة بسيطة وغير مكلفة لتحديد الباردة الحساسية والتكيف في الفئران

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

Elevated blood glucose levels in type 2 diabetes mellitus (T2DM), a complex and multifactorial metabolic disease, are caused by insulin resistance and &#946;-cell failure. Various strategies, including the injection of insulin or the usage of insulin-sensitizing drugs, were pursued to treat T2DM or at least reduce the symptoms. In addition, the application of herbal compounds has attracted increasing attention. Thus, it is necessary to find efficient test systems to identify and characterize insulin-mimetic compounds. Here we developed a modified chick embryo model, which enables testing of synthetic compounds and herbal extracts with insulin-mimetic properties. Using a fluorescence microscopy-based primary screen, which quantifies the translocation of Glucose transporter 4 (Glut4) to the plasma membrane, we were able to identify compounds, mainly herbal extracts, which lead to an increase of intracellular glucose concentrations in adipocytes. However, the efficacy of these substances requires further verification in a living organism. Thus, we used an in-ovo approach to identify their blood glucose-reducing properties. The approval by an ethics committee is not needed since the use of chicken embryos during the first two-thirds of embryonic development is not considered an animal experiment. Here, the application of this model is described in detail.

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

In this study, we describe an in-ovo system as a promising tool to test insulin-mimetic compounds in a living organism. The main advantages include adequate throughput rates and acceptable costs, which enable the identification of phytochemicals with insulin-mimetic properties.

في Ovo نموذجية لاختبار مركبات الأنسولين ميميتيك

Elevated blood glucose levels in type 2 diabetes mellitus (T2DM), a complex and multifactorial metabolic disease, are caused by insulin resistance and ...

Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as visually evoked potentials (VEPs) or somatosensory evoked potentials (SEPs), the auditory evoked potentials (AEPs) are triggered by the repetitive presentation of identical stimuli, the electroencephalographic (EEG) response of which is subsequently averaged resulting in distinct positive (p) and negative (n) deflections. In humans, both the amplitude and the latency of individual peaks can be used to characterize alterations in synchronization and conduction velocity in the underlying neuronal circuitries. Importantly, AEPs are also applied in basic and preclinical science to identify and characterize the auditory function in pharmacological and genetic animal models. Even more, animal models in combination with pharmacological testing are utilized to investigate for potential benefits in the treatment of sensorineural hearing loss (e.g., age- or noise-induced hearing deficits). Here we provide a detailed and integrative description of how to record auditory brainstem-evoked responses (ABRs) in mice using click and tone-burst application. A specific focus of this protocol is on pre-experimental animal housing, anesthesia, ABR recording, ABR filtering processes, automated wavelet-based amplitude growth function analysis, and latency detection.

Brainstem evoked response audiometry is an important tool in clinical neurophysiology. Nowadays, brainstem evoked response audiometry is also applied in the basic science and preclinical studies involving both pharmacological and genetic animal models. Here we provide a detailed description of how auditory brainstem responses can be successfully recorded and analyzed in mice.

الحصول على البيانات وتحليلها في الدماغ أثار استجابة القياس السمعي في الفئران

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as ...

Electrocorticographic Recording of Cerebral Cortex Areas Manipulated Using an Adeno-Associated Virus Targeting Cofilin in Mice

The use of electrocorticographic (ECoG) recordings in rodents is relevant to sleep research and to the study of a wide range of neurological conditions. Adeno-associated viruses (AAVs) are increasingly used to improve understanding of brain circuits and their functions. The AAV-mediated manipulation of specific cell populations and/or of precise molecular components has been tremendously useful to identify new sleep regulatory circuits/molecules and key proteins contributing to the adverse effects of sleep loss. For instance, inhibiting activity of the filamentous actin-severing protein&#160;cofilin&#160;using AAV prevents sleep deprivation-induced memory impairment. Here, a protocol is&#160;described that combines the manipulation of cofilin function in a cerebral cortex area with the recording of ECoG activity to examine whether cortical cofilin modulates the wakefulness and sleep ECoG signals. AAV injection is performed during the same surgical procedure as the implantation of ECoG and electromyographic (EMG) electrodes in adult male and female mice. Mice are anesthetized, and their heads are shaved. After skin cleaning and incision, stereotaxic coordinates of the motor cortex are determined, and the skull is pierced at this location. A cannula prefilled with an AAV expressing cofilinS3D, an inactive form of cofilin, is slowly positioned in the cortical tissue. After AAV infusion, gold-covered screws (ECoG electrodes) are screwed through the skull and cemented to the skull with gold wires inserted in the neck muscles (EMG electrodes). The animals are allowed three weeks to recover and to ensure sufficient expression of cofilinS3D. The infected area and cell type are verified using immunohistochemistry, and the ECoG is analyzed using visual identification of vigilance states and spectral analysis. In summary, this combined methodological approach allows the investigation of the precise contribution of molecular components regulating neuronal morphology and connectivity to the regulation of synchronized cerebral cortex activity during wakefulness and sleep.

This article describes a protocol for the manipulation of molecular targets in the cerebral cortex using adeno-associated viruses and for monitoring the effects of this manipulation during wakefulness and sleep using electrocorticographic recordings.

التسجيل الكهربائي لمناطق القشرة الدماغية التي تم التلاعب بها باستخدام فيروس مرتبط بال أدينو يستهدف كوفلين في الفئران

The use of electrocorticographic (ECoG) recordings in rodents is relevant to sleep research and to the study of a wide range of neurological conditions. ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

Modeling Stroke in Mice: Focal Cortical Lesions by Photothrombosis

Stroke is a leading cause of death and acquired adult disability in developed countries. Despite extensive investigation for novel therapeutic strategies, there remain limited therapeutic options for stroke patients. Therefore, more research is needed for pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Given the inability of in vitro models to reproduce the complexity of the brain, experimental stroke models are essential for the analysis and subsequent evaluation of novel drug targets for these mechanisms. In addition, detailed standardized models for all procedures are urgently needed to overcome the so-called replication crisis. As an effort within the ImmunoStroke research consortium, a standardized photothrombotic mouse model using an intraperitoneal injection of Rose Bengal and the illumination of the intact skull with a 561 nm laser is described. This model allows the performance of stroke in mice with allocation to any cortical region of the brain without invasive surgery; thus, enabling the study of stroke in various areas of the brain. In this video, the surgical methods of stroke induction in the photothrombotic model along with&#160;histological analysis are demonstrated.

Described here is the photothrombotic stroke model, where a stroke is produced through the intact skull by inducing permanent microvascular occlusion using laser illumination after administration of a photosensitive dye.

النمذجة السكتة الدماغية في الفئران: الآفات القشرية البؤرية عن طريق Photothrombosis

Stroke is a leading cause of death and acquired adult disability in developed countries. Despite extensive investigation for novel therapeutic strategies, ...

Caenorhabditis elegans as a Model System for Discovering Bioactive Compounds Against Polyglutamine-Mediated Neurotoxicity

Age-related misfolding and aggregation of pathogenic proteins are responsible for several neurodegenerative diseases. For example, Huntington&#39;s disease (HD) is principally driven by a CAG nucleotide repeat that encodes an expanded glutamine tract in huntingtin protein. Thus, the inhibition of polyglutamine (polyQ) aggregation and, in particular, aggregation-associated neurotoxicity is a useful strategy for the prevention of HD and other polyQ-associated conditions. This paper introduces generalized experimental protocols to assess the neuroprotective capacity of test compounds against HD using established polyQ transgenic Caenorhabditis elegans models. The AM141 strain is chosen for the polyQ aggregation assay as an age-associated phenotype of discrete fluorescent aggregates can be easily observed in its body wall at the adult stage due to muscle-specific expression of polyQ::YFP fusion proteins. In contrast, the HA759 model with strong expression of polyQ-expanded tracts in ASH neurons is used to examine neuronal death and chemoavoidance behavior. To comprehensively evaluate the neuroprotective capacity of target compounds, the above test results are ultimately presented as a radar chart with profiling of multiple phenotypes in a manner of direct comparison and direct viewing.

Caenorhabditis elegans as a Model System for Discovering Bioactive Compounds Against Polyglutamine-Mediated Neurotoxicity

Here, we present a protocol to assess the neuroprotective activities of test compounds in Caenorhabditis elegans, including polyglutamine aggregation, neuronal death, and chemoavoidance behavior, as well as an exemplary integration of multiple phenotypes.

Caenorhabditis elegans كنظام نموذجي لاكتشاف المركبات النشطة بيولوجيا ضد السمية العصبية بوساطة البولي جلوتامين

Age-related misfolding and aggregation of pathogenic proteins are responsible for several neurodegenerative diseases. For example, Huntington&#39;s ...

Constipation Assays in &lt;em&gt;Drosophila&lt;/em&gt; Flies

Measuring Constipation in a Drosophila Model of Parkinson's Disease

Non-motor symptoms in Parkinson's disease (PD) are common, difficult to treat, and significantly impair quality of life. One prevalent non-motor symptom is constipation, which can precede the diagnosis of PD by years or even decades. Constipation has been underexplored in animal models of PD and lacks specific therapies. This assay utilizes a Drosophila model of PD in which human alpha-synuclein is expressed under a pan-neuronal driver. Flies expressing alpha-synuclein develop the hallmark features of PD: the loss of dopaminergic neurons, motor impairment, and alpha-synuclein inclusions.
This protocol outlines a method for studying constipation in these flies. Flies are placed on fly food with a blue color additive overnight and then transferred to standard food the following day. They are subsequently moved to new vials with standard fly food every hour for 8 h. Before each transfer, the percentage of blue-colored fecal spots compared to the total fecal spots on the vial wall is calculated. Control flies that lack alpha-synuclein expel all the blue dye hours before flies expressing alpha-synuclein. Additionally, the passage of blue-colored food from the gut can be monitored with simple photography. The simplicity of this assay enables its use in forward genetic or chemical screens to identify modifiers of constipation in Drosophila.

Author Spotlight: Exploring Non-Motor Symptoms in Parkinson&#039;s Disease 

This protocol presents an assay for modeling constipation in an alpha-synuclein based Drosophila model of Parkinson's disease.

قياس الإمساك في نموذج ذبابة الفاكهة لمرض باركنسون

Non-motor symptoms in Parkinson's disease (PD) are common, difficult to treat, and significantly impair quality of life. One prevalent non-motor symptom ...